病毒的MOI乌木是什么么意思?

腺病毒_百度百科
腺病毒(adenovirus)是一种没有的直径为70~90 nm的颗粒,由252个呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含35 000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。
人体腺病毒已知有52种,分别命名为adl~ad52,研究得最详细是ad2。腺转录产生mRNA,已知的至少有5个:EⅠ区位于病毒基因组左侧,可再分成EⅠA和EⅠB,与细
胞转化有关;EⅡ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的复制;EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种;EⅣ区位于ad2基因组右端,受EⅡ区编码的DNA结合蛋白质调控;第5个转录单位在中期合成ad2蛋白质Ⅳ。
腺病毒对啮齿类动物有致癌能力,或能转化体外培养的细胞。使细胞转化只需要腺病毒基因组的一部分,这些基因位于基因组的左端,约占整个基因组的7%~10%。尽管腺病毒分布很广,但对人体不出现致癌性。人体细胞是一类允许细胞(permissive cell),即这类细胞允许感染入侵的病毒在细胞内复制,最后细胞裂解死亡而释放出大量子代病毒。在体外培养的多种人体肿瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒,但在人的1号染色体上有adl2的整合位点,这意味着人体细胞对于腺病毒也可能是非允许细胞,即这类细胞在后,病毒不能在细胞内复制增殖,但可整合在受感染细胞的基因组内。这些细胞被病毒,表型发生改变,且可在体外无限期地培养传代。
腺病毒呈无的球形结构,其病毒粒子在感染的细胞核内常呈晶格状排列,每个病毒颗粒包含一个36 kb的线
腺病毒结构示意图
性双链DNA,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-pea,t ITR), ITR的内侧为病毒包装信号,是病毒包装所需要的顺式作用元件。组包含早期表达的与腺病毒复制相关的E1~E4基因和晚期表达的与腺病毒颗粒组装相关的L1~L5基因。线状双股DNA与核心蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯,被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称,由252个直径8~10 nm的壳粒组成,壳粒排列在三角形的面上,每边6个,其中240个为六邻体(非顶点壳粒) ,另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体,三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底,塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4,基底包含两个区域P1、P2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血清型的标准,它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分,是病毒体对免疫选择压力最敏感的部位。每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77. 5 nm的纤维突起,这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出,纤维顶端形成头节区,纤突有血清特异性,且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决定位点。[1]
腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质,病毒体分子量约为175×106。病毒基因组为线状双链DNA,大约含35kb~36kb,腺病毒12、18和31型的DNA组成中,G+C mol%最低(48%~49%),属于对动物具有高致癌性基因型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+C mol%较高(61%),致癌性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准,根据其基因同源性将人腺病毒分为A~F等6组。
腺病毒的基因组以线性的双链DNA形式存在,由蛋白VII和一种称为mu的小蛋白紧密地环绕在其周围,起到类组蛋白样的作用。另一种蛋白V将这种DNA-蛋白复合物连接起来,并通过蛋白VI与病毒衣壳连接在一起。在两条链的5′端各以结合着一个被称为DNA末端蛋白(pTP)复合物(DNA-TPC)的特化的结构,与腺病毒复制密切相关。腺病毒基因组的两端各有一段100bp的反向末端重复序列(ITR),是复制的起始位点。在左端ITR的3′侧有一段长约300bp的包装信号(ψ)介导腺病毒基因组包装入病毒衣壳。对腺病毒而言,只有包括两端的ITR和包装信号(ψ)的约0.5kb的序列是顺式作用元件,也就是说必须由自身携带,而其他的30余种蛋白都可以通过辅助病毒(或细胞)反式补足。
病毒蛋白约11种(TP和PⅠ~PⅩ),其中有4种蛋白(病毒多肽PⅤ、PⅦ,末端蛋白TP、酶蛋白PⅩ)与病毒基因构成病毒核心,多肽PⅦ是主要的核心蛋白,如同组蛋白一样包裹病毒基因DNA。构成病毒衣壳的蛋白质约7种。多肽PⅡ是病毒衣壳中最丰富和最主要成分,六邻体是由3个PⅡ分子紧密相连组成。多肽PⅥ、PⅧ在六邻体与病毒核心之间形成连接桥,并与多肽PⅨ一起稳定着六邻体分子的晶格排列。5个分子多肽PⅢ相连构成五邻体的基座蛋白,PⅢa为五邻体的周围蛋白,也参与衣壳的组成,五邻体通过PⅤ与病毒核心相连。多肽PⅣ主要构成病毒三聚体纤突,纤突与病毒血凝活性相关,因(纤突)具有型特异性,常用试验(HI)对临床分离株进行分型。
分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来,已陆续发现了100余个血清型,其中人腺病毒有49种,分为A、B、C、D、E和F六个亚群(subgroup)。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群,在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强,滴度通常可以达到109pfu (plaque forming unit)/ml,其在单个细胞中的基因组拷贝数可达104(约占细胞总DNA的10%)。病毒颗粒比较稳定,通过CsCl梯度离心可以达到pfu/ml,满足动物实验的要求。
腺病毒对呼吸道、胃肠道、和、眼、肝脏等均可感染,人腺病毒约1/3的已知血清型通常与人类疾病相关,但一种血清型可引起不同的临床疾患;相反,不同血清型也可引起同一种疾患。
呼吸道感染
呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎,同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉
痛等,包括以下4种不同的综合征。
1.性咽喉炎 通常为婴儿和儿童发病,由C组病毒引起,出现咳嗽,鼻塞、发热和咽喉部溃疡等症状,这些表现难以与其他病毒引起的轻型鉴别。
2.(pharyngoconjunctival fever)症状与急性发热性咽喉炎相似,但常同时发生。咽结膜热有暴发流行倾向,如游泳池结膜炎,多由B组腺病毒3和7型所致,愈后尚好,一般无后遗症。
3.急性呼吸道疾病(acute respiratory diseases,ARD) 这一综合征由、发热、咳嗽和全身不适为特点,常在军队的新兵中流行,多因突然紧张、劳累、聚集等所致。此感染多由腺病毒4、7型引起,也可见于3型。
4、肺炎 腺病毒肺炎约占儿童期肺炎的10%,多由腺病毒3、7型引起;在青年人腺病毒肺炎的病死率为8%~10%;肺炎也是新兵急性呼吸道疾病的一种严重表现。
腺病毒致轻型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎的并发症。滤泡性结膜炎可由许多型腺病毒引起,类似于衣原体性结膜炎,而且为自限性。由腺病毒8、9和37型引起的角结膜炎为重型感染,具高传染性,以急性结膜炎开始,扩至耳前淋巴结,随后发生角膜炎。
许多腺病毒在肠道细胞中复制,随粪便排出,但大多血清型与胃肠道疾病无关。而40型和41型腺病毒可引起婴幼儿与年少(4岁以下)儿童的胃肠炎,致腹痛、腹泻。C组腺病毒能引起某些婴幼儿肠套叠。
腺病毒11、12型能引起儿童急性出血性膀胱炎,尿中出现病毒。37型可引起女性宫颈炎和男性尿道炎,常由性传播感染。在免疫功能低下者可引起偶发或严重的病毒感染,尤其在器官移植病人中发生严重呼吸道感染和病毒性肝炎,多由1、5和7型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多种血清型腺病毒,并能出现抗原性介于中间的杂合型毒株,而且常为致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的E1A蛋白可反式激活HIV的转录,加速HIV的复制。临床发现37%的艾滋病患者病毒性腹泻是由腺病毒所致。
腺病毒感染后可获得对同型的持久免疫力
与绝大多数呼吸道感染的病原相比,机体对腺病毒的再感染能产生有效的免疫。起保护作用的是体内产生的循环中和抗体。正常的健康成人一般也具有多型的抗体。约40%~60%的6~15岁的人具有1、2和5型中和抗体,但3、4和7型抗体很少。母亲的抗体能保护婴儿免除严重的腺病毒呼吸道感染。
腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞,将基因组释放到宿主细胞核中,以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段,细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒,即第二阶段,作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内完成,第二阶段则更快,只需4~6个小时。
粘附和进入细胞
腺病毒感染细胞的过程是从腺病毒纤毛的头节区粘附到细胞表面的特异性受体开始的。因为人腺病毒主要与柯萨奇B病毒共用一种受体,因此这种受体被称为柯萨奇/腺病毒受体即CAR(coxsackie/adenovirus receptor)。接下来病毒纤毛基底部五邻体表面的三肽RGD与细胞表面的αvβ3和αvβ5整合素结合,通过内吞作用将腺病毒内化到细胞中并进入溶酶体。在溶酶体的酸性环境下,腺病毒衣壳的构象将发生变化,被从溶酶体中释放出来,躲过溶酶体的消化作用。最后,腺病毒颗粒转位到细胞核,通过核孔将病毒DNA释放到细胞核内。相对于脂质体转染,腺病毒基因组进入细胞核是一个非常高效的过程,一般可以达到40%,前者虽然进入胞质的效率与后者相当,而DNA进入细胞核的效率却只有后者的1/1000。
转录与复制
一旦病毒基因组进入细胞核,就将进行一系列的复杂而有序的逐级放大的剪切和转录过程。一般的,以病毒DNA开始复制为分界线,按转录时间的先后,将腺病毒基因大致区分为早期(E1~4)和晚期转录单位(L1~5)。各种腺病毒基因又可以进一步地分为更小的转录单位,如E1区可以进一步分为E1A和E1B,每个转录单位都至少有一个独特的启动子。腺病毒基因组进入细胞核后,细胞首先与E1A区上游的增强子结合,表达E1A蛋白,该蛋白的作用是调节细胞代谢,使病毒DNA更易于在细胞中复制。E1A蛋白还可以激活其他早期基因(E1B、E2A、E2B、E3和E4)的启动子,其中E2B驱动另外三个与病毒复制有关的早期基因转录单位末端蛋白前体(pTP, precursor terminal protein)、单链DNA结合蛋白(ssDBP, single-stranded DNA binding proteins)以及DNA聚合酶(DNA pol, DNA polymerase)的表达,这三个基因的表达产物紧密地结合成一个复合物,与至少三种细胞蛋白相互作用,启动病毒基因组的复制。
一般而言,DNA的复制是由RNA启动的,而在腺病毒却是所谓的蛋白启动(protein-priming)。如前所述,腺病毒双链DNA的每条单链的5′端有pTP蛋白结合,pTP通过其Ser-OH与DNA 5′端的dCMP 5′磷酸之间形成磷酸二脂键。腺病毒的DNA复制首先是以5′端结合有pTP的dCMP作为引物,以3′端的末端反向重复序列(ITR)为模板,进行链置换(strand displacement)合成,置换出
的单链分子可以自我退火环化,形成锅柄样环形分子,然后这种环形分子再以相同的机制合成出子代双链DNA分子。
病毒基因组复制通常在感染后数小时开始,同时早期基因的转录和翻译被关闭,晚期基因开始表达。大部分的晚期基因的转录是以一个共同的主要晚期启动子(MLP, Major Late Promoter)调控的。实际上,MLP的活性与病毒基因组复制密切相关,有研究表明一旦腺病毒基因组开始复制MLP的活性将明显增强,对此我们将另外行文详述。晚期基因主要编码腺病毒的结构蛋白。病毒结构蛋白在细胞核内聚集形成病毒衣壳,病毒的基因组被包装进去,形成有感染能力的病毒颗粒,并最终裂解宿主细胞被释放出去,完成腺病毒的生活周期。腺病毒有明显的种属特异性,人的野生型5型腺病毒(wtAd5)感染其他的非人类细胞(如鼠类细胞)后可以表达早期基因,基因组也可有一定程度的复制并能够形成一些不成熟的病毒颗粒,却不能形成成熟的病毒颗粒,也不能二次感染其他细胞。
形态学检查
对难于培养的肠道腺病毒,从粪便标本中粗提后,经电子显微镜或免疫电镜观察。
病毒分离与鉴定
1.分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。
2.病毒鉴定 用荧光标记的抗六邻体抗体与分离培养细胞作用来鉴定腺病毒,也可用血凝抑制(hemoagglutination inhibition,HI)试验或中和试验(neutralization test,NT)检测属和组特异性抗原并鉴定病毒的血清型。
腺病毒可用Shell vial技术进行快速鉴定。病毒标本经抗生素和离心处理,取上清接种于有细胞的Shell vial培养瓶,孵育1~2天,用特异性六邻体单克隆抗体对其进行检测。也可用病人鼻粘膜上皮脱落细胞直接染色检测病毒抗原。
用DNA杂交或内切酶酶切等鉴定分离培养的病毒DNA;PCR可用于腺病毒感染的诊断,引物设计主要根据腺病毒六邻体、VAI和VAII编码区序列,能检测所有血清型,而且其敏感性很高,能检测某些病人潜在的腺病毒。用腺病毒41型BgIII-D片段作探针诊断腺病毒腹泻,其检出率可达80%。
血清学检查
常用血清学方法包括IF、CF、EIA、HI及NT等试验,采取患者急性期和恢复期双份血清进行检测,若恢复期血清抗体效价比急性期增长4倍或以上,即有诊断意义。快速检测血清可用ELISA法或乳胶凝集试验。
常用来直接检测腺病毒在呼吸道和胃肠道的感染,较快速且灵敏度较高。免疫荧光(尤其对呼吸道标本、咽拭子和活组织标本)和酶免疫分析(尤其对于粪便标本)是常用的方法,与细胞培养相比,免疫荧光所测腺病毒的灵敏性能提高40%~60%,其它直接测定抗原的方法包括免疫层析法和乳胶凝集法。研究证实,与细胞培养检测方法相比,使免疫层析试剂盒所测定的灵敏度可达90%。[1]
腺病毒的甲醛灭活疫苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜炎爆发的危险性降至最小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控制流行性结膜炎的发生。对腺病毒感染的治疗仍无有效药物。
腺病毒基因产物的主要功能
E1区基因表达产物
可以进一步分为E1A和E1B。E1A主要由两种成分构成,分别为289R(或13S)和243R(或12S)。这些E1A蛋白的主要功能是调节细胞代谢,使细胞对病毒复制更易感E1B19K与细胞Bcl-2基因的表达产物同源,可以通过灭活和清除Bax家族成员来防止细胞发生凋亡或坏死。E1B55K基因产物可以下调的转录水平,当然这种调节功能不是绝对的,其他一些腺病毒基因(如E4 orf6)也参与了这一过程。另外,E1B55K基因产物还与病毒复制、病毒晚期mRNA的转录以及病毒RNA的转运有关。
E2区基因表达产物
可分为E2A和E2B。其中,E2A即DNA结合蛋白(DBP,DNA Binding Protein);E2B主要产物有两种,分别是末端蛋白前体(pTP)和病毒DNA聚合酶(pol)。三种蛋白与至少三种细胞内的因子相互作用,启动腺病毒DNA复制以及病毒晚期基因的转录和翻译过程。
E3区基因表达产物
主要功能是破坏宿主的免疫防御机制,而与病毒基因组的复制无关。E3基因的产物之一11.6Kd,由于可以在病毒感染的晚期裂解细胞并释放病毒颗粒而被称为腺病毒死亡蛋白(ADP,adenovirus death protein)。gp 19K蛋白可以在内质网上与MHC I类分子的重链结合阻止其转运到细胞表面,并且可以延缓MHC I的表达。RID α&β以及14.7Kd可以抑制由TNF诱发的细胞凋亡,促进Fas降解,下调TNF受体水平。
E4区基因表达产物
E4区的基因产物通常被称为orf 1~6/7,主要与病毒信使RNA的代谢有关。还有促进病毒DNA复制以及关闭宿主蛋白合成的功能。研究发现,一些E4产物可以与DNA激活的蛋白激酶结合,防止病毒DNA发生串联。由于该激酶可以激活p53基因,因此可以认为一些E4区基因产物可以抑制细胞凋亡。许多E1B和E4基因产物都与拮抗E1A蛋白功能有关。比如,E4 orf4抑制E1A对E2F启动子的激活;E4 orf3VA RNA使一些由腺病毒转录的非翻译RNA,与腺病毒抵抗宿主细胞免疫有关。
宿主范围广对人致病性低
腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已相当清楚,在人群中早已流行(70-80%成人体内都有腺病毒的中和抗体存在)。人类感染野生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状,且病毒唑治疗有效。
在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因
只能感染增殖性细胞,因此DNA转染不能在非增殖细胞中进行,而必须使细胞处于持续培养状态。腺病毒则能感染几乎所有的细胞类型,除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统,它可以使转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比。
能有效进行增殖 滴度高
腺病毒系统可产生1010到1011VP/ml,浓缩后可达1013VP/ml,这一特点使它非常适用于基因治疗。
与人类基因同源
腺病毒载体系统一般应用人类病毒作为载体,以人类细胞作为宿主,因此为人类蛋白进行准确的翻译后加工和适当的折叠提供了一个理想的环境。大多数人类蛋白都可达到高水平表达并且具有完全的功能。
不整合到染色体中 无插入致突变性
逆转录病毒可随机整合到宿主染色体,导致基因失活或激活癌基因。而腺病毒则除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此不会干扰其它的宿主基因。在卵细胞中整合单拷贝病毒则是产生具有特定特征的转基因动物的一个较好的系统。
能在悬浮培养液中扩增
可以适应悬浮培养,这一调整可使病毒大量扩增。大量事实证明悬浮293细胞可在1~20L的生物反应器中表达重组蛋白。
能同时表达多个基因
这是第一个可以在同一细胞株或组织中用来设计表达多个基因的表达系统。最简单的方法是将含有两个基因的双表达盒插入腺病毒转移载体中,或者用不同的重组病毒共转染目的细胞株来分别表达一个蛋白。测定不同重组病毒的MOI比值可正确估计各重组蛋白的相对共表达情况。
正是由于具有以上一些优点,腺病毒被极其广泛地应用于体外、体内接种疫苗、和基因治疗等各个领域。
腺病毒感染主要在冬春季流行,容易在幼儿园、学校和军营新兵中暴发流行。一般来说,腺病毒主要通过呼吸道飞沫、眼分泌物,经呼吸道或接触传播;肠道感染主要通过消化道传播。其预防措施和其他呼吸道、预防相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫。平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身体;室内多通风,保持室内环境清洁;冬春流行季节尽量少去人员密集的公共场所,外出时戴口罩,避免接触病人,以防感染。
一旦发生、咽喉疼痛和结膜炎的症状,要及早到医院看病,早隔离、早治疗。出现5人以上集体发病的情况要及时向所在地区防疫部门报告,及时采取有效的防控措施,避免疾病漫延。在腺病毒流行季节,托幼机构上呼吸道感染患儿应回家隔离休息,以免造成传播流行。患病后尽量在附近医院就诊,避免到病人较集中的大医院观察室输液,以防造成交叉感染。出现严重咳嗽和呼吸困难症状多属严重病例,应及时到医院住院治疗,以免延误病情。
陈娜娜,向冬喜,郑丛龙. 腺病毒及其研究进展[J]. 大连医科大学学报,-590.腺病毒(adenovirus)转染MOI的测定如何才算是合适的感染复数啊急(感染复数,转染,腺病毒,骨髓)
18:00:06&&&来源:&&&评论:&&
[腺病毒(adenovirus)转染MOI的测定如何才算是合适的感染复数啊急(感染复数,转染,腺病毒,骨髓)] 实验中用到腺病毒(adenovirus)转染MSC(骨髓间充质细胞),手头有两个毒种,其中一个有标签(GFP),而另一个没有,用不同感染复数(根据估算出的滴度和计数的细胞数)感染细胞,2天时看到各个孔均有病变,GFP镜下见荧光(但不是很能分出个数来 好像过了MOI50就看不出区别了),但3天后,GFP组细胞均崩解了,
请问做过的朋友、知道的朋友帮忙,这样看什么样的感染复数才合适啊,没有标 关键词:[感染复数 转染 腺病毒 骨髓 间充质 细胞数 病变]…
实验中用到腺病毒(adenovirus)转染MSC(骨髓间充质细胞),手头有两个毒种,其中一个有标签(GFP),而另一个没有,用不同感染复数(根据估算出的滴度和计数的细胞数)感染细胞,2天时看到各个孔均有病变,GFP镜下见荧光(但不是很能分出个数来 好像过了MOI50就看不出区别了),但3天后,GFP组细胞均崩解了,
请问做过的朋友、知道的朋友帮忙,这样看什么样的感染复数才合适啊,没有标签应该怎样测啊。比较急,大家帮忙,谢谢了!
回复我觉得你应该先知道腺病毒(adenovirus)对MSC细胞的感染效率,然后用一个细胞感染一个病毒的量就可以了感染效率的测定,你可以用测病毒滴度的方法来确定(比较病毒对293细胞和MSC形成空斑的多少,来确定你的感染复数
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昆虫细胞--高MOI杆病毒感染
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MOI Multiplicity Of InfectionDIPDefective Interfering ParticlesMOI
MOIPoissonMOI31.5~2.5106/ml
MOI1~3106/ml
MOI3107pfu/ml20%2.510682106/ml2--2106/ml20%
2~8105/ml20~40%500ml272100~130rpm
1.5~2.5106/ml1
2106/ml5107pfu/mlMOI312%
关于生物在线
联系人:生物在线编辑部
电话:021-
传真:021-终于弄出了moi 3d不闪退无病毒含插件版,好辛苦哦!
本帖最后由 xmhrl 于
23:03 编辑
“选项”还是在下面看着舒服
TM截图41.jpg (296.92 KB, 下载次数: 6)
23:01 上传
还有一点小小的BUG没解决,但也不影响使用。
+1<span class='aboc_digg_num' id='aboc_digg_num_
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我的 选项 一直就在下面 弄不清你的原来好像不在下面 这个在上和在下有啥不一样吗 貌似你没有说道重点啊 至于插件的问题 我个人并不提倡用 那个意义不大 为什么呢 以为我装了已经直线就不能用了 平常的命令对付平常的制作已经够用
这个版本的选项和帮助菜单在上面,我看着不舒服,给还原到下面来了,命令都能用,只有插件中一个pipe命令不能用&
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本帖最后由 xmhrl 于
00:38 编辑
zhucheng2320 发表于
我的 选项 一直就在下面 弄不清你的原来好像不在下面 这个在上和在下有啥不一样吗 貌似你没有说道重点啊 至 ...
这个版本的选项和帮助菜单在上面,我看着不舒服,给还原到下面来了,命令都能用,只有插件中一个pipe命令不能用。
这是原版本的图
TM截图27.jpg (274.4 KB, 下载次数: 0)
00:38 上传
+1<span class='aboc_digg_num' id='aboc_digg_num_
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楼主能分享下安装程序文件嘛
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呵呵,终于找到这个了
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这个是狐狸版本的!不过我用的时候也是退出过的
经我改造了一个版本,彻底不退出了。&
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邹邦奎 发表于
这个是狐狸版本的!不过我用的时候也是退出过的
经我改造了一个版本,彻底不退出了。
如何改造呢
是否可以告知&
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楼主能分享下安装程序文件嘛
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辛苦了老大这个是v2的还是v3的v3的一直没破解好,老是退出
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没看到程序呀,老大快放出来呀
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这个版本我的也会闪退啊
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xmhrl 发表于
经我改造了一个版本,彻底不退出了。
如何改造呢&&是否可以告知
在吗 可以发一个不闪退的 moi3d 给我吗&
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学习一下。。。。。
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学习一下。。。。。。。
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楼主,能不能把文件放出来啊。
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楼主能分享下安装程序文件嘛
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:hug:好。。。。
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可以,好的不得了!!
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应该下载下来好好学习一下啊
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为什么不分享呢?是要独享吗?
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这个好用,谢谢分享
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分享一下不闪退的,感谢啦
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我顶,谢谢分享
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怎么没有看到程序文件呢&&
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好东西啊&&是真的不闪退吗 谢谢
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没有安装包呀
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什么都没有。。呵呵
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不错啊 呵呵
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啥都看不到 啊
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LZ快分享下啊
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没有软件 是不是忽悠啊
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分享分享吧。
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感谢楼主分享,能发我邮箱一份吧,谢谢!
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大师,能发我一份?
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zhucheng2320 发表于
我的 选项 一直就在下面 弄不清你的原来好像不在下面 这个在上和在下有啥不一样吗 貌似你没有说道重点啊 至 ...
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我会一直等下去,等到完美不闪退版本的出现!
到天荒地老也无法叫我舍弃MOI3D的热忱!
请求版主赶紧发布吧。大家都等着不闪退版本的问世!
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发我一个 吧
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邹邦奎 发表于
如何改造呢&&是否可以告知
在吗 可以发一个不闪退的 moi3d 给我吗
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