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为什么抗原与抗体反应有特异性？
为什么抗原与抗体反应有特异性？&这是由抗原决定簇和抗体的抗原结合区的空间构象来决定的。而抗体抗原结合区的空间构象是由该区的氨基酸序列来决定。氨基酸的序列则由基因序列决定。产生抗体的B细胞在成熟过程中,编码抗体高变区的序列发生随机的突变。如果突变产生的抗体正好能和抗原提呈细胞表面所提呈的抗原结合,那这株B细胞就得以分化,分裂。这个过程叫做阳性筛选。所以,所谓抗体的特异性,并不是针对抗原,而是针对某个特定的空间构象。这就是为什么有的抗体可以识别2个毫不相干的抗原。比如抗梅毒抗体,同时可以识别心磷脂。&工作原理：&（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 &（2）激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 &（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 &（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 &（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 &（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。&&相关优势试剂推荐：AN-15358R,G蛋白偶联受体GPR12蛋白抗体|GPR12 抗体价格AN-0790R,紧密连接蛋白1抗体(C端)|Claudin 1抗体价格埃博拉病毒(EBOV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)马兜铃酸A标准品,cas:313-67-7对照品盐酸多柔比星标准品/对照品AN-13798R,19号染色体开放阅读框77抗体|C19orf77抗体价格人骨成型蛋白5(BMP5)ELISA检测试剂盒说明书CAS:50-99-7 ,D-无水葡萄糖价格CAS:,直接蓝6标准品/对照品价格人热休克因子1(HSF-1)ELISA试剂盒,96T/48T鹅不食草对照品/标准品四氧化三钴|CAS号|Tricobalt tetraoxide苦藏花素标准品,cas:138-55-6对照品人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒,96T/48T酸枣仁皂苷A标准品/对照品AN-9490R,9号染色体开放阅读框174抗体|C9orf174抗体价格CAS:519-02-8,苦参碱标准品/对照品CAS:498-95-3,3-哌啶甲酸价格人血红蛋白(Hb)ELISA检测试剂盒说明书CAS:535-26-2,东茛菪碱标准品/对照品雄甾-4-烯-3，17-二酮（依西美坦中间体）对照品/标准品邻苯二胺/邻苯二胺OPD)|CAS号95-54-5|o-PhenylenediamineR8323600/RapID ERIC? 软件培养基厂家小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒,96T/48TAN-0822R,Tar DNA 结合蛋白43抗体|TARDBP抗体价格鸡免疫球蛋白MELISA试剂盒,AN-6001R,GTP发育调控结合蛋白1抗体|DRG1抗体价格苦玄参苷IA对照品/标准品大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒,96T/48T猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒,96T/48T青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100&三抗)重组小鼠 Dkk-3/DKK3 蛋白(His 标签)/50247-M08H癸氟奋乃静对照品/标准品重组小鼠 VDR/NR1I1 蛋白(His 标签)/51106-M08B4-羟基硫代苯甲酰胺|CAS号|4-HYDROXYTHIOBENZAMIDE重组人 EF1B/EEF1B2 蛋白(His 标签)/14611-H07E人网膜素(omentin)ELISA检测试剂盒说明书CAS:,乙醇酸钠价格重组人 MICA 蛋白(His 标签)/12302-H08HCAS:98-17-9,3-三氟甲基苯酚价格亚油酸对照品/标准品AN-12482R,磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体|phospho-APC1 (Ser688)抗体价格大鼠醛固酮(ALD)ELISA检测试剂盒说明书AN-0748R,一种肿瘤抑制基因抗体（N端）|PTEN抗体价格人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA试剂盒,96T/48T次黄嘌呤核苷|CAS号58-63-9|Inosine扑草净标准品/对照品价格葡萄球菌属细菌生化鉴定管AN-12376R,胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体|FAM20C抗体价格他扎罗汀对照品/标准品AN-5710R,乳腺癌易感基因复合蛋白4抗体|BRCC4抗体价格AN-0063R,降钙素抗体|Calcitonin抗体价格杀螟腈标准品|对照品,cas:AN-0295D-RBITC,罗丹明标记的驴抗兔IgG|Donkey Anti-rabbit IgG/RBITC抗体价格小鼠糖原合成酶激酶3&(GSK3&) ELISA试剂盒,96tCAS:,硫代羟基乙酸酐价格CAS:,活性黑KN－B有现货人免疫球蛋白轻链kappa抗体(&-IgLC)ELISA试剂盒,96T/48TARP01-10LT/Anderson&s 牡丹花培养基(含大量元素和微量元素)培养基厂家CAS:2594228,多酚氧化酶(菌菇),酪氨酸酶,Polyphenol oxidaseCAS:-3,铁破锣皂苷 Q标准品/对照品大皂角标准品/对照品AN-13009R,DNA甲基转移酶相关蛋白1抗体|DMAP1抗体价格重组小鼠 VEGFR2/Flk-1/CD309/KDR 蛋白(Fc 标签)/50998-M02HCAS:-8,拉米夫定中间体 CTS现货供应CAS:,(R)-3-羟基丁酸甲酯价格C0208-7,兔抗hTG血清2-氯-5-溴苯甲酸|CAS号|5-Bromo-2-chlorobenzoic acidCT0166B/头孢噻肟 CTX30培养基厂家AN-3214R,磷酸化HER2受体抗体|Phospho-HER2(Tyr1248)抗体价格乙菌利标准品|对照品,cas:AN-0452R,核凋亡诱导因子蛋白1|NAIF1 protein抗体价格菜蓟苦素标准品,cas:对照品维生素A厂家|CAS号68-26-8
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&& 用标记抗体或抗原进行的抗原、抗体反应
用标记抗体或抗原进行的抗原、抗体反应
用、或或，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的与抗原或抗体连接之后不改变后者的特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。
1．　免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或中的相应抗原（或抗体）结合，进行定性定位检查抗原或抗体的方法。
（1）直接荧光法：把加到待检的细胞悬液，细胞或上进行，经后，洗去未结合的荧光抗体，将待检在下观察，有荧光的部位即有相应抗原存在，此法可用于细胞、带某种特异抗原的细胞（如T细胞和B细胞）或的检查，也可用于组织中沉着的的检查。本法的缺点是检查多种抗原，就需分别制备相应的多种标记抗体。
（2）间接荧光法：可克服直接法需制备多种荧光抗体的复杂操作。将组织或细胞上的抗原直接与相应抗体（不标记荧光）结合，此为第一抗体，再把能与第一抗体特异结合的的抗体加入，此为荧光标记的第二抗体，观察结果与直接法相同。间接法比直接法敏感性高，如果用于检查抗原的第一抗体是人或动物的只需制备一种抗人或动物的荧光抗体（图20-5）。
图20-5 免疫荧光直接法及间接法原理示意图
免疫荧光技术在传染病诊断上有广泛的用途，如在、、的，检查抗原或抗体，如查出抗体，可做为近期接触抗原的标志，所以使用荧光标记抗IgM可诊断近期。除方面的应用外，还可利用鉴定的。使用(fluorescene-activated cell sorting,FACS)，能自动检测细胞的大小、荧光强度。针对不同抗原，可以使用两种不同的，如用异硫氰荧光素（FITC）发黄绿荧光，用（TMRITC）发红色荧光。由于荧光颜色不同标记两种不同的抗体，对同一细胞进行双标记染色。对淋巴细胞亚类鉴定起着巨大推动作用。应用间接荧光法也用于的检查。
2．放射免疫分析法 放射免疫分析法（radioimmunoassay RIA）应用竞争性结合的原理，应作同素标记抗原（或抗体）与相应抗体（或抗原）结合，通过测定物的放射活性判断结果，本方法可进行超微量分析，敏感性高，可用于测定抗原、抗体、。本法常用的同位素有125Ⅰ和131Ⅰ。
放射免疫分析常用的有液相法和固相法两种：
（1）液相法：将待检标本（例如含抗原）与定时的的胰岛素（抗原）和定时的抗体混合，经一定作用时间后，分离收集抗原抗体复合物及游离的抗原，测定这两部分的放射活性，计算结合率。在反应系统中，待检标本的胰岛素抗原与同位素标记的胰岛素竞争夺战　性与结合。非标记的抗原越多，标记抗原与抗体形成的越少。非标记抗原含量与标记抗原抗体复合物的量呈一定的函数关系。预先用标准的非标记抗原作成标准曲线后，即可查出待检标本中胰岛素的含量（图20-6）。
图20-6 液相放射免疫分析法原理及标准曲线
（2）固相法：将抗原或抗体吸附到固相载体表面，然后加待检标本，最后加标记抗体。测定固相载体的放射活性，常用的固相载体有溴化氰（CNBr）化的纸片或小管（图20-7）。
图20-7 固相放射免疫分析法原理
放射免疫分析法应用范围广泛，包括多种（胰岛素、、等）、药物、等。
3．分析法 酶联免疫分析法（enzyme immunoassay,EIA）是当前应用最广泛的免疫检测方法。本法将抗原抗体反应的特异性与酶对高效催化作用结合起来，根据酶作用底物后显色，以颜色变化判断试验结果，可经酶标测定仪作定量分析，敏感度可达ng水平。常用于标记的酶有过氧化物酶(horseradish peroxidase)、碱性磷酶（alkaline phosphatase）等。它们与抗体结合不影响抗体活性。这些酶具有一定的稳定性，制成酶标抗体可保存较长时间。目前常用的方法有酶标免疫组化法和。前者测定或组织内的抗原；后者主要测定或抗体。本法既没有放射性污染又不需昂贵的测试仪器，所以较放射免疫分析法更易推广。
图20-8　生物素－酶标亲合素系统反应示意图
（1）（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）:是与上述固相RIA相似的原理，将抗原或抗体吸附在固相载体表面。使抗原抗体反应在固相载体表面进行政区。可用间接法、双抗体夹心法或竞争法测定抗原或抗体。
（2）夹心法（sandwichassay）:将已知的包装在固相载体（塑料板凹孔或纸片上），加入待检标本，标本中的抗原即可与载体上的抗原结合，洗去未结合的材料后加入该抗原的酶标记抗体，洗去未结合的酶标抗体，加底物显色，用酶免疫检测仪测量颜色的光密度，可定量测定抗原。
间接法（indirecr ELISA）常用于检查特异抗体。先将已知特异抗原包被固相载体，加入待检标本（可能含有相应抗体），再加入酶标抗Ig的抗全（即第二抗体），经加底物显色后，根据颜色的算出标本中抗体的含量。
（3）BAS-ELISA：近年来对酶免设分析法的改进是使用生物素-亲合素-复合物作为指示剂，组成一新的放大系统进一步提高检测的敏感度。可用来检测多种系统如细菌、病毒、等。一个亲合素（avidin）可以结合4个生物素分子（biotin）。结合非常稳定。亲合素和生物素都可与抗全、酶、荧光素子结合，而不影响后者的生物活性。一个抗体分子可90个生物素分子，通过生物素又可连接多个亲合素。因此大提高检测的敏感度。目前应用生物-酶标亲合素系统（biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA），它是通过生物素标记抗体连接系统，同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统。
表20－1　测定方法敏感性比较
敏感性（每升）
双向免疫扩散试验
放射免疫分析法
酶联免疫吸附试验
定量免疫荧光分析
出自A+医学百科 “医学免疫学/用标记抗体或抗原进行的抗原、抗体反应”条目
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根据问他()题库系统分析，
试题“抗原抗体反应的基本特点是(& )①具有特异性&nb...”，相似的试题还有：
下列关于抗原和抗体叙述中不正确的是
A.抗体是由淋巴细胞产生的
B.抗原就是指侵入人体内的病原体
C.抗原与抗体的结合具有特异性
D.麻疹疫苗与麻疹病毒的抗原性相同
下列关于抗原和抗体叙述中不正确的是
A.抗体是由淋巴细胞产生的
B.抗原就是指侵入人体内的病原体
C.抗原与抗体的结合具有特异性
D.接种的疫苗相当于抗原
免疫是机体的一种特殊的保护性生理功能。下列有关论述，不正确的是()
A.非特异性免疫是与生俱来的一种天然防御功能
B.能识别抗原的细胞有：吞噬细胞、T细胞、B细胞、记忆细胞、浆细胞等
C.一种抗原只能与相应的抗体或效应T细胞发生特异性结合
D.过敏反应是指：已免疫的机体，在再次接受相同的抗原时所发生的反应全站分类导航
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版权所有& CopyRight , , All Rights Reserved抗原抗体反应
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目录1 拼音kàng yuán kàng tǐ fǎn yìng2 英文参考antigen-antibodyreaction3 概述抗原抗体反应（antigen-antibodyreaction）是指与相应之间所的结合。可发生于体内（invivo），也可发生于体外（invitro）。体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、中和等；体外反应则根据抗原的物理、抗体的类型及参与反应的介质（例如、、固相等）不同，可出现、、补体参与的反应及等各种不同的反应类型。因抗体主要存在于中，在抗原或抗体的中多采用血清作试验，所以体外抗原抗体反应亦称为血清反应（serologicreaction）。
4 抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于两中间的与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结构决定的。抗原抗体反应可分为两个阶段。第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。第二为可见反应阶段，抗原抗体复合物在因素（如电解质、pH、温度、补体）的影响下，进一步交联和聚集，表现为、沉淀、、补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，往往数分钟至数小时。实际上这两个阶段以严格区分，而且两阶段的反应所需时间亦受多种因素和反应条件的影响，若反应开始时抗原抗体浓度较大且两者适合，则很快能形成可见反应。4.1 亲水胶体转化为疏水胶体抗体是，大多数抗原亦为，它们溶解在水中皆为，不会发生沉淀。这种亲体的形成机制是因蛋白质含有大量的和残基，这些残基在溶液中带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带电荷的。如在pH7.4时，某蛋白质带负电荷，其周围出现极化的子和阳，这样就形成了水化层，再加上电荷的相斥，就保证了蛋白质不会自行聚合而产生沉淀。
抗原抗体的结合使电荷减少或消失，电子云也消失，蛋白质由亲水胶体转化为疏水胶体。此时，如再加入电解质，如NaC1，则进一步使疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。4.2 抗原抗体结合力有四种分子间引力参与并促进抗原抗体间的特异性结合。
1．电荷引力（库伦引力或静电引力）这是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。例如，一方在离解层带阳离子化的氨基残基（－NH3+），另一方在后带有阴离子化的羧基（－COO－）时，即可产生静电引力，两者相互吸引，可促进结合。这种引力和两电荷间的距离的平方成反比。两个电荷越接近，静电引力越强。反之，这种引力便很微弱。
2．范登华引力这是与原子、分子与分子互相接近时发生的一种吸引力，实际上也是电荷引起的引力。由于抗原与抗体两个不同子外层轨道上之间，使得两者电子云中的偶极摆而产生吸引力，促使抗原抗体相互结合。这种引力的小于静电引力。
3．结合力氢键是由分子中的氢原子和大的原子如氮、氧等相互吸引而形成的。当具有亲水基团（例如－OH，－NH2及－COOH）的抗体与相对应的抗原彼此接近时，可形成氢键桥梁，使抗原与抗体相互结合。氢键结合力较范登华引力强，并更具有特异性，因为它需要有供氢体和受氢体才能实现氢键结合。
4．疏水作用抗原抗体分子侧链上的非极性（如、和）在水溶液中与水分子间不形成氢键。当抗原表位与抗体结合点靠近时，相互间正、负极性消失，由于静电引力形成的亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，从而促进抗原与抗体间的相互吸引而结合。这种疏水结合对于抗原抗体的结合是很重要的，提供的作用力最大。
5 抗原抗体反应的特点5.1 特异性抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原与抗体的结合具有高度的特异性。这种特异性如同钥匙和锁的关系。例如只能与相应的结合，而不能与外毒素结合。但较大分子的蛋白质常含有多种抗原表位。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位，或抗原、抗体间构型部分相同，皆可出现交叉反应。
图9-1沉淀反应中没淀量与抗原抗体的比例关系
Ag：抗原；Ab：抗体5.2 按比例在抗原抗体特异性，生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体，均可发现只有在两者分子比例合适时才出生现最强的反应。以沉淀反应为例，若向一排试管中中入一定量的抗体，依次向各管中加入递增量的相应可溶性抗原，根据所形成的沉淀物及抗原抗体的比例关系可绘制出反应曲线（图9-1）。从图中可见，曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围，称为抗原抗体反应的等价带（zoneofequivalence）。在此范围内，抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多。其中有一管反应最快，沉淀物形成最多，上中几乎无游离抗原或抗体存在，表明抗原与抗体浓度的比例最为合适，称为最适比（optimalratio）。在等价带分别为抗体过剩则无沉淀物形成，这种现象称为带现象（zonephenomenon）。出现在抗体过量时，称为前带（prezone），出现在抗原过剩时，称为后带（postzone）。
关于抗原抗体结合后如何形成聚合物，曾经不少解释。结合现代的呼电镜观察所见，仍可用Marrack（1934）提出的网格学说（latticetheory）加以说明。因为大多数抗体的巨大网格状聚集体，形成肉眼可见的沉淀物。但当抗原或抗体过量时，由于其结合价不能相互饱和，就只能形成较小的沉淀物或可溶性抗原抗体复合物。
在用沉淀反应对不同来源的进行比较后，发现抗体可按等价带范围分为两种类型，即R型抗体和H型抗体。R型抗体以家兔为代表，具有较宽的抗原抗体合适比例范围，只在抗原过量时，才易出现溶性，大多数动物的血均属此型。H型抗体以马免疫血清为代表，其抗原与抗体的合适比例范围较窄，抗原或抗体过量，均可形成可溶性免疫复合物。人和许多大动物的抗血清皆属H型。
5.3 可逆性抗原抗体反应遵循热反应原则，其反应式为：
[Ab-Ag]／[Ab].[Ag]=k1/k2=k
式中各反应项的单位以mol表示，k1表示反应速度，k2为逆反应速度常数，K是反应时的速度常数。由上式可知，是反映抗原抗体间力的指示，所以抗体亲和力通常以K值表示。
抗原抗体复合物解离取决于两方面的因素，一是抗体对相应抗原的亲和力；二是环境因素对复合物的影响。高亲和性抗体的抗原结合点与抗原表位的空间构型上非常适合，两者结合牢固，易解离。反之，低亲和性抗体与抗原形成的复合物较易解离。解离后的抗原结合牢固，不容易解离。反之，低亲和性抗体与抗原形成的复合物较易解离。解离后的抗原或抗体均能未结合前的结构、活性及特异性。在环境因素中，凡是减弱或消除抗原抗体亲和力的因素都会使逆向反应加快，复合物解离增加。如pH改变，过高或过低的均可破坏离子间电引力消失。对亲合力本身较弱的反应体系而言，仅增加离子强度即可解离抗原抗体复合物的目的；增加温度可增加分子间的热动能，加速已结合的复合物的解离，但由于温度变化易致蛋白，所以实际工作少应用。改变pH和离子强度是最常用的促解离，免疫技术中的亲和就是以此为根据纯化抗原或抗体。6 影响抗原抗体反应的因素6.1 电解质抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％或各种作为抗原及抗体的稀释液。由于氯化钠在水溶液中解离成+和C1－，可分别中和胶体粒子上的电荷，使胶体粒子的电势下降。当电势降至临界电势（12～15mV）以下时，则能促使抗原抗体复合物从溶液中析出，形成可见的沉淀物或凝集物。6.2 酸碱度抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH为6～8进行。PH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，例如pH达到或接近抗原的等电点时，即使无相应抗体存在，也会引起抗原非特异性的凝集，造成反应。
6.3 温度在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。但若温度高于56℃时，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏；在40℃时，结合速度慢，但结合牢固，更易于观察。常用的抗原抗体反应温度为37℃。每种试验都有其独特的最适反应温度，例如冷凝集素在4左右与结合最好，20℃以上反而解离。
此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。7 抗原抗体反应的类型根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别，抗原抗体反应表现为不同的形式。颗粒性抗原表现为凝集反应；可溶性抗原表现为沉淀反应；补体参与下抗原表现为溶菌反应，红细胞抗原表现为；毒素抗原表现为中和反应等。利用这些类型的抗原抗体反应建立了各种免疫学技术，在中广泛用于抗原和抗体的检测。为了提高反应的性和特异性，便发展了一些新的试验类型，如种种标记的抗原抗体反应等。这些类型各有其特点，将在以下各章中详细叙述。相关文献
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