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【求助】转膜时候电流过大，怎么回事啊？
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这个帖子发布于7年零326天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
用的是恒定电压，100v，结果一开始就是300多点毫安了，已经在冰块中冷转了，电流怎么还是怎么大啊？请赐教啊
不知道邀请谁？试试他们
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用的是恒定电压，100v，结果一开始就是300多点毫安了，已经在冰块中冷转了，电流怎么还是怎么大啊？请赐教啊这个算正常吧。。。
我们实验室的一般是
200mA 大概对应60V
250mA 大概80V的样子哈哈
在不同实验室做过
似乎差异还挺大的
最近换了个实验室
200mA基本上都是超过100V
不知道什么原因偷偷问下
转膜一般恒压还是恒流？又或者两者皆可？
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这个电流应该属于正常，去年冬天我做WB的时候是恒流转膜，250毫安，电压有时候要调到125伏，同样能出结果。今年天气变暖的时候横流250毫安的时候，电压就下降了，大概80伏。所以你的这个值应该属于正常波动范围之内。
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100mA 可以 4度 过夜
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用的是恒定电压，100v，结果一开始就是300多点毫安了，已经在冰块中冷转了，电流怎么还是怎么大啊？请赐教啊这个算正常吧。。。
我们实验室的一般是
200mA 大概对应60V
250mA 大概80V的样子哈哈
在不同实验室做过
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200mA基本上都是超过100V
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转膜一般恒压还是恒流？又或者两者皆可？
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转膜，应该是恒流和恒压都可以的。看个人的习惯吧。我开始用恒压，但机器修过一次后发现恒流比较好用，就改恒流了。
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我们实验室一直采用的是恒压，以前都还好，最近几次都是，一开始电流就大的很了，一到四百九跳闸了，时间可是还不到，不知道该怎么调整了、
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这个电流应该属于正常，去年冬天我做WB的时候是恒流转膜，250毫安，电压有时候要调到125伏，同样能出结果。今年天气变暖的时候横流250毫安的时候，电压就下降了，大概80伏。所以你的这个值应该属于正常波动范围之内。
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主要是一开始这么大的电流在转膜过程中会逐渐升高，一到四百就会停下了，如果时间还不到转膜时间，这膜不就不能转了吗？
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你们的TRIS 和甘氨酸换过了吗？估计是药品的问题。
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不是哦，这些都是最近才配的，而且转移缓冲液都是使用的一次性，据一个师兄说是压膜时候短路了，可是不知道究竟是该怎么改啊
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我觉得100mA转上一个小时就好了
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wansainan 我觉得100mA转上一个小时就好了你是说恒流转膜啊？可是恒压转膜怎么解决？
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我们实验室采取的是恒流转膜（半干转），每次都把胶裁剪的很大，以免上下层的滤纸接触短路。
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我们实验室采取的是恒流转膜（半干转），每次都把胶裁剪的很大，以免上下层的滤纸接触短路。
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ybf215 我们实验室采取的是恒流转膜（半干转），每次都把胶裁剪的很大，以免上下层的滤纸接触短路。是啊，怕滤纸接触短路，可是我已经让它们最小了，可是还能短路，是不是还有什么我没有注意到的？
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我的情况一样，100v 刚接上就400ma了，总是转不完就跳电。可是师姐同样的操作就没有问题，很奇怪，打算改恒流试试了，期待结果，据我了解湿转不会短路
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关于丁香园小木虫 --- 600万学术达人喜爱的学术科研平台
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关于蛋白印迹转膜的问题，高手请进来看图
做蛋白印迹western blot 的时候，转膜的时候出现如附图所示白色条带，有时候会出现有时候又不会，有谁知道为什么会造成这样的情况啊？该怎么样避免这种情况呢？
真正解决问题我给你们加金币！谢绝回水贴，谢谢！
是pvdf膜，为什么会干
用的是半干转移还是湿法？半干转移转时间长了或者电压过高可能造成膜干掉。
是湿转，转膜后拿出来就成了这样子，后面继续做的效果下图，感觉没有完全转过来，有点淡
QQ图片18.jpg
会不会是转膜的电压电流太高发热量太大了？你是放在4°C下转的吗？
拿出来还是冰冰的，可以排除转膜温度高的因素。
不清楚是怎么回事了。开始用甲醇浸润后应该是湿的，blotting buffer里有20%的甲醇，应该不会干的。
转膜的条件是什么，恒压还是横流
恒压转的，100V，1h
我是100v，1小时，这个转膜时间应该不算长的
嗯，这确实不长也不大，转膜一直都这样吗？试试同实验室其他人配的转膜液看看，或者用用别人的膜试试....
我一般是恒流&&250mA 蛋白大的话300ma&&45min就好了
关于关于蛋白印迹转膜的问题，高手请进来看图的相关话题在小木虫APP已经有241位虫友给出了详细回复。
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随时随地聊科研做Western&Blot实验时，发现转膜时的电流总是偏小，转膜的效率也偏低.&100V恒压转膜时的电流只有190mA
有可能重复使用了转移缓冲液，随着离子的逐渐减少，电阻越来越大，当然恒压时电流越来越小了。建议更换转移缓冲液。反复使用不要超过三次。环境温度低是有利于转移的
已投稿到：
以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。|/|/|/|/|/|
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【求助】转膜时电压往下降，电流上升，帮忙给分析分析原因！
我要转的蛋白超大，3000kD左右。想用100v 2h转膜。但是转移液发热太明显，放4的房间加磁珠搅拌也不管用。只见电压由100逐渐往下降，而电流却不停的彪升，超过400mA。不知对转膜电流和电压有没有上限啊，请高手指点一下。已经失败数次了。有人说可能我的转膜液有问题才会如此发热。每次都是新配的嘛。配方也是普通的：tris、glycine 加20%的甲醇。减少甲醇为15％也转不了。转膜液是否需要过滤或消毒处理吗？3000kD??是啊，kDa,有几个ｉｓｏｆｏｒｍｓ，降解条带也有２７００ｋＤ。你的目的蛋白分子量很大, 建议你 4度下, 20-30V 过夜转膜.转膜缓冲液中不要加20%的甲醇, 大分子转膜时甲醇会降低转膜效率.再一个转膜缓冲液需预冷. 希望能有所帮助
您的位置： &&关注今日：108 | 主题：501422
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求助大神们一些WB转膜电流条件的问题。
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最近做WB转膜时遇到了奇怪的事情。。。以前转膜条件一直是恒流330mA，1h，妥妥的一点问题都没有。当然这个电流也是任何大小的蛋白都能转上去。但是最近我设置转膜条件的时候每次一启动，电流就会从A自动跳到V，330mA根本上不去，只能被动恒压300V，然后电流从140多开始缓慢上升。。。上周我没仔细看，结果1h后marker都上去了，但是曝光出来后啥条带都没有，这次我选择250mA，2h（我的目标蛋白都不大，40KD以下），结果坚持了4分钟后又跳到恒压，电流又只能慢慢上升。。。。。我都不知道哪里有问题啊。。。。。。。。求指导指导。。。。转膜液是直接买的10X电转液，和甲醇还有水配比1：2：7.。。。。。。。做了若干年WB，第一次出现这种问题。。以前没有遇到过呢。。。。。
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我也是啊，之前一直转得好好的，不知道从什么时候起就没有条带了，抗体肯定没问题的
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Suggest you try to transfer 2h under the constant voltage of 100V
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We normally transfer at 30V or 250mA overnight in cold room, or 400
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Suggest you try to transfer 2h under the constant voltage of 100V 那100V下1h可以么？小分子。谢谢。
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是不是转膜液倒得太多了，电流带不起来？
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楼主有没有解决呢 我最近也是转膜老出问题 50kd以下的都转不上去
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我们是50kD一下的蛋白，一般100V
就可以将所有蛋白转上去了
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