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【求助】pMD19-T载体的测序引物是通用引物吧
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这个帖子发布于11年零194天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
pMD19-T载体的测序引物应该是和pMD18-T载体一样的吧,谁能帮我确定一下.,多谢了
不知道邀请谁？试试他们
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pMD18-T Vector、pMD19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning) 的专用载体。这两种载体分别由pUC18、pUC19载体改建而成，在pUC18、pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点，用EcoR V进行酶切反应后，再在两侧的3'端添加&T& 而成。由于这两种载体是分别以pUC18、pUC19载体为基础构建而成，所以它具有同pUC18、pUC19载体相同的功能。也就是说pMD19-T载体的测序的通用引物pMD18-T Vector、PUC18、pUC19是一样的，都是M13下面是pMD18-T Vector、pMD19-T Vector的说明书
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& 菌物PCR一定要用通用引物吗？
查看: 2088|回复: 6
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本帖最后由 chawuciren 于
16:31 编辑
RT是毕设实验，做基因克隆，P出来的序列有8000多bp，一个做基因很牛的师兄说那么长的序列不可能连接成功，没有人做到过，我也不可能有那个运气。有人连过那么长的序列吗？
之前没做过分子实验，在这方面基本不懂，跟着一篇学位论文的思路来做，上面做菌物PCR的时候用的是通用引物M13R和M13F，我们实验室没有，不知道用DNA的引物代替可不可以呢？？
在实验室坐等各位大神回复
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木有人啊！！
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昨天用DNA引物做菌物PCR，结果没P出来。。。而且连maker也跑得一塌糊涂
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完全可以 30KB的都有人做出来
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我的一点经验：
设计CPCR（菌落PCR）引物，上游在载体上（质粒上），下游在基因上（目的片段上），大小在500bp左右，这样，CPCR结果中只要有目的条带，就一定是连接（重组）成功的！
希望对你有帮助！
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谢谢你的回复。菌物PCR还要再另外设计引物吗？我参考一篇硕士论文，她做菌物PCR的时候用的是通用引物M13R和M13F，而我自己做是用之前做DNA的PCR时的引物，后来没做出来，不知道是不是引物的问题才没P出来
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多做，才有经验，成长，获得！
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