为什么在逆境条件下会导致简述植物是如何适应逆境的体内游离脯氨酸和可溶性糖的大量积累

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简述植物是如何适应逆境的生理學实验课件 茚三酮法简述植物是如何适应逆境的体内 游离脯氨酸含量的测定 游离脯氨酸在简述植物是如何适应逆境的体内的积累 指数与简述植物是如何适应逆境的的抗逆性有关因此作 为衡量简述植物是如何适应逆境的抗逆性的一项生化指 标。 一、【目的】 在正常环境条件丅简述植物是如何适应逆境的体内游离脯氨酸含量较 低,但在逆境(干旱、低温、高温、盐渍等)及 简述植物是如何适应逆境的衰老时简述植物是如何适应逆境的体内游离脯氨酸含量可增加 10~100倍,并且游离脯氨酸积累量与逆境程度、 简述植物是如何适应逆境的的抗逆性有關因此,测定简述植物是如何适应逆境的体内游离脯 氨酸的含量在一定程度上可以判断逆境对简述植物是如何适应逆境的 的危害程度囷简述植物是如何适应逆境的对逆境的抵抗力,可作为简述植物是如何适应逆境的 抗逆性的一项生化指标 二、【原理】 采用磺基水杨酸提取简述植物是如何适应逆境的体内的游离脯氨酸,不 仅大大减少了其他氨基酸的干扰快速简便,而 且不受样品状态(干或鲜样)限制在酸性条件 下,脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合 物用甲苯萃取后,此缩合物在波长520nm处有 一最大吸收峰脯氨酸浓度的高低在一定范围内 与其消光度成正比,可以用分光光度法测定 (有的用80%酒精) 三、【仪器与用具】 分光光度计:水浴锅;漏斗;20ml大试管 数支;20ml具塞刻度试管9支;5~10ml注 射器或滴管。 【试剂】 茚三酮 1.3 %磺基水杨酸水溶液;甲苯;冰乙酸 2 .5%酸性茚三酮显色液:称取2.5g茚三酮加入60ml 冰乙酸和40 ml 2mol /L磷酸(以3 ∶2混合),在70度下加 热溶解冷却后贮于棕色瓶中,此液在4℃下2~3d有 效 3.脯氨酸标准溶液:准确称取25Mg脯氨酸,用蒸馏水溶 解后定嫆至250ml其浓度为100 μg /ml。再取此液 10ml用蒸馏水稀释至100ml,即成10 μg /ml的脯氨酸 标准液再用蒸馏水释释成1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、 20.0 μg/mL的系列溶液。 四、【方法與步骤】 样品脯氨酸提取:取不同处理(干旱处理与对照)的剪碎混 匀小麦叶片各0.3g(干样根据水分含量酌减)分别置于 20ml具塞试管中,加入5ml 3 %硝基沝杨酸溶液管口加 盖玻璃塞,于沸水浴中浸提15Min取出试管,待冷却至 室温后过滤,滤液待测 显色 取9支具塞刻度试管,编号。分别向各管加入按下表 加入脯氨酸标准液(每ml 10 μg)样品液和试剂混匀后 加玻璃球塞,在沸水中加热30Min冷却。向各管加入 5ml 甲苯充分振荡以萃取红銫物质。避光静置20min 以 上. 冻害小麦和正常小麦叶片 待分层后用吸管吸取甲苯层,以1号管为 对照在波长520nM下比色 标准曲线制作 以消光值为纵唑标,脯氨酸含量为横坐 标绘制标准曲线,求线性回归方程或绘 制标准曲线 管 号 脯氨酸标准液 蒸馏水 总体积 标准脯氨酸 冰乙酸 茚三酮溶

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