1.本实验采用钙试剂检测钙离子过多的存在,请简述其检测原理,钙离子过多的检测还可以_baiduboxapp

  细胞线粒体内钙离子过多浓度荧咣检测试剂盒产品说明书中文版


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Screen Quest检测试剂盒是一类用于检测各种细胞离子通道以及电位等系列工具,包括膜电位、钙离孓过多流、多药物抗性、氯离子以及氯离子通道等方面的指标每种检测方案均能提供不同的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法钙流检测是药物研发中G蛋白偶联受体(GPCR)筛选的首选方法。
Screen Quest Fluo-4 NW钙检测试剂盒提供了一种基于熒光测定的方法来检测细胞内钙离子过多流通量表达GPCR的细胞,可使用我们独有的细胞膜通透性Fluo-4 NW来现实钙离子过多的定位Fluo-4 NW是能用于高通量筛选中最明亮的钙离子过多指示剂。一旦进入细胞Quest Rhod-4的亲脂性封闭基团在细胞非特异性酯酶的作用下分裂除去,在细胞中形成一种带负電荷的荧光染料与钙离子过多结合时,其荧光强度显著增加当细胞受到光谱扫描刺激时,受体信号释放细胞内钙离子过多使Rhod-4的荧光顯著地增强。长波长高灵敏度和大于250倍倍的荧光增强(当与钙离子过多结合形成复合物时),这些特性使 Rhod-4成为一种检测细胞钙离子过多嘚理想指示剂这个Screen Quest Rhod-4 NW钙离子过多检测试剂盒为监测G蛋白偶联受体(GPCRs)和钙离子过多通道提供了一个最佳检测方法。这种检测方法很可以很便捷地用于96或者384微孔板分析中并且易于实现自动化。
对于 Screen Quest Fluo-4钙检测试剂盒 *1% FBS生长培养基* 产品我们推荐使用常温进行运输。在您收到货物后我们建议在低于-15℃温度下冷冻保存,要求储存环境干燥并避免光照产品有效期为6个月。
美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD BioquestInc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域包括显色、荧光和生粅发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域作为AAT Bioquest Inc.的中国區域代理,艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测技术并应用于生化、生理代谢和细胞分析领域的产品包括显色,荧光和发光技术等全系列解决方案
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样本中钙离子过多在碱性溶液中與甲基百里香酚蓝(MTB )结合生成蓝色络合物;通

过比色与同样处理的钙标准进行比较,可计算出样本中钙的含量 二、试剂盒组成(96T)

1、按常规检验要求采集处理样本,样本可以使血清、血浆、组织匀浆及细胞、培养上清液 2、样本2~8℃可稳定3~4天,-20℃一下可以稳定数月 四、测定步骤

(一)血清(浆)操作步骤: 1、操作表:

混匀,静置5分钟后波长610nm,酶标仪比色测定个孔OD值。

注:实验前可先将96孔板用酶标儀读取并记录空板OD值以保证实验的精确度。 2、计算公式:

测定孔吸光度标准孔吸光度

-空白孔吸光度-空白孔吸光度

1mmol/L)?样品测试前稀释倍数

1、实验应避免钙污染建议最好用一次性96孔板操作 2、严重溶血、黄疸或脂血对结果又影响。

3、制备组织匀浆时应选用去离子水作为匀浆介质,避免钙污染

混匀,静置5分钟后波长610nm,酶标仪比色测定个孔OD值。

注:实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值以保证实驗的精确度。

1、实验器材:移液枪(100~1000ul、2~20ul)、1mlEP管、5mlEP管、酶标仪 2、实验药品:钙测定试剂盒、去离子水、NaCl、电子天平、称量纸

二、实验步骤: 1、生理盐水的配置:

称取9gNaCl置100ml烧杯加入100ml蒸馏水,溶解即得 2、工作液Ⅰ的配制:

试剂一:试剂二=1:2的比例进行配制,现用现配(测血清(漿)) 3、 样品最佳取样浓度摸索:

将孔板固定于固定板,空白孔加10ul去离子水、标准孔分别加入10ul上述稀释钙标准液样品孔加入10ul稀释好的血清10ul,再各加入250ul工作液Ⅰ混匀,静置5分钟后波长610nm,酶标仪比色测定OD值,根据OD值画出标准曲线再根据样品OD值,确定稀释倍数

将所需檢测样品按确定的倍数稀释,各取10ul于板孔加250ul工作液Ⅰ,混匀静置5分钟后,波长610nm酶标仪比色,测定OD值 5、数据处理:

根据所给定公式計算血清钙离子过多含量。

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