温度稍高使温度对酶活性的影响下降,为什么能恢复

◆ 董红宇 甘肃省天水市第一中学 741000&&
  新人教版《生物》必修1教材中,有一个探究影响酶活性的条件的实验,其中之一是探究温度对酶活性的影响,最后用的鉴定试剂是碘液而不是斐林试剂。众所周知,斐林试剂是鉴定还原性糖的常用试剂,在此实验中为何不用?是无法鉴定还是有什么别的原因?这个问题在K12论坛上也是众说纷纭、各持己见。笔者为此进行了相关探究,实验如下:
  实验结果与预期不符,0℃下的试管中也出现了砖红色沉淀。
  分析原因:在水浴温度65℃时用斐林试剂检测,0℃和60℃的试管中都有砖红色沉淀。出现这种结果的原因,应该是用65℃水浴加热时,使原本处于受抑制状态的酶逐渐恢复了活性,导致预期不应该发生的反应出现了,对实验结果干扰很大。这就是我们常给学生讲的:因为斐林试剂在使用过程中要加热,0℃试管中的酶会逐渐恢复活性,所以此实验不能用斐林试剂鉴定。
  事实果真如此吗?
  笔者继续以下实验:
  其它条件不变,只将上述实验中加斐林试剂时65℃水浴变成沸水浴即可,结果只有60℃试管中有砖红色沉淀,结果和预想一致。
  分析原因:应该是沸水使淀粉酶立即失去活性所致,而前面实验中所用的65℃水浴恰好是&-淀粉酶活性最强的适宜温度,所以不同的水浴温度对实验结果影响很大。
  斐林试剂是新制的Cu(OH)2溶液,PH值呈较强的碱性,对酶活性是否也有影响呢?笔者继续做以下探究:将各试管中的物质按下表顺序依次加好
  结果分析:
  第一组是&-淀粉酶活性最强的条件,作为对照,砖红色最深。
  第二组中斐林试剂已让&-淀粉酶失活。
  第三组结果表明:将酶、斐林试剂、淀粉同时加入,酶没有立即失活,还可以水解部分淀粉(分别是附图中的试管1、2、3)。
  本实验证明:斐林试剂对酶活性的影响与斐林试剂和酶接触的先后顺序有很大关系。不放底物,直接与酶混合,酶会立即失活;若与底物和酶一起混合,酶还可水解部分淀粉;如果最后放斐林试剂,则不影响实验结果。
  由于&-淀粉酶溶液有一定的颜色,虽然实验现象也明显,但颜色与真实情况有一定差距。笔者又用无色的唾液淀粉酶做了以上实验,各试管中的颜色与预期最接近,而且在65℃水浴下唾液淀粉酶就已失去了活性,实验结果与预期相符(附图中的6、7号试管)。
  综上所述:在温度对酶活性影响实验中,可以用斐林试剂做鉴定,选择唾液淀粉酶做实验效果最好。但在实验过程中需注意以下两点:斐林试剂不能与酶直接接触,必须最后一步加;水浴加热必须为沸水,才能保证结果与预期相符,如果实验过程稍不严谨,就会影响实验结果。鉴于上述原因,此实验一般不选斐林试剂作为鉴定试剂。
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  第2课时 降低化学反应活化能的酶
  二 酶的特性
  1.举例说出酶的特性。
  2.说出酶促反应的原理。
  3.通过实验说明影响酶活性的因素,掌握控制变量的科学方法。
  一、酶的特性
  与一般催化剂相比,酶具有以下特性:
  1.高效性
  一般而言,酶催化反应的速率比非催化反应的速率高108~1020倍,比其他无机催化剂催化反应的速率高① 107~1013 倍。
  2.专一性
  每一种酶只能催化② 一种 或③ 一类 化合物的化学反应。二肽酶可以催化任何两个氨基酸组成的④ 二肽 的水解反应,但是不能催化多肽的水解。
  3.温和性
  由于大多数酶都是蛋白质,所以凡是能使蛋白质变性的因素,如强酸、强碱、高温、重金属盐、X射线、紫外线等,都能使酶的⑤ 空间结构 遭到破坏,导致酶完全失去活性而不可恢复。所以,酶一般要求⑥ 比较温和 的条件,比如常温、常压、接近中性的酸碱度等。
  二、影响酶促反应的因素
  1.温度与酶活性
  每种酶只能在⑦ 一定限度 的温度范围内起作用。酶表现最大活性时的温度叫作酶的⑧ 最适温度 。低于最适温度时,随着温度的降低,活性也下降,下降到一定程度时,酶的催化效率为⑨ 接近于零 ,但是此时酶的活性⑩ 仍保留 。温度恢复到最适时,酶的活性逐步增加直至  最大 。高于最适温度时,随着温度的上升,酶的活性迅速下降,升高到一定限度时会因为变性而  失去活性 。此时即使再恢复到最适温度,酶的活性  无法恢复 。
  2.pH与酶活性
  每种酶只能在一定限度的pH范围内起作用。酶表现最大活性时的pH叫作酶的  最适pH 。稍高或稍低于最适pH,酶的活性都会降低;偏离最适pH越远,酶活性就  越低 。过酸或过碱时酶本身会因为变性而  失去活性 ,即使再恢复到最适pH,酶的活性  也无法恢复 。
  3.底物浓度与酶促反应速率
  在底物(反应物)浓度较低时,反应速率随底物浓度的增加而  加快 。
  1.什么叫酶的专一性?
  2.温度对酶活性有何影响?
  3.pH对酶活性有何影响?
  4.利用淀粉作为反应底物进行探究温度对酶活性影响的实验中,能否利用菲林试剂来检测淀粉是否被水解了?为什么?
  知识点一:酶的专一性解读
  1.什么是酶的活性?为什么酶的专一性能体现酶的多样性?
  2.在适宜条件下,唾液淀粉酶能水解淀粉吗?能水解蔗糖吗?淀粉能被蔗糖水解酶水解吗?
  3.若用淀粉酶水解淀粉作为实验组,蔗糖水解酶水解淀粉作为对照组,请将下表中有关实验现象补充完整。
  项目 检验试剂 检验原理 现象 原因
  实验组 碘液 淀粉遇碘变蓝色
  对照组 碘液
  4.除用碘液检验淀粉的存在外,还可用什么试剂检验淀粉是否被水解了?各有什么现象出现?
  知识点二:温度、pH对酶活性影响的实验探究及与酶促反应速率有关的曲线
  1.若探究不同温度条件下淀粉酶对淀粉的水解效果,则实验中的自变量是什么?无关变量是什么?实验结果(因变量)可用底物分解速度或底物存留量作观察指标,但通常是将什么现象作为观察指标的?
  2.在探究温度对酶活性影响的实验中,应将淀粉酶与可溶性淀粉溶液作何处理?该实验是否适宜选用斐林试剂来检验淀粉的存在?为什么?
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单项选择题关于酶的抑制剂的叙述,正确的是A.使酶变性而降低酶活性B.均与酶共价键不可逆结合C.都与酶的活性中心结合D.凡能降低酶活性的物质均为酶的抑制剂E.除去抑制剂后,酶活性可恢复
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【分析】1、酶是活细胞产生的具有催化功能的有机物其中绝大多数酶是蛋白质少数酶是 RNA.酶的生理作用是催化酶具有高效性、专一性酶的作用条件较温和.2、分析题图:低温酶的活性很低但是酶并不失活酶活性不为0高温使酶的空间结构发生改变酶失活酶活性为0过酸和过碱都会使酶的空间结构发生改变酶失活酶活性为0.故图中乙曲线是温度对酶活性的影响丙曲线是PH值对酶活性的影响在一定范围内随着底物浓度上升反应速率上升达到一定程度后酶达到饱和反应速率不再随着底物浓度上升而上升如图甲.
【解答】解:A、低温酶的活性很低但是酶并不失活高温使酶的空间结构发生改变酶失活过酸和过碱都会使酶的空间结构发生改变酶失活从图中来看影响乙曲线的因素是温度影响丙曲线的因素是pH值A正确B、甲曲线表示底物浓度与反应速率关系A点与B点限制酶促反应速率的因素不同A点的限制因素是底物浓度与B点曲线到达饱和限制酶促反应速率的因素不再是底物浓度B正确C、根据试题分析乙曲线是温度对酶活性的影响D点是低温条件酶的活性很低但是酶的空间结构并不被破坏温度恢复酶的活性即恢复F点是高温条件高温使酶的空间结构发生改变即使温度恢复酶的空间结构也不能恢复C错误D、根据试题分析丙曲线是PH值对酶活性的影响G点对应的因素是PH过低酶的空间结构被破坏PH值升高酶的活性不能到达H点D正确.故选:C.
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