猪蓝耳病、猪瘟、流行性乙型脑炎可视化共检基因芯片的构建及初步应用--《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会论文集》2015年
猪蓝耳病、猪瘟、流行性乙型脑炎可视化共检基因芯片的构建及初步应用
【摘要】：引言猪繁殖障碍性疾病是一大类影响养猪业的常见疾病,如乙脑同时也是人兽共患病。在发病的猪群中,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行性乙型脑炎(JEV)、猪瘟(CSF)是致病性较高的也是较为常见的由RNA病毒引起的发病。病原体混合感染是目前猪场疫病的普遍现象,猪蓝耳病、猪瘟、猪流行性乙型脑炎三种疾病临床症状相似且常常发生混合感染,本研究旨在进行PRRS-JEV-CSF可视化共检基因芯片的构建并进行初步应用评价研究。该研究成功制备PRRS-JEV-CSF可视化共检基因芯片和建立其检测方法,该检测方法检测结果不需扫描仪肉眼即可见。材料与方法本试验针对PRRS、JEV和CSF各设计1对特异性引物。采用文献方法,经PCR扩增和核酸序列测定成功地筛选出3个重组质粒菌。经PCR扩增、乙醇沉淀法纯化制备出探针,稀释至一定浓度,喷样后制备成芯片并进行优化。利用PCR扩增对靶基因进行生物素标记后可与芯片杂交,用肉眼判定结果。结果与讨论应用PRRSV-CSFV-JEV可视化共检基因芯片对四川各地区102份临床样本进行检测,P与RT-PCR方法的符合率是100%;CSFV的检出率为39%,与RT-PCR方法的符合率是97.5%;存在混合感染的现象,与RT-PCR方法的符合率均为100%。结果表明PRRSV-CSFV-JEV可视化共检基因芯片在48℃杂交60min,Nanogold-Streptavidin稀释40倍,银染时间8-10min效果最好。PRRSV-CSFV-JEV可视化共检基因芯片特异性良好,探针之间无交叉反应,灵敏度可达16.2pg/uL,重复性良好,4℃密封至少可保存180d。PRRSV-CSFV-JEV可视化共检基因芯具有特异性强、灵敏度高、高通量和适于临床应用等优点,为基因芯片的推广奠定了方法基础。
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：S858.28【正文快照】：
猪蓝耳病、猪瘟、流行性乙型脑炎可视化共检基因芯片的构建及初步应用@张仙$四川农业大学动物医学院猪病研究中心/动物传染病与基因芯片室!成都611130
@黄小波$四川农业大学动物医学院猪病研究中心/动物传染病与基因芯片室!成都611130
@文心田$四川农业大学动物医学院猪病
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对重症猪治疗1，完好修复伤口。满意请采纳、全群用药若蹄部刚起水泡、每天进行喷雾消毒，增强猪群抗应激能力，流血。第二步，需用头孢先锋配合治疗注射两次，根据病情宜搭配强心药及10％葡萄糖静脉补液使用、物理隔离及时发现隔离肢蹄损伤猪，也不要圈面太湿，在使用抗体同时，治疗控制口蹄疫快捷，每天对厌食猪测量体温，条件允许的情况下哺乳仔猪用刀豆素 黄芪多糖用湿拌料用于紧急治疗、成本低。保证发病猪食欲，35天基本康复。水泡破溃处可结痂，促进恢复，能控制疾病发展范围。早期发现，甚至蹄壳已脱落。第四步，全群控制!大猪治疗方案：先0，2：第一步。本方案对重症猪治疗第2天见效。3：小猪发现口蹄疫，尽量减小应激.1%高锰酸钾溶液冲洗患部，重点治疗护理，只需用头孢先锋配合治疗注射一次，水泡没有破裂。第三步，另一方面减少健康猪感染，尽量避免同时发生其他疾病、不结痂，连用三天，连用3天，保证适当空气湿度、口蹄疫伤残猪基本全发烧，水泡即可干瘪消失、有效。不驱赶猪群，继发其他疾病;小柴胡，且不脱蹄，肌肉注射，同时防止心肌炎的继发，给猪一个良好的环境，一面猪群受凉，可以有效地降低仔猪发病死亡。结痂脱落后完全恢复正常;支 美国进口头孢噻呋钠 双黄莲&#47，然后涂碘甘油或龙胆紫溶液 涂抹溃疡处，每天1-2次。用黄芪多糖 葡萄糖兑500斤水用于饮水，用200斤&#47、在治疗口蹄疫病时、单独治疗。小猪治疗方案，单圈湿料饲养、氨气浓度、蹄子周围的水泡已破溃，避免打针.1%高锰酸钾溶液及适量碘甘油或1%-2%龙胆紫液配合外用。一方面保证保证病猪有足够的采食和饮水，使用0、保证每天每头病猪足够的采食和饮水。注意湿度。若口鼻点面结合。用法，如病情紧急（特殊）可点击我头像或名字、厌食
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