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毕业设计与论文（PCR方法在ApoE基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用）
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补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化
摘　要：目的对补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系及扩增程序进行优化,检测PCR优化体系的适用性和灵敏性。方法通过改进引物设计、改变PCR反应过程中Mg2＋浓度、引物浓度、退火温度、模板DNA浓度及反应循环次数,分析比较PCR扩增效果。结果优化后的补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系中,Mg2＋浓度在2-4mmol/L,引物浓度在0.025-0.4μmol/L,循环次数在30-45次之间均能扩增得到清晰均一的特异性条带;同时,引物退火温度在55.5℃-69.6℃范围内均适用;优化后PCR体系能够检测的最低DNA浓度为1.41ng/μl,即模板DNA在反应体系中的总量为约2.82ng.结论已经建立的优化后的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。
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你这个,有几个样品没有P出来,需要重新做,你可以调整一下PCR的反应体系,反应条件,改善一下模板质量,看能不能P出来.P出来的这些结果很明显的啊,两条带的是杂合体,一条带的是纯合体,看你引物设计时候的情况是怎么样的了,一般情况下,只有一条小的条带的是敲除的纯合体,只有一条大的条带的就是野生型的了.纯合体可以留下来保种或者拿去做实验,杂合体看情况,有需要的话就留着.}