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【求助】电泳制胶过程中的气泡问题
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这个帖子发布于8年零283天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近做胶时老有气泡,不知道该怎么办,尤其是分离胶气泡太多,浓缩胶老是凝不好,下面连通着,更本没法用.各位大侠,能帮小弟支个招吗?
不知道邀请谁？试试他们
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做胶的时候加完各种成分使用枪混匀的时候尽量不要反复狂吹吸，这样很容易产生气泡，可以将枪调小一点轻吹吸，或者仅用枪搅匀了，然后灌胶，灌胶后立马加入正丁醇压平，这时可以轻轻震动胶板，赶走气泡，每次都是这样做的，很好用另外：加完TEMED后胶很快就凝了，所以在加入TEMED之前先调好一把1mL的枪备用，以备加完TEMED后立马混匀灌胶。
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yiyidede 做胶的时候加完各种成分使用枪混匀的时候尽量不要反复狂吹吸，这样很容易产生气泡，可以将枪调小一点轻吹吸，或者仅用枪搅匀了，然后灌胶，灌胶后立马加入正丁醇压平，这时可以轻轻震动胶板，赶走气泡，每次都是这样做的，很好用另外：加完TEMED后胶很快就凝了，所以在加入TEMED之前先调好一把1mL的枪备用，以备加完TEMED后立马混匀灌胶。加完TEMED后胶很快就凝了，所以在加入TEMED之前先调好一把1mL的枪备用，以备加完TEMED后立马混匀灌胶。？？？？ 加完没有那么快凝的吧？ 即使配好在烧杯里，我放个5-6分钟都么的事:D 其实稍稍把烧杯晃一晃就行了，不用剧烈混匀的。
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谢谢各位大侠的指点和帮助！情况好多了！
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A. 把TEMED稀释10倍，这样就可以用100微的枪加了（容易混匀），灌胶后用双蒸水压胶可以很快的赶走气泡。B. 过硫酸铵极易吸水潮解，分解的过硫酸铵诱导丙烯酰胺凝聚的能力变差，因此配置后的原瓶要盖紧，必要时用parafilm封口，配好的10%过硫酸铵置于4℃保存，时间为2周。也可置于-20℃保存，时间可长达半年。C. 丙烯酰胺和双丙烯酰胺具有神经毒性，可经过皮肤吸收并具有累积性，操作需要带手套，称取粉末状丙烯酰胺和双丙烯酰胺必须戴口罩，以妨吸入。此外，丙烯酰胺溶液易在光照下脱氨基，变为丙烯酸和双丙烯酸，因而要置于棕色瓶中4℃保存。保存时间一般为2个月。D. 天冷了，有的时候室温太低，低下的胶就会凝的不好，影响底下的带的效果。你可以打开空调，或者把胶放暖气上或者用白炽灯烤烤。
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谢谢大家的帮助，但是问题没有解决，尤其是浓缩胶老是凝不好，下面老连着没法用啊！我想问一下，分离胶灌胶的时候灌到什么位置合适，我用的5ml的胶，厚度0.75mm,凝不好是不和这个也有关系？
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插入梳子后,梳子下端离分离胶大概有6,7个mm左右.我一般是用1.5mm的厚胶
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奥，谢谢了，我试试看！
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我做分离胶从来不担心气泡,用水压,气泡自然跑掉.
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我说的是小气泡,就是针眼大的小点,难道你做的胶就一点小泡都没有?还是做胶时抽气了?
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基本没有小泡,反正从来没影响过跑胶.
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对于一般的跑胶是没影响的,但是要跑开分子量相差很小的蛋白,则对胶的要求比较严格了.
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关于丁香园君，已阅读到文档的结尾了呢~~
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