小麦基因组DNA提取-技术前沿-新闻中心-国家标准物质网
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小麦基因组DNA提取
【关键词】
【内容摘要】小心吸取离心上清液至1．5mL离心管中，加入0．65倍体积4~C预冷的异丙醇，混匀，4~C下12000r／min离心10min，小心弃掉上清液。加500／~L 4~C预冷的70％乙醇洗涤一次，4~C下12000r／min离心5min，弃上清液，重复洗涤一次，室温或真空干燥沉淀。加入50肛L TE缓冲液，4"C过夜或37~C保温1h溶解沉淀，4~C保存备用。每个实验样品应制备两个测试样品和提取空白对照，同时提取DNA。
第一法：CTAB法。称取0．2g粉碎后的小麦试样于2．0ml。离心管中，加入lmL CTAB裂解液，混匀，在65~C水浴温育30min，不时振荡．12000r／min离心5rain。小心取离心上清液至新的2．0mI一离心管中，加入等体积三氯甲烷一异戊醇，混匀后放置5min，重复离心5min。取离心上清液至另一新的2．0mL离心管中，再加入等体积三氯甲烷一异戊醇，混匀后放5min,12000r／min再重复离心5min。。
小心吸取离心上清液至1．5mL离心管中，加入0．65倍体积4~C预冷的异丙醇，混匀，4~C下12000r／min离心10min，小心弃掉上清液。加500／~L 4~C预冷的70％乙醇洗涤一次，4~C下12000r／min离心5min，弃上清液，重复洗涤一次，室温或真空干燥沉淀。加入50肛L TE缓冲液，4"C过夜或37~C保温1h溶解沉淀，4~C保存备用。每个实验样品应制备两个测试样品和提取空白对照，同时提取DNA。
第二法：试剂盒法。小麦总DNA的提取也可使用相应的市售DNA提取试剂盒。
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【来源/作者】国家标准物质网；【更新日期】 9:31:01
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高等植物DNA的提取试验中小麦为什么要擦干水分
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