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历史上的今天
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blogTitle:'基因组DNA及RNA的提取',
blogAbstract:'第一部分:基因组DNA 的提取及常见的问题第二部分: RNA的提取及常见的问题基因组DNA的用途DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象.为了进行测序,杂交和基因的表达,获得高分子量和高纯度的基因组DNA是非常重要的前提.基因组DNA提取的原则保证提取的DNA具有一定的长度纯化后不应存在对酶有抑制作用的物质排除有机溶剂和金属离子的污染蛋白质,多糖,脂类等降低到最低程度排除其他核酸分子的污染基因组DNA- CTAB法CTAB法原理(植物DNA提取经典方法)CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的溶液中(&0.7mol/L',
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DNA和RNA提取方法及原理|如​题
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【求助】CTAB 法配制RNA 提取缓冲液，为什么成粘稠状？
【求助】CTAB 法配制RNA 提取缓冲液，为什么成粘稠状？
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这个帖子发布于5年零35天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
CTAB 法配制RNA 提取缓冲液，为什么成粘稠状？RNA 提取缓冲液：CTAB 2%（w/v），聚乙烯吡咯烷酮（PVP）2%（w/v），Tris-HCl 100 mmol/L，EDTA 25 mmol/L这是我们实验室的成熟方法，以前都没问题换到别的实验室后换了好几个公司的产品都不行了生工的，鼎国的。都是进口分装的啊初步肯定是CTAB问题，难道国内的都这么差为什么啊求站友帮帮忙！
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是不是天气冷了？？
一般不是要加热到65度后使用吗？
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没有啊以前没这个问题难道非得进口的才行啊
回复：【求助】CTAB 法配制RNA 提取缓冲液，为什么成粘稠状？
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材料换了没有？如果材料变了 就不好说了
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[编号:1325986]DNA、RNA、蛋白质的提取方法
资料年份：2010
资料版本：
资料类别：素材
资料类型：
文件大小：50 KB
所属地区：全国
审核站长：
上传用户：
下载等级：所有用户
更新时间： 12:38:00
需要储值： 元
下载次数： 次
需要点数： 普通点
下载提示： (点数不够可以先收藏下来)
DNA、RNA、蛋白质的提取方法
植物ＤＮＡ的ＣＴＡＢ提取法：
1 称取新鲜叶片2-3ｇ,剪碎放入研钵中,在液氮中研磨成粉末。2 将粉末转移到的加有7ｍｌ经预热的1 5×ＣＴＡＢ提取缓冲液15ｍｌ离心管中,迅速混匀后置于65℃水浴中,温育30ｍｉｎ。3 取出离心管,冷却至室温,加入氯仿/异戊醇(24:1),充分混匀,室温下2300×ｇ离心20ｍｉｎ。4 将上清转移至另一新的15ｍｌ离心管中,加入1/10体积10%的ＣＴＡＢ和等体积的氯仿/异戊醇。充分混匀,2300×ｇ离心20ｍｉｎ。5 转移上清至另一新的15ｍｌ离心管中,加入等体积1%的ＣＴＡＢ沉淀缓冲液,轻轻摇晃至形成ＤＮＡ絮状沉淀。1000×ｇ离心10ｍｉｎ,使ＤＮＡ沉淀于管底。6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ及5μｌＲＮａｓｅ置于56℃水浴中过夜。待ＤＮＡ完全溶解后,加2-3ｍｌ4℃预冷的95%的冰乙醇使ＤＮＡ沉淀,挑出ＤＮＡ,置于1 5ｍｌ离心管中,用70%乙醇清洗30ｍｉｎ,用离心机甩5ｓ,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ,倒出95%乙醇,在超净工作台上吹干。7 将风干的ＤＮＡ直接在4℃保存备用或溶于100μｌＴＥ溶液中于-20℃保存。
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