如何快速溶解ctab法提取dna buffer

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CTAB法提取真菌DNA,为什么跑电泳的条带是这样 首先你要搞明白为什么要电泳,电泳的目的是什么.我不知道你有没有亲自做过电泳,首先希望你先查询下如何DNA电泳.在DNA电泳前, 在需要电泳的DNA溶液里加上loading buffer,目的是在电泳时可以看到指示...
CTAB法提取真菌DNA,为什么跑电泳的条带是这样
首先希望你先查询下如何DNA电泳.在DNA电泳前,在需要电泳的DNA溶液里加上loading buffer,这个时候看到的DNA条带其实是淡蓝色的,不是白色的,目的是在电泳时可以看到指示带,有两条:跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.2.在制备琼脂糖胶时,需要加入EB,EB可以与DNA结合,在紫外灯下显示DNA位置,也就是你说的白色条带.现在有些实验室用一些新型染料(EB有毒),可以用蓝光而不是紫外观察条带.3CTAB法提取真菌DNA,电泳的目的是什么.我不知道你有没有亲自做过电泳,为什么跑电泳的条带是这样首先你要搞明白为什么要电泳CTAB法提取真菌DNA,为什么跑电泳的条带是这样CTAB法提取真菌DNA,为什么跑电泳的条带是这样首先你要搞明白为什么要电泳,电泳的目的是什么.我不知道你有没有亲自做过电泳,首先希望你先查询下如何DNA电泳.在DNA电泳前
CTAB法提取真菌DNA,为什么跑电泳的条带是这样 首先你要搞明白为什么要电泳,电泳的目的是什么.我不知道你有没有亲自做过电泳,首先希望你先查询下如何DNA电泳.在DNA电泳前, 在需要电泳的DNA溶液里加上loading buffer,目的是在电泳时可以看到指示...(1)尽可能采用新鲜无损伤的幼叶,在与提取缓冲液接触前,应防止冰冻的样品在空气中融化,否则酚类易被氧化。同时采用液氮研磨,尽可能磨细、磨匀,且时间不能太长。(2)在加裂解液前,先加入冷冻的提取缓冲液(内含3%的 PVP 及 2%β-巯基乙醇...只出现了引物二聚体,确实有可能是因为退火温度的问题。有可能是退火温度较高而实验时没有达到的缘故。
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10%CTAB 溶液配制怎么配啊?
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具体形成条件和很多因素有关,比如序列,化学修饰,还有溶液组成等等.B-DNA是最常见的基本构象,是经典结构,也是当年Watson和Crick解出的模型.A-DNA主要
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称取CTAB 10.00 g,溶解于80 mL的双蒸水,加热促进溶解,加双蒸水定容到100 mL,室温保存。
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Procedure& 1. Grind 2 to 5 g of frozen leaves to a very fine powder with a liquid nitrogen-cooled mortar and pestle. 2. Add 25 ml of CTAB Buffer and transfer to a 50 ml tube. 3. Incubate at 65°C for 20 min with occasional vigorous shaking. 4. Add 10 ml of Chloroform, shake well, and place on a tube inverter at room temperature for 20 min. 5. Centrifuge at 1,000 X g for 5 min to resolve phases. 6. Transfer the aqueous phase to a fresh tube, add 17 ml of Isopropanol, mix, and place on ice for 10 min. 7. Centrifuge at 1,000 X g for 5 min to collect the precipitate. 8. Discard the supernatant and dry the inside of the tube with a paper towel (do not dry the pellet). 9. Add 4 ml of TE Buffer and dissolve the precipitate by gentle inversion. 10. Add 4 ml of 4 M Lithium Acetate and incubate on ice for 20 min. 11. Centrifuge at 1,000 X g for 10 min. 12. Transfer the supernatant to a fresh tube, add 16 ml of 100% Ethanol, and incubate on ice for 20 min. 13. Centrifuge at 1,000 X g for 5 min to collect the precipitate. 14. Discard the supernatant and dry the inside of the tube with a paper towel (do not dry the pellet). 15. Dissolve DNA in 900 μl of TE Buffer by gentle pipetting. 16. Add 100 μl of 3 M Sodium Acetate. Divide the sample evenly into two microcentrifuge tubes. 17. Add an equal volume of Phenol to each tube, mix well, centrifuge to separate the phases (1,000 X g), and save the aqueous phase (upper phase). 18. Add an equal volume of Phenol:Chloroform to each tube, mix well, centrifuge to separate the phases (1,000 X g), and save the aqueous phase (upper phase). 19. Add an equal volume of Chloroform to each tube, mix well, centrifuge to separate the phases (1,000 X g), and save the aqueous phase (upper phase). 20. Add 2 volumes of 100% Ethanol to each tube and incubate on ice for 5 min. 21. Centrifuge 5 min to collect the precipitate (approximately 5,000 X g). 22. Discard the supernatant. 23. Centrifuge for 5 additional min and remove as much of the remaining liquid as possible with a pipette. Do not dry the pellet. 23. Add 100 to 250 μl TE Buffer. Dissolve the pellet by gentle pipetting. & Solutions
Phenol:Chloroform
1:1 Phenol:Chloroform
4 M Lithium Acetate
3 M Sodium Acetate
1 mM EDTA, pH 8.0 10 mM Tris
CTAB Buffer
800 mM NaCl 1% (v/v) Sarkosyl 140 mM Sorbitol Autoclave 22 mM EDTA 220 mM Tris, pH 8.0 0.8% (v/v) CTAB
& BioReagents and Chemicals Cetyltrimethylammonium Bromide Sarkosyl Chloroform Phenol Sodium Acetate Ethanol Sodium Chloride EDTA Sorbitol Isopropanol Tris Lithium Acetate
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&&【求助】如何除去CTAB
【求助】如何除去CTAB
各位虫友们,我有一难题,合成介孔材料用CTAB做为模板剂,除了煅烧的方法外,还有什么其他的方法出去CTAB,我看有的文献用丙酮回流,它的原理是什么,还有什么更好的方法除去CTAB
但是百度里说CTAB微溶于丙酮呀
原理是什么,需要多长时间
这个真的有效吗
不危险啊。要不你用丙酮吧,效果挺好的,而且不会破坏孔道结构,就是耗时间
只用无水乙醇吗?不加酸什么的?能说的具体点吗?
也有人用乙醇和盐酸混合液的,哪个效果更好呢?
48小时不间断的回流吗?能说说具体的操作吗?实验室条件不允许48小时不间断回流呀,温度得控制在什么温度
用在酸性条件吗?
嗯,谢谢你,我里面做了磁性的介孔SiO2,不知道方法一样不,我这几天正为除CTAB发愁呢,不知道怎么做能很好的将CTAB除去,能将你这种方法的文献给我看看嘛?你能不能帮我参考一下:我做的磁性介孔SiO2除去CTAB能否采用您刚刚跟我说的方法
磁性的介孔氧化硅不看这篇文献怎么行啊??
Superparamagnetic High-Magnetization Microspheres with an Fe3O4@SiO2
Core and Perpendicularly Aligned Mesoporous SiO2 Shell for Removal of
Microcystins
J. AM. CHEM. SOC. , 28-29
Finally, the purified microspheres were redispersed in 60
mL of acetone and refluxed at 80°C for 48 h to remove the template CTAB. The
extraction was repeated for three times, and the microspheres were washed with
deioned water, and Fe3O4@nSiO2@mSiO2 microspheres were finally produced. The
successful removal of CTAB was verified by Fourier transform infrared (FT-IR)
spectra analysis
我看这篇文献了,但是我想说的是48h太长,回流是中间可不可以停,而且80度丙酮一会就蒸干了
不会蒸干,我刚刚试过了,在回流中一点儿也没少,
你是连续的回流了48h小时吗?中间有没有停过?
我们是连续冷凝回流的,丙酮挥发的很少。
其实你也可以早上去了就开始回流,下午停了,离心后每天继续回流,连续几天的应该也可以的。
是的,用圆形冷凝管,回流48小时,不间断
做了小角度的XRD和TEM没有?能不能看见小孔吗?孔径怎么样?
还没有,还在第二次回流中,用丙酮最少要回流两次
用这些物质回流有具体的方法吗
我也正进行第二次回流的了,两次够吗?
有没有具体的方法!或者文献的操作也可以,有的话能否给我发在这个邮箱里
我也不知道,我看到文献上都是回流三次的,我先用两次看看。这个实验太耗时间了
是这个实验太耗时间了,很烦人的,我这几天一直在找一种能耗时少的方法,但是找不到,我还看到一些文献用醇的酸溶液回流,不知道效果好不好
我也一直在找,还在调研中
有好的方法告诉我一声!谢谢!
同问:D:D:D
能不能再具体点!
这个有具体的文献吗,我想看看
y有文献吗?给我发一下吗?
你加CTAB是用热水了没有?水加热了没有?
在常温下包的CTAB,在80度下回流
我怎么感觉我做的也有絮状的沉淀,就是洗的时候也是絮状的,你做的时候有这样的现象没有?
你做的是什么,应该我和的不一样吧
你做的不是磁性纳米粒子外面形成介孔的壳层吗?
我的是发光 材料外包覆多孔SiO2
哦,我做了小角度的XRD,可惜没有做成功,不知道哪出问题了,你做的时候是直接将CTAB加入到你分散好的溶液中去的,还是将CTAB溶于水以后再加入到你的分散好的溶液中去呢?
溶在酒精里加进去 的
加完以后也没有加热吗?能说说你的具体过程吗?加入CTAB前后,谢谢!
有具体的文献给我看看可以吗?效果好吗?
一个不喜欢丙酮的人就是这么做的.
显然不如丙酮效果好
不过比清水好些
你的方法就是& &溶解了之后离心?还要回流吗?& &
能脱的彻底吗
我没有完全按照文献所做,效果不好!
那现在有没有什么好多办法了?
没有,你试一下用硝酸铵的乙醇溶液
哥们,你看的用丙酮回流的是哪篇文献啊?能给传一份吗, , 或者告诉我也行,谢了啊!
可否把去除CTAB的文章全文发我一份,J. Mater. Chem., 67 我的邮箱是
可否把去除CTAB的文章全文发我一份,J. Mater. Chem., 67 我的邮箱是
不好意思,我毕业了,文献我好久没弄了,我给你找找吧
48小时之后再离心吗?
请问回流之后再离心吗?:rol:
CTAB到底是配位还是正负电荷作用的分散剂哈?小白求问,我在考虑CTAB修饰的金种是否可以通过配位修饰到APTES修饰的其他纳米粒子表面:rol:
哈哈师兄!!!
可不可以将那篇文献也发我一份,或者把文献的题目发我一下,谢谢了!
实在不好意思,我毕业了很多资料都没了,是赵东元老师的文章,复旦大学
求给我留文献
我做的时候也出现了这种现象,想问一下最后怎么解决的呀?
同学,我也遇到这样的情况,请问你解决了吗
有一位楼主说文献中CTAB浓度写错了,应该是0.1g, 说可以做出来。其实我试过貌似包不上,不知道是哪里出了问题。我加你关注,比较方便交流。
你好,:)我想问下你是用什么方法出去CTAB的呀?
请问回流结束后一定要离心吗?可不可以抽滤啊?
我的也是诶,但还是选择用的80度,过会就好点了,不过回流后可以抽滤吗?感觉离心好艰难。
为啥加温呢?加温以后为啥更容易洗掉啊?谢谢
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&&十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)都溶于什么有机溶剂?
十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)都溶于什么有机溶剂?
请教一下,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)除了溶于氯仿,还溶于什么有机溶剂啊?
最好是和水不相溶的、没害的,因为后面要进行水相和有机相分离?,谢谢
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