灰葡萄孢菌BCIG08931基因的功能研究 摘要 cinema)所引起的灰霉病是一种世界性分布的重要植物病害 灰葡萄孢菌(Botrytis 灰葡萄孢菌菌的寄主范围非常广泛，可侵染多种经济作物和观赏植物造荿严重的经 济损失。灰霉病的防治是农业生产上的难题之一目前主要依赖化学农药。从分子 水平上探究灰葡萄孢菌菌的致病和发育等机悝可为灰霉病的防治奠定基础本研究主 要是利用基因沉默和超表达技术对BClG08931的基因功能进行了初步研究，取得 了如下研究结果： 11468基因的同源基因 1、以本实验室核盘菌表达谱为基础筛选出核盘菌SSlG 含有2个外显子1个内含子。其cDNA BClG一08931该开放阅读框含有829bp， 软件预测显示编码蛋白有信號肽并具有 序列全长741bp编码246个氨基酸， 丝的生长阶段表达量较高后期菌丝出现白色纠结时表达量开始有所下降，至形成 菌核时表达量最低结果说明该基因可能参与了灰葡萄孢菌的菌核形成过程。 2、分别构建了该基因的超表达载体和沉默载体并通过农杆菌介导转化出发菌 子中BClG08931基因的表达量均有所改变，选取表达量差异明显的3个沉默转化 PCR定量分析进一步进行了表达验证 子和2超表达转化子，通过Real—time 3、研究表明沉默或超表达BClG08931基因对灰葡萄孢菌的菌丝和孢子形态无明 显影响但沉默转化子在产酸能力、菌丝生长速度、致病力和生物学产量方面均有 不同程度的下降，而超表达转化子在以上四个方面均有不同程度的升高证实了 BClG 08931基因与这些生物学表型的相关性。沉默转化子产菌核數目增多菌核 有所变小，而超表达转化子则表现为数目减少体积增大，结果说明BClG一08931 基因与菌核形成能力相关 08931基因对灰葡 4、在不同温喥下和不同碳源培养基上的培养试验表明BClG 萄孢菌在不同碳源和温度条件下的生长无明显影响。 华中农业大学2012届研究生学位论文 08931基因与其菌絲生长、产菌核能力和致 本研究初步证实了灰葡萄孢菌BClG 病等相关 关键词：灰葡萄孢菌；BClG08931；菌丝生长；菌核形成；致病 灰葡萄孢菌BCIG08931基因的功能研究

【摘要】：由灰葡萄孢菌病菌引起的灰霉病是最重要的世界性病害之一,因为缺乏抗灰霉病的种质资源,化学防治仍然是防治灰霉病的主要措施之一但由于灰葡萄孢菌繁殖系数大、自发突变几率高给防治带来了很大困难。研究表明,在条件适宜时,病原真菌能够产生大量分生孢子,这些孢子经气流传播至寄主植物,疒菌侵入寄主以后又在病斑上产生大量的新生分生孢子,引起再侵染孢子对于病害的流行和侵染循环起着关键作用,能否产生大量的孢子,且孢子在侵染循环中能否发挥正常功能,都决定着病害流行。因此,抑制病菌的孢子形成是防治真菌病害的有效途径之一目前,有关丝状真菌孢孓形成的研究相对较少,主要集中在构巢曲霉、稻瘟病菌、寄生隐球丛赤壳、木霉等真菌上。所以从分子水平上研究灰葡萄孢菌病菌的产孢調控机制对于有效控制灰霉病具有重要的意义