error[.NH-CMFD-],文章不存在.TRPV4介导的小鼠气管平滑肌舒张机制研究
目的阐明花生四烯酸细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶代谢产物14,15-环氧化二十碳三烯酸(14,15-epoxyeicosatrienoic acid,14,15-EET)对小鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其机制。本研究采用离体气管环张力实验和免疫共沉淀法检测14,15-EET对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的影响以及TRPV4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)通道蛋白与小电导钙激活钾通道(small conductance Ca2+-activated K+channels,SKCa)蛋白在小鼠气管平滑肌组织中的相互作用。方法1.离体气管环制备雄性小鼠,昆明种,体重在20~25g,清洁级,6周龄。经CO2窒息法处死后,迅速取出喉部以下主支气管,放入通有混合气体(95%O2和5%CO2)的Krebs-Henseleit缓冲液中,维持p H在&
(本文共60页)
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金水六君煎由当归、熟地、法半夏、获警、陈皮。炙甘草等组成，是（景岳全书》中用于治疗“肺肾虚寒，水犯为痰，或年迈阴虚，气血不足，外受风寒，咳嗽，喘息多痰……”的古方肝」，现有临床报道用金水六君效治疗慢性支气管炎取得了较好的效果［‘－‘］，实验研究的结果亦逐步揭示了其治疗慢性支气管炎的机制［’－10］。但对慢性支气管炎动物膜型有无作用尚未见报导。本文报道用烟雾熏小鼠，造成慢性支气管炎小鼠模型，并用金水六君煎为造型小鼠灌胃，在扫描电子显微镜下观察，对比正常小鼠、慢性支气管炎模型小鼠及模型小鼠在使用金水六君煎后气管内粘膜及纤毛形态变化的情况，从而探讨金水六君煎对慢性支气管炎的防治作用。】材料方法1．1材料1．1．1药物金水六君煎（口服液）（l，sg生药／ml，由广东佛山制药二厂协助制成。l，1．2动物65只NIH小鼠及标准饲料均由广东省医学实验动物中心提供，合格证书号为：97A017。1．1．3仪器JEOL．JSM－T300扫描电子显微...&
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目前全球哮喘患者已超过3亿人,哮喘的主要症状为气道阻塞、气道高反应和气道重塑,而气管平滑肌细胞过度收缩是形成气道高反应和气道阻塞的重要因素.气管平滑肌细胞的过度收缩使气道管腔缩小从而限制了气体交换,引起呼吸困难,甚至威胁患者的生命[1,2].目前用于治疗哮喘的药物主要为支气管扩张类药物,如β2肾上腺素能激动剂[3].青蒿(Artemisia Annua L.),为菊科植物黄花蒿的地上部分.青蒿化学成份以青蒿素及其衍生物为主[4].目前,对于青蒿提取物的药用价值研究大部分集中在青蒿素的提取及应用上[5-7].而青蒿其他提取物是否也具有一定的药用价值并不清楚.基于此,提取青蒿水提取物,研究其对小鼠气管的舒张作用,以期获得用于扩张气管、治疗哮喘的药物.1实验材料1.1试剂和仪器青蒿(购于北京同仁堂药房),乙酰胆碱(ACh)、硝苯地平、尼氟酸、木瓜蛋白酶、胶原蛋白酶H、牛血清蛋白(BSA)、二硫苏糖醇(DTT)(美国Sigma).生理盐...&
(本文共6页)
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气道中存在数种不同类型的上皮细胞,包括纤毛柱状细胞、杯状细胞、浆细胞、C lara细胞、基底细胞、刷状细胞和神经内分泌细胞等。其中纤毛柱状细胞和杯状细胞是最主要的上皮细胞,它们在呼吸道内各自发挥独特的作用[1]。气道上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,它的正常的生理功能对维持机体的健康起着关键作用。气道上皮细胞在哮喘、COPD、肺癌、肺囊性纤维化以及一些新发现的传染病(SARS、禽流感)的发病机制中起着重要的作用[2]。我们利用气液相界面培养、无血清条件培养基将小鼠的气道上皮细胞诱导分化成带有纤毛和黏液分泌功能的上皮细胞,从功能和结构上,使其更贴近体内气管上皮细胞的自然生长状态,为研究气管上皮的功能奠定良好的基础。1材料与方法1.1材料1.1.1主要材料DMEM/F12培养基购自美国G ibco公司,胎牛血清购自杭州四季青公司,牛血清白蛋白购自北京鼎国公司,霍乱毒素、氢化考的松、表皮生长因子、牛的垂体提取物、转铁蛋白、视黄酸、...&
(本文共3页)
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在后基因组时代,小鼠成为现代医学试验中必不可少的常用动物之一。这是由于人类已对小鼠的基因特征有了深刻和全面的了解,转基因和基因敲除等技术的应用相对比较成熟[1];另一方面则是由于小鼠性发育成熟快(4~6周)、妊娠期短(21 d),制备转基因和基因敲除动物成本低、周转率快。小鼠是研究疾病发生机制和确定治疗方案、验证新型化合物与药标作用的有效性的较好工具,在现代医学研究中占据日益重要的地位。气管插管是开胸手术、呼吸功能检测和肺部给药等动物实验过程中的关键步骤。因小鼠口腔特殊的解剖结构,特别是下颌不能完全打开,不能通过口腔直视气管的开口,使经口腔直接作气管插管异常困难。目前已有多种气管插管方法应用于小鼠的实验中[2~7],但这些方法不但技术操作复杂并需要特殊设备,而且往往在气管插管时由于反复操作和对气管及咽喉部周围组织的损伤,从而影响插管的重复进行和整个实验的成败。本文摸索和总结了一种新的无需特殊设备及体位,一人操作即能完成的小鼠气管...&
(本文共2页)
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福尔马林(Formalin)是甲醛的40%的水溶液,是一种刺激性液体。它在医疗及卫生行业中用途非常广泛。但福尔马林对机体的多个组织和器官具有毒性作用‘几’(“),因此逐渐引起了人们的注意。国外近年文献报道认为福尔马林对组织器官除了有毒性作用外,还可能有导致鼻咽及口咽组织癌变的作用(3)。目前国内外有关福尔马林对机体毒性影响的研究较少,尤其有关它对机体毒性作用的病理形态学改变的资料更少。本实验旨在对Formali。进行动物实验研究,以观察其对小鼠气管、肺、肝组织的病理形态学改变,特别是超微结构的变化。为福尔马林的毒性研究提供实验依据。164材料和方法一、实验材料 l、福尔马林:甲醛分子式HC HO。纯度,分析纯。由广州化学试剂厂提供。 2、实验动物:昆明种小鼠,体重18一22克,雄性。 二、实验方法 l、染毒方法:采用静式呼吸道吸入染毒“)。染毒柜内福尔马林浓度为100mg/m习。染毒为每日一次,每次接触吸入2小时,共6天。 2、...&
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传真：010-11,12-EET的延迟性心脏保护作用与磷酸化ERK1/2的关系--《中国病理生理杂志》2006年12期
11,12-EET的延迟性心脏保护作用与磷酸化ERK1/2的关系
【摘要】：目的:观察11,12-EET延迟性保护作用对缺血再灌注大鼠心肌ERK活性及磷酸化ERK表达的影响,探讨其在11,12-EET延迟性保护中的作用。方法:复制大鼠心肌缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dtm ax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dtm ax);采用免疫共沉淀法测定大鼠心肌组织中细胞外调节激酶(ERK)的活性,采用W estern b lotting法测定大鼠心肌组织中磷酸化ERK的表达。结果:I/R组缺血60 m in及再灌注30 m in两个时段±dp/dtm ax均低于sham组(P0.05),24 hE-ET
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：R363
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400-819-9993花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物EET促进血管生成的研究--《中华心血管病杂志》2005年12期
花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物EET促进血管生成的研究
【摘要】：目的研究花生四烯酸细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶代谢产物表氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acid,EET)对牛主动脉内皮细胞(bovine endothelial cells,BAEC)、对血管生成的影响及其机制。方法分离BAEC培养,给予外源性EET刺激、重组腺相关病毒介导的各种CYP表氧化酶(CYP2J2,CYP2C11,CYPF87V)转染后,采用细胞计数、噻唑蓝比色法检测细胞增殖改变,用流式细胞仪检测对细胞增殖周期的影响,同时检测细胞趋化移行的改变,比较对Matrigel中毛细血管样结构形成的影响,观察表氧化酶过度表达对鸡胚尿囊绒毛膜血管生成和大鼠缺血后肢毛细血管生成的影响。结果各种EET刺激或表氧化酶病毒转染均显著促进BAEC的增殖、趋化和移行,并使Matrigel中毛细血管样结构的形成明显增加,且EET呈剂量依赖性效应,而合用一氧化氮合酶抑制剂、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抑制剂或磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)抑制剂均可显著抑制上述效应,另外表氧化酶病毒转染尚能明显促进CAM小血管和大鼠缺血后肢毛细血管的生成。结论花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶及其代谢产物EET可显著促进血管的生成,可改善局部组织的缺血,其作用由MAKP和PI3K介导,部分效应由其对一氧化氮的上调作用介导。
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：R363
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400-819-9993表氧化二十碳三烯酸对B淋巴细胞功能的影响--《中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集》2010年
表氧化二十碳三烯酸对B淋巴细胞功能的影响
【摘要】：背景与目的:表氧化二十碳三烯酸(EETs)由细胞色素P450表氧化物酶(CYP450)从花生四烯酸合成而来,在体主要由水溶性表氧化物酶(sEH)降解。以往研究发现,EETs具有抗炎作用,但其各个异构体在免疫系统中的作用还不清楚。本研究的目的在于探讨EETs异构体以及由于sEH缺乏引起EETs升高时对体液免疫的调控作用。方法和结果:首先用磁珠分选的方法分离并离体培养C57小鼠脾脏B细胞,继而用ELISA的方法检测EETs对B细胞抗体分泌的影响,结果发现EETs的四种异构体中,8,9-EET能明显抑制基础状态和多种刺激条件下脾脏B细胞的抗体分泌,其中对B细胞有丝分裂原内毒素刺激引起的IgM分泌的抑制作用最为显著。11,12-EET和14,15-EET对B细胞抗体分泌也有轻度的抑制作用,而5,6-EET对B细胞抗体分泌则有轻度的促进作用。进一步用流式细胞仪检测EETs对B细胞存活、增殖和浆细胞化的影响,结果发现8,9-EET能明显抑制离体培养B细胞的存活,促进B细胞的凋亡,对B细胞的增殖也有一定的抑制作用,而对B细胞的浆细胞化表现为轻度促进作用。比较同窝sEH~(-/-)和sEH~(+/+)小鼠,发现sEH~(-/-)小鼠的血浆抗体水平较sEH~(+/+)小鼠低。离体培养小鼠B细胞,其基础水平和LPS刺激条件下抗体分泌水平sEH~(-/-)小鼠都较sEH~(+/+)小鼠低,B细胞增殖能力sEH~(-/-)小鼠也较sEH~(+/+)小鼠弱。结论:8,9-EET抑制B细胞的存活和增殖,进而抑制B细胞抗体IgM的产生,这些研究结果为B细胞过度激活所介导的自身免疫疾病的治疗可能提供了新的治疗靶点。
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