您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
幽门螺杆菌babA2和胃黏膜上皮Le-%27b-抗原在不同血型中表达情况及与消化性溃疡的关系.pdf 39页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
下载提示
1.本站不保证该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值，立即自动返金币，充值渠道很便利
需要金币：200 &&
你可能关注的文档：
··········
··········
江苏大学硕士学位论文
pylori，Hp)表
研究不同血型(ABO)患者幽门螺杆菌(Helicobacter
adhesion，
antigenbinding
达血型抗原结合粘附素基I因(bloodgroup
的关系。从babA2、Leb抗原的角度探讨O型血是否增加患消化性溃疡
例消化性溃疡)患者Hp感染情况，对Hp阳性患者，检测其血型，并进
行内镜检查，取2块胃窦部黏膜组织，一块进行Hp培养，提取Hp的
babA2表达情况；另
RNA，反转录后采用聚合酶链反应(PCR)检测Hp
一块组织进行组织病理学检查，并应用免疫组化技术测定胃黏膜上皮
Leb抗原表达情况。分别比较不同血型患者幽门螺杆菌表面babA2基因
和胃黏膜Leb表达情况及与消化性溃疡的关系。
1．56例患者中，消化性溃疡组中，O型血和非O型血分别占71％、
29％，胃炎组O型血和非O型血分别占44％、56％，据大样本统计，中
国汉族O型约血占31％，消化性溃疡组O型血所占LL侈,J高于胃炎组及
正常人群L婚IJ(P值均&o．0125)。
江苏大学硕士学位论文
疡组kb评分高于胃炎组(P&0．05)。
1．0型血可能是消化性溃疡的高危因素。
2．0型血患者胃黏膜高表达kb抗原；高表达kb抗原者更容易患
消化性溃疡。
3．babA2阳性时，O型血患者更易患消化性溃疡。
关键词：幽门螺杆菌，babA2，Lewisb，消化性溃疡
江苏大学硕士学位论文
Objective：
thebabA2ofHelicobacter
investigate
pylori(H．p)and
statusindifferentABOblood
gastricLewisb(kb)antigen
group，and
determinethe
betweenthe
ulcerwithit．Todiscuss
relationship
whetherbloodincreasetheriskof
ulcerfromthe
ofbabA2and
of14Cbreathtestandserum
Byapplication
anti—Hpantibody
infection，of
patients(25gastriti
正在加载中，请稍后...您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
Ras基因在EColiBL(DE)菌株中的表达.doc 42页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
下载提示
1.本站不保证该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值，立即自动返金币，充值渠道很便利
需要金币：150 &&
你可能关注的文档：
··········
··········
Ras基因在E.Coli BL21(DE3)菌株中的表达
(化工与制药学院04级生物技术1班
学号：15)指导老师：
摘要：重写！
β-甘露聚糖酶（β-1,4-D-mannan mannanohydrolase,EC8）是一类能够水解含有β-1,4-D-甘露糖苷键的甘露寡糖、甘露多醣（包括甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡苷聚糖）的内切水解酶。它属于半纤维素酶类，可以把葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖、β-甘露聚糖等植物多糖降解为甘露寡糖。甘露寡糖在新药、饲料添加剂等方面的应用有极大的潜力-甘露聚糖酶能将魔芋精粉中的葡甘聚糖转化为水溶性的甘露低聚糖。利用基因工程技术，将甘露聚糖酶基因在大肠杆菌中克隆表达，是高效、快捷、经济获得此酶的途径之一。在本次实验中，笔者采用PCR方法从带有甘露聚糖酶基因的菌株中扩增出该基因片段，将其转入由大肠杆菌DH5a制备的感受态细胞中，通过蓝白斑筛选获得了阳性克隆子，然后将目的基因片段构建到大肠杆菌表达载体中并转入大肠杆菌表达系统，获得了甘露聚糖酶基因的表达
1.Ras (rat sarcoma,Ras)是。。。。。。。。。。。。Ras蛋白为膜结合型的GTP/GDP结合蛋白,相对分子质量为21kDa，定位于细胞膜内侧，意义。
2.本人作者通过摸索PCR反应条件和反应体系，技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的ras基因序列，
3，然后将ras基因克隆至带六个
融合表达载体pET28 中转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导表达重组融合蛋白，SDS分析表达产物.
实验结果表明，采用融合表达载体pET28高效表达出相对分子量约的重组融合蛋白. ras蛋白的表达为。。。。。。。。。。。。。。。。。为进一步研究ras的功能提供了理论基础
ras基因家庭包括同源的Ha-ras, Ki-ras和N-ras， kDa结构相近的P21?均编码分子量为21ras蛋白，人类正常细胞中的ras癌基因对细胞内的代谢、生长、分裂具有重要作用。ras基因的激活能启动和加速细胞的生长、增殖，以至造成细胞的恶性转化。
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是一种选择性体外核酸扩增技术，由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成，每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩增的目的基因扩增放大几百万倍。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍，使肉眼能直接观察和判断，可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
α-互补现象筛选转化子是最常用的一种鉴定方法。由于载体上带有大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列，这个编码区中插入了一个多克隆位点, 但并没有破坏lacZ的阅读框架, 不影响其正常功能。这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补。由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别，它在生色底物X-gal下存在下被IPTG诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到pBS质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同样条件下含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落.
Ras(P21)蛋白位于细胞膜内侧，它在传递细胞生长分化信号方面起重要作用。它属于三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白(一种细胞信息传递的耦联因子)，通过GTP与二磷酸鸟苷(GDP)的相互转化来调节信息的传递。研究 ras基因在临床中有很多应用，比如可用来进行疾病的诊断，病情评估及预后判断以及治疗等。
关键词：ras基因；聚合酶链反应；α-互补现象； Ras(P21)蛋白
方法: 采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF
的GCRG224 cDNA序列将其克隆至硫氧还蛋白融合表达
载体pET102/D-TOPO 中转化大肠杆菌BL21 经IPTG
诱导表达重组融合蛋白SDS分析表达产物.
结果: 高效表达出相对分子量约16 800的重组融合蛋白. 薄
层凝胶扫描显示其表达量占菌体总蛋白质的22.3%.
结论: 在大肠杆菌中成功表达了GCRG224重组融合蛋白.The expression of ras gene in E.Coli BL21(DE3)
（School of Chemical Engineering and Pharmacy，Wu
正在加载中，请稍后...
13页13页12页45页27页33页50页25页35页16页& 微生物的利用知识点 & “请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从...”习题详情
138位同学学习过此题，做题成功率69.5%
请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于&；它的同化作用类型是　&。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于　&（选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是　&.（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行　&（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和　&。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能　&。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和　&。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的　&。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是　&（2分）。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过　&处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是　&.A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作，原因是　&（2分。至少写出两条）。&
本题难度：一般
题型：解答题&|&来源：2011-河南省郑州市高三第二次质量预测（理综）生物部分
分析与解答
习题“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____（选择、鉴...”的分析与解答如下所示：
找到答案了，赞一个
如发现试题中存在任何错误，请及时纠错告诉我们，谢谢你的支持！
请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____...
错误类型：
习题内容残缺不全
习题有文字标点错误
习题内容结构混乱
习题对应知识点不正确
分析解答残缺不全
分析解答有文字标点错误
分析解答结构混乱
习题类型错误
错误详情：
我的名号（最多30个字）：
看完解答，记得给个难度评级哦！
经过分析，习题“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____（选择、鉴...”主要考察你对“微生物的利用”
等考点的理解。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
微生物的利用
与“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____（选择、鉴...”相似的题目：
【生物——生物技术实践】（18分）十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今形形色色的发酵食品在食品业中占有重要地位。（1）人们喜爱的腐乳是我国独特的传统发酵食品。腐乳是用豆腐发酵制成，多种微生物参与发酵。腐乳制作的原理是：&&&&。（2）右下图为酿制葡萄酒的两个简易装置，请分析回答：①葡萄酒是一种很容易消化的低度发酵酒。葡萄酒的酿制原理是先通气进行&&&&，通过出芽生殖方式增加酵母菌的数量，然后再进行发酵获得葡萄酒。在葡萄汁的自然发酵过程中，酵母菌的来源是&&&&。葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可用&&&&来检验。工业生产葡萄酒时，为有利于葡萄的压榨出汁、葡萄汁清澈透明，可加入&&&&酶。②喝剩的葡萄酒放置时间长后酒味变酸的原因是&&&&。③制作葡萄酒，需将温度严格控制在&&&&℃。制作葡萄酒后制果醋，应将温度严格控制在&&&&℃。④甲装置中，A液体是&&&&，NaHCO3溶液的作用是&&&&；若用乙装置酿制葡萄酒，在发酵过程中，必须进行的操作是&&&&。⑤葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这是因为&&&&。&&&&
不同微生物有各自的代谢特点，人们常据此分离鉴别微生物的种类。实验室有两个菌种：胱氨酸依赖型细菌(无胱氨酸不能生长)，甲基营养细菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源)，但试管上标签脱落。某同学的鉴别思路是配制3个培养基，只接种其中的任一菌种，根据生长状况将其鉴别出来，另一种自然鉴别出来。请根据这一思路完成实验方案。实验步骤：第一步：在两个菌种的试管上分别标记A、B；第二步：配制不含胱氨酸和甲基营养物的培养基，分别倒入3个培养皿中，标上l、2、3，&&&&。第三步：&&&&。结果分析：&&&&。和其他微生物的培养一样，第二步和第三步中都应注意&&&&操作，否则将导致实验失败。&&&&
以下为某兴趣小组获得的实验结果及其分析,正确的是&&&&
“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从...”的最新评论
该知识点好题
该知识点易错题
欢迎来到乐乐题库，查看习题“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____（选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是____.（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和____。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能____。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和____。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____（2分）。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过____处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____.A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作，原因是____（2分。至少写出两条）。”的答案、考点梳理，并查找与习题“请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____；它的同化作用类型是____。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____（选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是____.（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和____。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能____。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和____。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____（2分）。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过____处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____.A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作，原因是____（2分。至少写出两条）。”相似的习题。}