免疫组化和westernblot blot的区别

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免疫组化和Western Blot可以用同一种抗体吗?
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免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都会有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可以同时用于免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。所以还要看楼主你的具体情况。赛哲生物技术支持
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免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都会有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可以同时用于免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。所以还要看楼主你的具体情况。赛哲生物技术支持
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贵公司推广真有意思~
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说得挺好的啊!
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补充一下:这个首先根据说明书,其次要做预实验。不管是构象标位还是线性标位,能做想做的实验才是王道!
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同意先预实验一下,很多时候实验结果和理论上都不太一样!我做过使用wb的抗体做组化,结果还可以的!
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看说明书,上面会说明适用于什么的,
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看说明书 原理上可以
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Angelia198606 请教各位说明书上有,abcam 的一般都是可以的
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rainie-95 免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都会有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可以同时用于免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。所以还要看楼主你的具体情况。赛哲生物技术支持赞!这个解释非常棒!非常专业!
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关于丁香园[转载]免疫组化与Western&blot的区别
个人感觉还是有一定的区别的,从难度上来说,western比免疫组化容易些。western可以用内参,使结果更真实。western也可以组织定位,不过比较粗略,如果想看具体的位置,比如想要了解是哪些细胞,就要用到免疫组化。可以两个结合起来用。
免疫组化一般都是在组织上做,细胞上做的好像叫免疫过氧化物酶单层试验,叫法不一样。具体应用那个要看你有什么样的实验材料了。做Western&Blot用组织的很少,干扰太多了,一般都是细胞培养出来的样品。
如果你想知道某蛋白的组织表达特异性,用免疫组化,即可定位
如果想知道该蛋白在细胞中中有没有表达,用western,可定量
首先得从免疫组化和western
bolt之间的原理说起走哈,免疫组化,故名示意,应该是在组织上作的免疫荧光染色,包括冰冻切片和石蜡切片,而western作的是蛋白质电泳,一般是细胞破壁后的蛋白表达物
免疫组化除了可以定量之外,还可以定位。做免疫组化的标本来源可以是新鲜组织也可以是保存的蜡块,但western只能用新鲜组织
免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白
都含有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于
免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。(限于单抗)
因为如果用普通显微镜只能看出阳性阴性,但在带有图像采集摄像系统的显微镜,采集软件带有自动分析功能,根据所标定的面积内阳性组织或细胞的面积来自动算出阳性率,因其人为因素较多,只能说是半定量
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注意事项请问做免疫组化的抗体和做Western blot的抗体有什么区别和联系 谢谢_百度拇指医生
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?请问做免疫组化的抗体和做Western blot的抗体有什么区别和联系 谢谢
拇指医生提醒您:该问题下为网友贡献,仅供参考。
各种品牌的会标明抗体适用于哪种方法,还有就是抗体浓度需要不同
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