还在为培养基适用性检查的过程麻烦还烦恼吗?杭州微球生物技术有限公司生产的培养基灵敏度指示剂是一个很小的水溶性球状物,包含了数量精确的微生物.●符合美国药典、日本药局方、欧洲药典、中国药典的要求；●微生物数量精确,经稀释后微生物的数量在10～100cfu/0.1mL；●使用方便,加入一定量的稀释液就可直接使用；●每个产品批都进行微生物数量测定和杂菌测定；●用注射器或微量移液器即可操作.
植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基.MS培养基的配制包括以下步骤.培养基母液的配制和保存
MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液.这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液.现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用.大量元素(母液Ⅰ)
mg／LNH4NO3
33 000KNO3
38 000CaCl2·2H2O
8 800MgSO4·7H2O
7 400KH2PO4
3 400微量元素(母液Ⅱ)KI
1 240MnSO4·4H2O
4 460ZnSO4·7H2O
1 720Na2MoO4·2H2O
50CuSO4·5H2O
5CoCl2·6H2O
5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O
5 560Na2-EDTA·2H2O
7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇
20 000ⅣB烟酸
100盐酸吡哆醇(维生素B6)
100盐酸硫胺素(维生素B1)
400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液.上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液.其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中.各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中.MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6?苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL).其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0?1 mg/mL的母液.配制培养液
用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL.再取2,4?D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中.配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错.溶化琼脂
用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状.然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀.需要注意的是,在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备.此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替.但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤.调pH
用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5?4～7?0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5?8为止(培养基的pH必须严格控制在5?8).培养基的分装
溶化的培养基应该趁热分装.分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中.注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上.锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4.每1 000 mL培养基,可分装25～30瓶.培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口.用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎.最后在锥形瓶外壁贴上标签.高压灭菌
培养基的高压灭菌包括以下几个步骤.第一,码放锥形瓶.将装有培养基的锥形瓶直立于金属小筐中,再放入高压蒸气灭菌锅内.如果没有金属小筐,可以在两层锥形瓶之间放一块玻璃板隔开.第二,放置其他需要灭菌的物品.将其他需要灭菌的物品也放入高压蒸气灭菌锅内,如装有蒸馏水的锥形瓶、带螺口盖的玻璃瓶、烧杯、广口瓶(以上物品都要用牛皮纸封口),用牛皮纸包裹的培养皿、剪刀、解剖刀、镊子、滤纸、铅笔等.第三,灭菌.待需要灭菌的物品码放完毕,盖上锅盖.在98 kPa、121.3 ℃下,灭菌20 min.灭菌后取出锥形瓶,让其中的培养基自然冷却凝固.最好放置1 d后再使用. 从知道复来的,我可肯定资料正确,因为以前做过.
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看是做哪种微生物了,一般现在的培养基成分都是配好的,化验人员只需按说明书的比例配制就可以了.具体使用哪种培养基参加检验依据标准.
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一般一次的配制量是1000毫升 培养基包装瓶上会显示取多少克配制
你问的太笼统了，你想培养什么可以按照培养基配方去做。
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培养基适用性检查和控制菌检查方法适用性试验-2015药典
录入时间: 11:48:21
来源：海博生物
供试品控制菌检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
供试品的控制菌检查方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合
于该产品的控制菌检查。
若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，控制菌检查方法应重新进行适用性试验。
菌种及菌液制备
菌种 试验用菌株的传代次数不得超过5 代（从菌种保藏中心获得的干燥菌
种为第0 代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC（B）26 003〕
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC（B）10 104〕
大肠埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC（B）44 102〕
乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC（B）50 094〕
白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC（F）98 001〕
生孢梭菌（Clostridium sporogenes）〔CMCC（B）64 941〕
菌液制备 将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中或在胰酪大豆胨琼脂培养基上，30～35℃培养18～24 小时；将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上或沙氏葡萄糖液体培养基中，20～25℃培养2～3 天；将生孢梭菌接种于梭菌增菌培养基中置厌氧条件下30～35℃培养24～48 小时或接种于硫乙醇酸盐流体培养基中30～35℃培养18～24 小时。上述培养物用pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2 小时内使用；若保存在2～8℃，可在
24 小时内使用。生孢梭菌孢子悬液可替代新鲜的菌悬液，稳定的孢子悬液可保存在2～8℃，在验证过的贮存期内使用。
为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验， 阴性对照试验应无菌生长。如阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。
培养基适用性检查
控制菌检查用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基的适用性检查。
控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查
液体培养基促生长能力检查 分别接种不大于100cfu 的试验菌（见表1）于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，与对照培养基管比较，被检培养基管试验菌应生长良好。
固体培养基促生长能力检查 用涂布法分别接种不大于100cfu 的试验菌于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征应一致。
培养基抑制能力检查 接种不少于100cfu 的试验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不短于规定的最长培养时间下培养，试验菌应不得生长。
培养基指示特性检查 用涂布法分别接种不大于100cfu 的试验菌于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，被检培养基上试验菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。
控制菌检查方法适用性试验
供试液制备 按下列“供试品检查”中的规定制备供试液。
试验菌 根据各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应试验菌株，确认耐胆盐革兰阴性菌检查方法时,采用大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为试验菌。
适用性试验 按控制菌检查法取规定量供试液及不大于100cfu 的试验菌接
入规定的培养基中；采用薄膜过滤法时,取规定量供试液,过滤,冲洗,试验菌应加在最后一次冲洗液中,过滤后,注入规定的培养基或取出滤膜接入规定的培养基中。依相应的控制菌检查方法，在规定的温度及最短时间下培养，应能检出所加试验菌相应的反应特征。
结果判断 上述试验若检出试验菌，按此供试液制备法和控制菌检查方法进行供试品检查；若未检出试验菌，应消除供试品的抑菌活性（见非无菌产品微生物检查：微生物计数法（附录×××）中的“抗菌活性的去除或灭活”），并重新进行方法适用性试验。
如果经过试验确证供试品对试验菌的抗菌作用无法消除，可认为受抑制的微生物不可能存在于该供试品中，选择抑菌成份消除相对彻底的方法进行供试品的检查。
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论食品微生物检验中培养基的质量控制
在食品微生物检验过程中，由于操作过程相对复杂，影响食品检验结果准确性的因素较多，培养基的质量在食品微生物检测中起着决定性的作用。有效的对培养基进行质量控制，也是提高微生物检验质量的重要环节。做好食品微生物检验培养基的质量控制工作，必须从培养基的制备、验收、质量控制方法、培养基的性能测试入手，在提高检验人员水平素质的基础上严格实施实验室的质量控制措施，保证培养基和试剂的质量，真正意义上实现食品检验的高质量、高水准目标。本文就如何在食品检测过程中对培养基进行有效的质量控制作简要阐述。
作者单位：
开封市疾病预防控制中心,河南开封,475000
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主题：【求助】中国药典无菌检查的培养基装量和适用性检查装量不同，是不是试管规格有规定
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发表于： 10:08:45
中国药典无菌检查的培养基装量和适用性检查装量不同， 是不是试管规格有规定大小？
17:57:29 Last edit by hjx1988
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这个没有仔细研究过，试管大小是怎么回事？
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我最近也很纠结这个问题，不知道你这个问题解决了吗？能否分享一下，十分感谢！
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不完全明白药典当初为何这么规定，但是这个不影响实际工作中的使用。对于硫乙醇酸盐流体培养基每次装量不少于15mL，试管容积大是加大体积，保持氧化层的高度不超过规定（使用前小于20%，使用后不小于50%高度）。
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原文由 lov_new(v2750298) 发表:不完全明白药典当初为何这么规定，但是这个不影响实际工作中的使用。对于硫乙醇酸盐流体培养基每次装量不少于15mL，试管容积大是加大体积，保持氧化层的高度不超过规定（使用前小于20%，使用后不小于50%高度）。最低装量是保证微生物生长有足够的营养，而氧化层比例的规定是为了保证需氧菌和厌氧菌都能较好的生长。因此，虽然没有规定容器的大小，但要根据实际来选择适宜的容量，而且还要考虑关于灭菌防溢的装量限度等。
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原文由 miss_fairy(miss_fairy) 发表:原文由 lov_new(v2750298) 发表:不完全明白药典当初为何这么规定，但是这个不影响实际工作中的使用。对于硫乙醇酸盐流体培养基每次装量不少于15mL，试管容积大是加大体积，保持氧化层的高度不超过规定（使用前小于20%，使用后不小于50%高度）。最低装量是保证微生物生长有足够的营养，而氧化层比例的规定是为了保证需氧菌和厌氧菌都能较好的生长。因此，虽然没有规定容器的大小，但要根据实际来选择适宜的容量，而且还要考虑关于灭菌防溢的装量限度等。那就说明这个装量问题不是很大，要根据你的试管的规格喽。}