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靶向hbsag同表位的双特异性抗体抗乙型肝炎病毒研究.pdf115页
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靶向hbsag同表位的双特异性抗体抗乙型肝炎病毒研究
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岁厣交通戈訾 博士学位论文
靶向HBsAg不同表位的双特异性抗体抗乙型肝炎病毒研究 Effective a HBV-NeutralizingActivitybyBispecific Antibody Distinct TargetingHBsAgEpitopes 研究生姓名： 送塞垄 学号： 指导教师： 堂雁云熬拯 学科、专业： 鱼疫堂 研究方向： 拉签坌掏复边能 学位类型： 登堂堂焦 培养单位： 土连塞通太堂医堂暄 答辩日期： 三Q二三生堕月 上海交通大学2013届博士学位论文
靶[h'J HBsAg不同表位的双特异性抗体抗乙型肝炎病毒研 究 姓 名：
谈文龙 学 号：
00座机电话号码 系 所： 医学院 专 业： 免疫学 研究方向： 抗体结构与功能 资助基金： “973’’项目 学位级别： 博士 导 师： 张雁云教授 二O一三年四月 ThesisforDoctor Jiao Degree，ShanghaiTongUniversity
Effective a HBV-NeutralizingActivitybyBispecific Distinct AntibodyTargetingHBsAgEpitopes Ph．D Tan Candidate：Wen―long Major：Immunology Research StructureandFunction Field：Antibody ofMedicine College：School Advisor：Yan―yunZhang Apr．2013 上海交通大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，
独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本
论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本
文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期：矽哆年多月多日
上海交通大学博士学位论文 学位论文版权使用授权书 上海交通大学上海爻通大字 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅
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293F细胞；人胚肾细胞-F克隆
产品报价：￥10元
更新时间：访问人数： 17次
产地：美国
厂商性质：生产商品牌：美国ATCC
公司名称： 上海信裕生物科技有限公司
联系人：余琪
（联系我时，请说明是在中国环保在线上看到的，谢谢！）
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293F细胞；人胚肾细胞-F克隆传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。细胞名称：293F
人胚肾细胞-F克隆组织来源：肺培养条件：DMEM +10% FBS形
态：贴壁；上皮细胞样规 格：1×10^6 cells/瓶
293F细胞；人胚肾细胞-F克隆现货供应，代次低，状态好，现货。规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书培养条件：DMEM +10% FBS细胞数量：1& 106个细胞传代：1:4~1:6传代；每周换液2~3次问题一：293F细胞；人胚肾细胞-F克隆长得很快很好，30万一瓶，3天就长满，也没出现污染，死细胞也较少。但是消化细胞后，用培养基中和消化液，在细胞计数板上可以看见细胞粘成一小团团的，无法准确计数，很影响种板的准确性，但传代后细胞铺板均匀，生长得也很好。我尝试了很多次细胞计数，每次都出现细胞成团的问题。问题解答1：遇到这种情况，办法有两个，1.就是不能等到293F细胞；人胚肾细胞-F克隆长得很满时才去消化计数，可以在密度有90%时就去计数，如果怕细胞量不够铺板可以两瓶甚至三瓶合在一起。2.如果聚团还是很严重，我就把一个细胞团默认为3-4个细胞这样来计数，发现这样计数跟实际细胞数也没有太大出入，之后我就一直这样做了。我查了很多资料，都说这个细胞容易抱团生长，因为有突触，所以容易连在一起，为了避免过度消化以及吹打。问题解答2：针对你说的抱团情况，我的处理方法，就是用PBS轻轻吹洗细胞，目的是把贴壁不好的细胞弃掉，你这样重复几次后293F细胞；人胚肾细胞-F克隆状态就能恢复了，还是强调一下，就是消化是不能消化过度，吹打时也要轻柔。另外血清浓度最好不要太高，这样容易导致细胞加速老化，一般10%就可以了。&Hum--甲N上皮&& &2&& &原代5-3/5-2，5-3&& &A&& &上皮培养基+2%FBSHum--甲C&& &2&& &原代5-3/5-4,5-5&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜RA&& &2&& &原代5-4/1-1,1-2&& &组织&& &Hum--关节滑膜N&& &2&& &原代5-4/1-3，1-4&& &组织&& &Hum--关节滑膜RA&& &3&& &原代5-4/1-5，2-1,2-2&& &组织&& &Hum--关节滑膜N&& &4&& &原代5-4/2-3，2-4,2-5,3-1&& &组织&& &大鼠主动脉内皮&& &1&& &原代5-4/3-2，3-3&& &A&& &内皮培养基+5%FBS大鼠主动脉平滑肌&& &1&& &原代5-4/3-4&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHUM--胃N上皮&& &2&& &原代5-4/3-5，4-1&& &A&& &上皮培养基+2%FBSHUM--胃N上皮&& &1&& &原代5-4/4-2&& &A&& &上皮培养基+2%FBS大鼠软骨细胞&& &1&& &原代5-4/4-3&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠食管平滑肌&& &1&& &原代5-4/4-4&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠膀胱平滑肌细胞&& &1&& &原代5-4/4-5&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠肾小管上皮细胞&& &4&& &原代5-4/5-1，5-2,5-3，5-4&& &A&& &上皮培养基+2%FBS大鼠食管平滑肌&& &1&& &原代5-4/5-5&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠气管平滑肌&& &1&& &原代5-5/1-1&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠软骨细胞&& &1&& &原代5-5/1-2&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠肝窦内皮细胞&& &1&& &原代5-5/1-3&& &A&& &内皮培养基+5%FBS大鼠软骨细胞（关节处）&& &4&& &原代5-5/1-4，1-5,2-1,2-2&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠肺微血管内皮&& &1&& &原代5-5/2-3&& &A&& &内皮培养基+5%FBS大鼠皮肤成纤维细胞&& &3&& &原代5-5/2-4，2-5,3-1&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜N&& &3&& &原代5-5/3-2,3-3,3-4&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜RA&& &3&& &原代5-5/3-5,4-1,4-2&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠心肌成纤维&& &1&& &原代5-5/4-3&& &A&& &DMEM/F12+10%FBS大鼠胸主动脉内皮&& &2&& &原代5-5/4-4，4-5&& &A&& &内皮培养基+5%FBSHum--甲N 上皮&& &2&& &原代5-5/5-1,5-2&& &A&& &上皮培养基+2%FBSHum--胃N 平滑肌&& &1&& &原代5-5/5-3&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--甲C&& &2&& &原代5-5/5-4,5-5&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--甲C&& &1&& &原代6-1/1-1&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--甲C&& &2&& &原代6-1/1-2,1-3&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜N&& &2&& &原代6-1/1-4,1-5&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜RA&& &1&& &原代6-1/2-2&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--关节滑膜N&& &1&& &原代6-1/2-3&& &A&& &DMEM/F12+10%FBSHum--胆囊N&& &2&& &原代6-1/2-5，3-1&& &组织&& &Hum--胆囊X&& &2&& &原代6-1/3-2，3-3&& &组织&& &Hum--胃N&& &2&& &原代6-1/3-4，3-5&& &组织&& &Hum--胃C&& &2&& &原代6-1/4-1,4-2&& &组织&& &HUM--肺C&& &2&& &原代6-1/4-3，4-4&& &组织&& &HUM--肺N&& &3&& &原代6-1/4-5,5-1,5-2&& &组织&& &大鼠肝窦内皮细胞&& &1&& &原代6-1/5-3&& &A&& &内皮培养基+5%FBS小鼠肾小管上皮细胞&& &2&& &原代6-1/5-4，5-5&& &A&& &上皮培养基+2%FBS大鼠肾小管上皮细胞&& &3&& &原代6-2/1-1，1-2,1-3&& &A&& &上皮培养基+2%FBS
联系人：余琪
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（联系我时，请说明是在上看到的，谢谢！）293F细胞培养技术
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293F细胞培养技术
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公司名称：上海斯信生物科技有限公司
所&在&地：上海松江
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293F细胞培养技术，由上海斯信生物公司提供。
上海斯信生物科技有限公司，一流的293F细胞培养技术。atcc细胞，atcc传代细胞，sciencell细胞，sciencell原代细胞，细胞培养，细胞培养技术，原代细胞培养，动物细胞培养，植物细胞培养提供者。
产品详细信息
细胞产品词：16HBE细胞
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293F细胞培养技术，由上海斯信生物公司提供。ScienCell 研究实验室（ScienCell）是一家生物技术公司，其使命是实验和治疗用细胞和细胞相关产品的研究和发展。 ScienCell为研究界提供各种高质量的正常的人类和动物细胞，细胞培养基和试剂，培养基添加因子，细胞来源的RNA，cDNA和蛋白质。ScienCell的科学家们以改善生活质量，实现细胞的能力，打击人类退化性疾病为目的研究和开发各种细胞治疗策略。ScienCell总部设在美国加利福尼亚州圣地亚哥，公司成立于1999年。&
293F细胞培养技术，由上海斯信生物公司提供。ScienCell Research Laboratories (ScienCell) is a biotechnology company whose mission is the research and development of cell and cell-related products for experimental and therapeutic use. The ScienCell technology provides a variety of high quality normal human and animal cells, cell culture media and reagents, medium supplements, cell-derived RNA, cDNA and proteins for the research community. Scientists at ScienCell are also studying and developing cell therapeutic strategies that will significantly improve the quality of life by achieving the cell's ability to combat human degenerative disorders. We are based in San Diego, California and were established in 1999.
293F细胞培养技术，由上海斯信生物公司提供。
细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性，分为 贴附型、悬浮型。
细胞贴附在支持物表面生长，只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。
贴附型细胞的分型
1.成纤维型细胞：(fibroblast) 来自中胚层
特点：与体内成纤维细胞形态相似,胞体梭型或不规则三角形,中央有圆形核,胞质向外伸出2～3个长短不同的突起。细胞在生长时呈放射状,漩涡或火焰状走行。
起源：细胞来自中胚层间充质组织。
除真正的成纤维细胞、心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮细胞。
注意：细胞在培养时成为成纤维型细胞是一种惯称,与体内细胞不同。
2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层。
特点：扁平不规则多角型、圆形核、细胞紧密相连成细胞增殖数目增多时,整个上皮膜随之移动。边缘细胞很少脱离细胞群而单独活动“ 拉网”现象与起源内外胚层组织有关。
组织: 皮肤表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。
3. 游走型细胞(wandering cell type)
特点：在支持物上散在生长,不连接成片,胞质伸出伪足或突起呈活跃的游走或变形运动,速度快不规则, 密度大连接成片呈多角形不易与其他类型的细胞 区别。
4. 多形型细胞(polymorphic cell type)
特点： 无规律的形态，如神经细胞。
特点： 不贴附在支持物生长，胞体圆形，在培养液中生长空间大，可长时间的生长，繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL－60。
分型的目的：
方便描述细胞在培养过程中的形态变化。培养条件好时，细胞相对稳定，可反映出起源、正常异常的区别，作为判定细胞生物学性状指标。
强调：一般形态并不是一项可靠指标要受各方面影响。
如：反复开关温箱、温度、C02的浓度、培养基变碱、支原体、pH值。细胞在接种时呈三角型状态，经培养一定时间后，细胞在传代前已形成上皮型细胞。
293F细胞培养技术，由上海斯信生物公司提供。
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请问293F细胞是293 Freestyle cell吗？ 293F细胞如何养呢？
请问293F细胞是293 Freestyle cell吗？ 293F细胞如何养呢？
好像可以贴壁培养也可以悬浮培养，分别是怎么培养的？
非常感谢！！
F是fast growing的意思吗？ 与invitrogen的freestyle 293没有关系吗？
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