益筋方治疗重症肌无力的实验研究--《山东中医药大学》2006年博士论文
益筋方治疗重症肌无力的实验研究
【摘要】：
目的:探讨温肾活血、益气升清的益筋方对实验性自身免疫性重症肌无力小鼠的治疗机理。方法:用重症肌无力病人的血清被动免疫小鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力模型,针对MG的基本病机是脾肾阳虚兼有血瘀组成益筋方,用益筋方、强的松给小鼠灌胃21天,处死动物。利用流式细胞技术和免疫组织化学方法,分别以T细胞及其亚群为指标,观察益筋方、强的松对EAMG细胞免疫的影响;以IL-2、IL-6、TNF-α为指标,观察益筋方对EAMG细胞因子的影响;通过检测胸腺细胞Bcl-2的表达,观察益筋方对EAMG胸腺的影响。结果:强的松、益筋方均能升高CD3~+,降低CD4~+/CD8~+比值;降低IL-2,降低胸腺Bcl-2表达;对IL-6影响不明显;可升高TNF。结论:益筋方能改善EAMG的肌无力症状,通过影响T细胞和其亚群及细胞因子,调控细胞免疫和体液免疫,起到治疗MG的作用。
【关键词】：
【学位授予单位】：山东中医药大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2006【分类号】：R277.7【目录】：
Abstract4-9
第一部分 益筋方治疗重症肌无力的理论依据11-29
一、重症肌无力的发病机制11-19
（一） 相关抗体11-13
（二） T 细胞及其亚群13-15
（三） 细胞因子15-18
（四） 胸腺及BCL-218-19
（五） 遗传因素19
二、重症肌无力的治疗现状19-21
（一） 胆碱酯酶抑制剂19
（二） 肾上腺糖皮质激素19-20
（三） 细胞毒制剂20
（四） 胸腺摘除术20
（五） 丙种球蛋白静脉注射20-21
（六） 血浆交换21
（七） 特异性免疫治疗21
三、祖国医学对重症肌无力的认识21-24
（一） 祖国医学对痿病的认识21-22
（二） 脾肾亏虚是重症肌无力的基本病机22-24
（三） 温肾活血，益气升清是重症肌无力的重要治法24
四、益筋方的组方依据24-29
（一） 益筋方的组方原则24-25
（二） 益筋方组方的药理依据25-29
第二部分 实验研究29-62
实验一 实验性自身免疫性重症肌无力小鼠模型的制备29-32
一、实验材料29
（一） 实验动物及饲料29
（二） 实验器材29
二、实验方法29-30
（一） 血清收集29
（二） 动物分组及模型制作29
（三） 观察指标29-30
三、实验结果30
四、讨论30-32
实验二 益筋方对EAMG 小鼠肌无力及体重的影响32-37
一、实验材料32
（一） 实验动物32
（二） 实验器材32
二、实验方法32
三、统计方法32-36
（一） 肌力评分32-34
（二） 体重34-36
四、实验结果36
五、讨论36-37
实验三 益筋方对EAMG 小鼠T 细胞亚群的影响37-44
一、实验材料37
（一） 实验动物37
（二） 实验试剂及仪器37
二、实验方法37-38
（一） 治疗和取血37
（二） T 细胞及其亚群测试37-38
三、统计方法38-42
（一） CD3~+38-39
（二） CD4~+39-41
（三） CD8~+41-42
四、实验结果42-43
五、讨论43-44
实验四 益筋方对EAMG 小鼠IL-6 的影响44-48
一、实验材料44
（一） 实验动物44
（二） 实验试剂及仪器44
二、实验方法44-45
（一） 治疗和取血同实验三44
（二） IL-6 测试44-45
三、统计方法45-47
四、实验结果47
五、讨论47-48
实验五 益筋方对 EAMG 小鼠 TNF-α 的影响48-51
一、实验材料48
（一） 实验动物48
（二） 实验试剂及仪器48
二、实验方法48-49
（一） 治疗和取血同实验三48
（二） TNF-α 测试48-49
三、统计方法49-50
四、实验结果50
五、讨论50-51
实验六 益筋方对EAMG 小鼠IL-2 的影响51-55
一、实验材料51
（一） 实验动物51
（二） 实验试剂及仪器51
二、实验方法51-52
（一） 治疗和取血同实验三51
（二） IL-2 测试51-52
三、统计方法52-53
四、实验结果53
五、讨论53-55
实验七 益筋方对 EAMG 小鼠肌肉、胸腺及其 Bcl-2 表达的影响55-62
一、实验材料55
（一） 实验动物55
（二） 实验试剂及仪器55
二、实验方法55-57
（一） 治疗与处死动物55
（二） 取腓肠肌、胸腺及病理观察55-56
（三） 免疫组化染色56-57
（四） BCL-2 观察57
三、统计方法57-59
四、实验结果59
五、讨论59-62
参考文献62-73
详细摘要89-94
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