关注今日：25 | 主题：467334
微信扫一扫
扫一扫，下载丁香园 App
即送15丁当
【求助】关于细胞冻存的问题
页码直达：
问题已关闭悬赏丁当:2
打算冻存RAW264.7细胞，自己配冻存液，供应商建议用10%DMOS+含10%小牛血清的完全培养液。这个含量血清是不是少了，培养液、血清、DMOS 7：2:1是不是好一点。自己配冻存液怎么灭菌？还有一个地方，细胞复苏的时候，有的建议融化后马上离心，有的建议溶化后加少量（5ml）培养液再离心，请问大家是什么操作的？求指点
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
引进的细胞当然按照推荐商的要求进行冻存。但一般建议你把种扩到足量的时候进行比对冻存，一种按照推荐商给出的要求进行冻存，另外一种就是常规冻存的方法（20%的血清+10%的DMSO）。冻存液是不需要灭菌的，因为培养基是无菌的，血清也是无菌的，而DMSO由于其万能溶剂的特点，当然也是无菌的。直接把三样加在一起混匀用就可以了。切记DMSO要买生物级的，AR级别的还是对细胞有影响的。常规来说复苏的时候细胞很脆弱，不建议进行离心处理。如果是担心DMSO的影响，你大可以等到细胞贴壁后就更换培养基好了。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
这个血清不少了，保证DMSO是10%就好。冻存液是现配的，在超净台配制就好。复苏的话融化后加点培养基好点（2-3ml差不多）。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
丁香园准中级站友
klayar 打算冻存RAW264.7细胞，自己配冻存液，供应商建议用10%DMOS+含10%小牛血清的完全培养液。这个含量血清是不是少了，培养液、血清、DMOS 7：2:1是不是好一点。自己配冻存液怎么灭菌？还有一个地方，细胞复苏的时候，有的建议融化后马上离心，有的建议溶化后加少量（5ml）培养液再离心，请问大家是什么操作的？求指点 供应商建议用10%DMOS+含10%小牛血清的完全培养液。这个含量血清是不是少了，培养液、血清、DMOS 7：2:1是不是好一点。按你们实验室的操作习惯就行了。自己配冻存液怎么灭菌？现配现用，注意避光。，细胞复苏的时候，有的建议融化后马上离心，有的建议溶化后加少量（5ml）培养液再离心，请问大家是什么操作的？还是要加到培养液中，要细胞适应一下培养的环境。一是因为在冻存体系和培养体系中，细胞所处的环境不一样，有不一样的渗透压。二是稀释DMSO。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
如果加了培养液，不马上离心的话DMSO不是会损伤细胞的吗？我们实验室刚开始培养，什么都不会。刚看了实验室DMSO在4°保存的时候有点凝固，可以加热然后一起配液吗
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
丁香园准中级站友
如果加了培养液，不马上离心的话DMSO不是会损伤细胞的吗？我们实验室刚开始培养，什么都不会。刚看了实验室DMSO在4°保存的时候有点凝固，可以加热然后一起配液吗所以在融化时，要快速操作。操作的细节可以参考
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
配制的时候，三种成分添加的先后顺序有要求吗， 你们实验室马上离心吗
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
一个细胞冻存不需要弄得这么神秘的。你大可在细胞消化等待过程中把细胞冻存液配好，消化结束后直接用冻存液体重悬细胞。直接利用冻存管分装冻存就是了。每个细胞的最佳冻存条件不一定相同，有地细胞在90%的血清里能长期保存，但有的就不行。最好你买个梯度冻存盒，用那个细胞冻存，复苏率高很多的。至于离心与否主要看你的细胞是否对DMSO很敏感，如果不敏感的话等到贴壁再换也不迟。敏感的细胞就低速离心后换无DMSO的完全培养基就好了。简单程序：4ml完全培养基+融化1ml细胞冻存悬，轻柔混匀后无菌移至10ml离心管，800rpm离心10分钟，弃掉上清后加入无DMSO完全培养基，混匀后加入T25-T50的培养瓶就好了。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
冻存时：完全培养基加5%DMSO就行了，都是无菌的，不用灭菌；复苏时：快速37度融化，加几ml 培养基离心1-2分钟即可。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园北京五洲东方科技发展有限公司
仪器信息网认证，请放心拨打
> 细胞冻存管
细胞冻存管
参考报价：
&7000元 RMB (人民币)
&外螺口型旋盖 带密封圈
英文名称：
信息完整度：
供货周期：
仪信通钻石会员
仪器信息网认证，
请放心拨打
名　称： 北京五洲东方科技发展有限公司
工商信息已核实
信用积分：3108
厂商反馈速度
五洲东方产品分类
五洲东方手机版
细胞冻存管，外螺口型旋盖，带密封圈
专为于液氮储存生物样品而设计，包括微生物、人类或动物细胞等。
PP材质，带刻度，外径12.5mm，U形底。
含大型磨砂标记区域，及管盖彩色管盖插片，易于样品的分类管理。
最低耐受温度为-196 &C。
&G射线灭菌 (SAL 10-6)，可121 &C(2 bar)高压湿热灭菌，依照DIN EN 285标准。
根据IVD指令 98/79拥有欧盟CE标志。
细胞冻存管为无菌，不含RNase、DNase、DNA、内毒素。
1000个(共10包，每包100个)【】&&&&【】&&&&
网友评论 已有[0]人评论
用户名: 密码:
评论只代表网友观点，不代表本站观点。
请输入验证码： <font color="#FF
?&<font color=#-20)
?&<font color=#-27)
?&<font color=#-26)
?&<font color=#-31)
?&<font color=#-10)
?&<font color=#-10)
?&<font color=#-10)
?&<font color=#-4)
?&<font color=#-27)
?&<font color=#-12)
?&<font color=#-4)
?&<font color=#-12)
?&<font color=#-5)
?&<font color=#-29)
?&<font color=#-10)
?&<font color=#-9)
Copyright(C)
中国生物器材网 电话：021-常用的耐低温细胞冻存管有哪些规格呢？_百度知道关注今日：25 | 主题：467334
微信扫一扫
扫一扫，下载丁香园 App
即送15丁当
冻存管掉在实验室地上了？
页码直达：
冻存细胞时一不小心把之前冻存的管子弄到地上了，地上挺脏的，我直接就放回去了，会不会有啥问题？摔得不是很厉害。。。
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
应该没什么问题
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
江南蛤总 冻存细胞时一不小心把之前冻存的管子弄到地上了，地上挺脏的，我直接就放回去了，会不会有啥问题？摔得不是很厉害。。。只要冻存管是密封好了的就没得什么问题
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
同楼上，冻存管外面肯定是有菌的，掉地上也没什么，关键是复苏的时候要注意无菌操作，拿到超净台里面时多用酒精喷一喷，枪头不要碰到管外壁等~
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我觉得没啥问题
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
没问题，有时候-80冰箱东西多，开冰箱不小心，冻存管能掉一地
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
刘楠楠05 没问题，有时候-80冰箱东西多，开冰箱不小心，冻存管能掉一地封口膜在液氮里泡脆了，一摔全碎了，不要紧嘛？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
dudumed 同楼上，冻存管外面肯定是有菌的，掉地上也没什么，关键是复苏的时候要注意无菌操作，拿到超净台里面时多用酒精喷一喷，枪头不要碰到管外壁等~封口膜在液氮里已经泡脆了，一摔全碎了，不要紧嘛？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
肖某某某 江南蛤总 冻存细胞时一不小心把之前冻存的管子弄到地上了，地上挺脏的，我直接就放回去了，会不会有啥问题？摔得不是很厉害。。。只要冻存管是密封好了的就没得什么问题封口膜在液氮里泡脆了，一摔全碎了，不过瓶口应该是捏紧的，不要紧嘛？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
江南蛤总 肖某某某 江南蛤总 冻存细胞时一不小心把之前冻存的管子弄到地上了，地上挺脏的，我直接就放回去了，会不会有啥问题？摔得不是很厉害。。。只要冻存管是密封好了的就没得什么问题封口膜在液氮里泡脆了，一摔全碎了，不过瓶口应该是捏紧的，不要紧嘛？那应该没得啥子问题，只要瓶口是紧的就行
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
肖某某某 江南蛤总 肖某某某 江南蛤总 冻存细胞时一不小心把之前冻存的管子弄到地上了，地上挺脏的，我直接就放回去了，会不会有啥问题？摔得不是很厉害。。。只要冻存管是密封好了的就没得什么问题封口膜在液氮里泡脆了，一摔全碎了，不过瓶口应该是捏紧的，不要紧嘛？那应该没得啥子问题，只要瓶口是紧的就行谢谢了！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
封口膜碎了没关系，不过一般用胶带封，不封也没有关系，拧紧就好了，瓶体上写明细胞详情就可以了，封口膜封着放液氮，都碎了，拿出来复苏，什么作用也起不到
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
刘楠楠05 封口膜碎了没关系，不过一般用胶带封，不封也没有关系，拧紧就好了，瓶体上写明细胞详情就可以了，封口膜封着放液氮，都碎了，拿出来复苏，什么作用也起不到谢谢！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
不加冻存液，应该没有生物能在液氮里活下来
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园}