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血液学基础
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你可能喜欢红细胞的作用,红细胞的作用是什么
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>> 红细胞的作用
红细胞的作用
时间： 来源:
第一篇:红细胞的作用网织细胞的临床意义
1.相关基础知识. 2.病例报道. 3.当今常用仪器和参数. 4.最新临床应用.
网织物的来源和性 质:实验证明网织物 不是核残存部分,也 不是固有的,它与胞 浆内的碱性物质相 关,进一步实验又证 实碱性物质越多,网 织物就越粗,碱性
物质越少,网织物就越细.现已证实它们就 是核糖体. 电镜下的网织红细胞:经活体染色可见核 糖体附于网丝上,线粒体由于中毒死亡而 变大和退化.当网织细胞趋于成熟时,核糖 体和细胞器逐渐消失,线粒体嵴消失,数目 减少,Golgi复合器,中心粒,聚铁蛋白的残 存物逐渐消失.
网织红细胞的生成
当有核红细胞在红细胞岛或途径血窦时都会 失去细胞核。此时生成的网织红细胞很可能 在血压的作用下从骨髓经血窦上皮进入血液。血循环中的网织红细胞的成熟大约24-48小时。20%的血红蛋白和细胞膜都是在这个时期完 成。电镜下的网织红细胞是轻微运动的，折 电镜下的网织红细胞是轻微运动的， 电镜下的网织红细胞是轻微运动的 皱的不规则外形。皱的不规则外形。在“年轻”网织红细胞中 散在的RNA可形成多聚 多聚RNA。当蛋白合成结 多聚 束时，又变成单体 单体RNA。单体
网织细胞的活体染色:
染色时间:2~8min 比例:用2%的煌焦油兰染色以滴数计1:5 时,网织细胞数开始减少,1:2为最佳. 涂片部位:中部为佳. 玻片干燥程度:立即干燥者最佳. ?普通光学显微镜法:计数1000个RBC中的Ret, 以百分数表示.
Miller窥盘法
由于目测计数误差较大,Brecler等 证明用Miller窥盘法可减低标准误, 特别是RBC较少时. EDTAK2抗凝血(4hr内)→染液(纯 化天青B或新美兰) →1:1,15min →涂片. 盘:厚1mm,直径19mm,圆玻片上 划出格子:大方格内Ret/(小方格 内RBCx9)X100%
刘斐:男17岁.面色苍白,乏力12年,间断腹痛 10年.93年头晕,乏力,苍白,不喜活 动,Hb6g/dl,骨穿显示缺铁性贫血.95年出现 进食水果冷食后脐周绞痛,振发加重,恶心, 呕吐.04年腹痛发作频繁,每日一次,程度剧 烈,伴针刺样痛.05.11来我院就诊.DC显示 Rbc大小不等,形态不规则,中心淡染区
扩大.铁三 项:SI92mg/dl,TBIC444mg/dl↑,TS21% ↓,SF2mg/ml↓ 长期医嘱11.29. 速力菲 11.29.Vc 11.29右旋糖酐铁. 得到两份化验报告:
RBC HGB HCT MCV CH CHCM RDW HDW RET% CHR
11.29 4.40 56.00 24.30 55.20 12.90 236.00 19.90 28.80 1.60 17.40
12.5 4.76 75.00 31.50 66.10 15.60 237.00 15.60 29.80 7.90 25.10
说明:虽然大多数仪器都利用了流式细胞 技术,但它们在应用的染料,检测技术方面 还是有各自的特点.通常荧光的强度,光吸 收量,和光散射量与网织细胞的RNA含量 成正比.
国际常用仪器
仪器型号 Bayer ADVIA 120 Bayer H*3 Abbott CellDyn CD3200 Abbott CellDyn CD3500 Abbott CellDyn CD3700 Abbott CellDyn CD4000 Becton Dickison ReticCount FACSCount Beckman Coulter STKS Beckman Coulter GENS Sysmex XE2100 ABX Pentra 120 Retic 处理 活体 活体 活体 活体 活体 荧光 荧光 活体 活体 荧光 荧光 染色 Oxazine 750 Oxazine 750 新亚甲蓝 新亚甲蓝 新亚甲蓝 CD4K 530 噻唑橙 新亚甲蓝 新亚甲蓝 聚次甲基荧光染料 噻唑橙 检测技术 光吸收 光吸收 光散射 光散射 光散射 荧光法 荧光法 VCS VCS 光散射 光散射
分析仪 ADVIA120
技术 流式细胞技 术 CoulterLH700 VCS SysmexXE 流式细胞技 2100 术
RET 形状 球形化 球形化 原形
分群 3 类/IFR IFR 3 类/IFR
主要参数 MCVr,CHr,CHCr, 其他 MSRV RET-Y
ADVIA120测定原理
ADVIA120网织红细胞测定原理
当一定体积分散的细胞经网织红细胞 反应池后,产生低角度(2°-3°)和高角度 (5°-15°)两组散射光,每个细胞产生的吸 收量可被测量.低角度和高角度光散射信号 分别代表了细胞体积(Y轴)和血红蛋白浓度 (X轴),光吸收量和网织红细胞RNA含量成比 例.和成熟RBC相比,网织红细胞吸收了更多 的光量.
网织细胞分布图
ADVIA120的主要网 织 细 胞参数
#Retic, %Retic CHr(平均网织红细胞血红蛋白量) CHCMr(平均网织红细胞血红蛋白浓度) MCVr(平均网织红细胞体积) L Retic(%,#);M Retic(%,#);H Retic(%,#) →低,中,高吸光强度的网织红细胞. IRF-H,IRF-M+H→不成熟的网织红细胞.
其他主要仪器的参数
MFI（平均荧光指数） RET-Y（Sysmex XE2100） RPI （网织红细胞生成指数）=ret%/ret 成熟天数 患者HCT/0.45→这一指标显 示出骨髓对贫血的反应,RPI?2表示出骨髓 对贫血反应低下或无反应. RMI(网织红细胞成熟指 数)=(MFR+HFR)/LFRx100
网 织 红 细 胞的 临 床 意 义
①网织红细胞对贫血的适当反应:贫血的 恢复依赖的是加速造血,而这是通过骨髓 释放EPO完成的.(最大速度6~8倍).通过 网织红细胞计数可以最原本反应出贫血 是由于RBC生成减少或外周血的减少.网 织红细胞正常绝对值是25~75 109/L.而 任何大于100 109/L都可被看成是骨髓 对贫血正常的反应.
有无溶血性贫血的可能:胆红素增高程度,红 细胞的直接破坏和Hb排泄的增加方面的实 验参数是我们应当考虑的. ②低值网织红细胞和贫血的关系,并且依据 RBC进行分类.低值的网织红细胞主要和正 常造血减弱有关,这归结于两类原因:一种 是红系原始细胞减少(再生障碍),另一种是 红系增生,但由于系无效造血,产生的大量 无法生存的RBC不能进入到血循环.依据 RBC的MCV, MCH,MCHC可进行
分类.比如:小细胞贫血:缺铁性贫血,地中海 贫血,HbE综合症. 大细胞贫血:巨幼细胞性贫血 正常细胞贫血(最多):类风湿关节炎,慢 性病,肾病,和获得性红系再障等. ③骨髓移植(BMT):Ret(21d)→HFR →MFR+HFR(13.31d,WBC14.8d) ④MDS:MFR暗示RBC规律性恢复的开始.
⑤放疗和化疗:可获得细胞毒,副作用或贫血 治疗后的信息. HGB↓→EPO↑ →促使干细胞分化 →HFR释放早于Ret总数.是骨髓受抑制和 恢复的敏感指标. ⑥对于贫血的起因有多种分类法,但有两 种分类方法是被广泛使用的,一种是以形 态学为主,另一种是Kinetic的基于血液形 成和破坏的分类法.在许多难以诊断的
病例中,二者兼用.在他的分类中网织红细 胞担任重要角色.认为正常人平均RPI为1, 当RPI≥3时表示红细胞生成增加,而RPI?2 时为生成降低.在RPI2?3这一区间Kinetic 法则还无法确定.
网织红细胞的研究进展
无论是流式细胞技术还是新型的网织细 胞仪,由于计数方法的改进,简单的标本 采集,和大批量的标本分析,它已经向我 们提供了一种快速,廉价,简单和精确度, 快速, 快速 廉价,简单和精确度, 准确度较高的实验方法.人们已经从单纯 准确度 地依据Ret数目,发展到依据其分类及细 胞内部含量(如CHr等)研究疾病的过程.
研究一:IRF在估计有效造血在贫血病理过 在估计有效造血在贫血病理过 研究一 程中的作用
132 26 19 ARC(82×109) ≥ ≥ IRF(0.23) ≥ ≤ RPI(2) ≥(9/27) ≥ (16/19) ≤ 临床病例 镰形贫血危象 临床意义 骨髓造血 增强 甲低,结节病,厌食症造成的营养 对贫血反 不良,神经性梅毒 应低下或 无反应 红细胞生成力降低,慢性肾功能 对贫血反 不全, 厌食症, 应低下或 无反应 贫血:急性感染,缺铁性贫血,HIV 有待研究 感染, 镰形贫血危象,怀孕,MDS 贫血起因
研究二研究二 CHr在诊断 缺铁性贫血中的意义 在诊断 单纯的血清铁不能完全诊断缺铁,因为在急 性反应期它往往是升高或正常.而CHr更直观 地反应了细胞状况,它只有在胞膜和胞浆丢 失时才发生改变.实验结果显示CHr对照组对 于炎症性贫血和非炎症性贫血的患者都有显 著差异(P≤ 0.001).ROC曲线也显示出在诊 断缺铁性贫血方面.CHr的敏感度和特异性都 较好于MCV和血清铁指标.
研究三:网织细胞和贫血的诊断 研究三 网织细胞和贫血的诊断 ?网织细胞的成熟指数在鉴别诊断大细胞 贫血中的应用 这项研究的目的是用网织细胞的参数来 鉴别大细胞贫血.网织细胞参数主要 是:IRF,MRV,MFI(平均荧光指数). 我们知 道大细胞贫血通常从病理过程上可以分 成两类:①由于脂类沉积在细胞膜上引起,
主要指肝病(NMMA). ②由于无效造血,包 括MDS和叶酸和VitB12缺乏的MA. 主要实验结果如下:
Normal (30) ARC( 10 /L) IFR(%) MRV(fl) MFI
MA(10) 47.1±9.7 19±2.5 130.6±6.1 /
NMMA(30) 83.5±7.6 9.1±0.8 118.3±1.5 12.9±0.6
MDS(35) 69.5±6.5 22.5±1.4 127.3±1.6 20.5±0.8
55.8±3.0 4.5±0.4 106.9±1 10.5±0.3
为了区别MDS和其他类型的大细胞贫血 他计算出90%的可信区间,并把 IRF≤16%,MRV≤129fl,MFI≤18定为0.
得 分 (IRF+MFI+MRV) 0 1 2 3 MDS(患者例数和 %) 6(17.1) 2(5.7) 13(37.1) 14(40) 非巨幼细胞性大细胞贫 血(患者例数和%) 24(80) 5(16.6) 1(3.3) 0(0)
由肝病引起的大细胞贫血是因为脂类异 常代谢,在临床上和MDS较难区别.虽然 MDS最终要依靠骨髓和细胞基因的检查. 网织细胞的检查的确提供了十分有效的 鉴别诊断依据.尤其对于那些在外周血检 察中缺乏明显发育不良特征的低危险度 的MDS.这一发现①辅助骨髓穿刺检查. ①辅助骨髓穿刺检查. 利于不同实验室之间的标准化. ②利于不同实验室之间的标准化.
?网织红细胞不成熟部分指数在MDS患者 中的升高. 这篇文章的作者把220例正常人和70例 MDS患者比较,发现 HFR(P&0.01),r=(HFR+MFR)/LFR(0.25% vs 0.15,P&0.001). MDS通常被认为是一 类骨髓中红系受到破坏的慢性非再生性 大细胞贫血.一方面由于”幼稚”的网织
红细胞生存期延长,另一方面是网织红细 胞的凋亡造成了正常或低值的网织红细 胞计数.此时加强造血产生的分类左移的 网织红细胞会导致HFR HFR的增加,从而导致 HFR 网织红细胞绝对计数略增,被自动分析仪 识别.这对 MDS诊断有重要意义.
研究四:网织细胞和地中海贫血 研究四 网织细胞和地中海贫血 用CHr和sTfR来反映铁充足状态下杂合型 β地中海贫血患者红系骨髓活力和血红蛋 白合成,及其与基因型和ＨｂＡ２的相关 性. β地中海贫血主要可以分为βsilent, β0, β+. 以往由于技术的局限直接检测肽链合成 用以确定基因类型,结果会不稳定.
.. 用Bayer-ADVIA120.结果显示sTfR与 HbA2和HbF有正相关,而CHr和HbA2有负 相关(r=-0.790,P&0.00001).也证实了基 因的突变程度和血红蛋白合成间的关 系．从而表明了ＣＨｒ在确定不同类型β 地中海贫血的严重度方面的作用．
βsilent Hb(g/L) Retic(%) CHr(pg) HbA2 135±11 ± 1.2±0.4 ± 29.6±1.6 ± 3.4±0.5 ±
β+ 122±12 ± 1.2±0.5 ± 22.5±1.4 ± 4.9±0.6 ±
β0 112±8 ± 1.7±0.7 ± 21.4±1.6 ± 5.4±0.4 ±
正常组 正常组 141±10 ± 1.1±0.3 ± 30.2±0.9 ± &3.5
第一篇:红细胞的作用《
免 疫学杂 志 》
红 细胞 免疫及 其 调 节 功 能 测定 方法
峰 ( 第 二 军 医 大 学长 海 医 院 免 疫 室
红 细胞 免 疫 是 一 新 的 研 究 领域 至今
加待 测 R B C 使用 液 0
第 一 管再 加 补
第二 管 再
我 室 已 建立 了 1 种红 细胞 免 疫 及 其 调 0
体 致 敏酵 母 多糖 使 用 液 O 0 加 酵母 多 糖 使 用 液 0 0 7
节 功 能 测 定方 法
测 定 红 细 胞膜 C b 受 体 活
都摇 匀 放 3 ℃ 7 加 生理
性 与 粘 附 免 疫 复 合 物 含量 的 红 细 胞 C b 受 休 红 细 胞 免 疫 复合 物 花环
取 出用 手 腕轻 轻 摇 匀
混 匀 后 再 加0
红 细 胞混 合
5 2 % 戊二 醛 0 0 5
测 定 血 清 中 红 细 胞 免 疫 粘附 抑 制 因 子
m l轻 轻 混 匀 ;
3 量 水平 涂 片
和 促 进 因 子 的 红 细 胞 C 。b 受 体 花 环 抑 制 试 验 和 促进 试验 测 定 红 细 胞 促粒 细胞 吞 噬 功能
加 少 许 瑞 氏液
再 加 瑞 氏 缓 冲液
用 盐 水 或 自来 水 少 许 冲 洗
的 红 细 胞 促 吞 噬 酵母菌 的 形 态 学 方 法
盐水 后高 倍 显 微 镜 计 数
一 个 红 细 胞结 上
红 细 胞免 疫 粘 附 肿 瘤 细 胞 能 力 及促 进淋 巴 细
个 或 以 上 酵 母 菌为 一 朵 花 环 算 出百 分 率
计 数20 个
粒 细 胞 免 疫 粘 附 肿 瘤 细胞 能力 的肿 瘤 红
。第 一 管 为 R BC C b 受
细 胞花 环 试 验
肿 瘤 红 细 胞 淋 巴 细 胞 混 合花
休 花 环率
第 二 管 为 R B C IC 花 环 率
注 意事 项
环 试 验 , 肿 瘤 红 细 胞 粒 细 胞 混 合 花环 试验 并 对C
( 1 ) 计 细 胞 要准 确
试 验 进行 了 改 良
建立 了 单 克
R B C 与 酵 母菌 比 例 要 适 合 ;
( 2 ) 酵 母菌 要
为 我 国 红 细 胞 免疫 及
分散 不 能 自凝 盖
要 充 分 吹打 分 散
水浴 时 加
其 调 节 功 能 的 研 究 提 供 了 简 便 有 效 的 手段
避 免 水进 入 R B C 破 坏 ,
( 3 ) 戊 二醛 加
有 些 方 法 已 在 国 内广 泛 使 用 立
有 些 方法 刚 建
入 前 后 都 应轻 轻 混 匀
( 4 ) 涂 片要 均 匀
避免 假 花 环 出 现 ;
还 需推 广验 证
高 倍镜 下 一个 视 野
( 5 ) 各 自实 验 室
红 细 胞 C b 受 休花 环 及 免 疫 复合 物
中大 约 7 ~
个R B C 为 妥
要建 立 自 己 的 正 常 值
红 细 胞 (R B C ) C s 受 体 花 b
作 为 R B C 免 疫 粘 附 功 能 的指
R B C 膜 上 C b 受 体 可 与 C b 致 敏酵 母 多
二项 都 低 下判 为 原 发 性 红 细胞 免 疫 功 能
糖粘 附 形 成 花环
糖 粘 附 形 成 花环
R B C 免疫 复 合 物 ( C ) 花 I
。为 R BC 膜C b 受 体 受 到 破 坏 和 影 响 所
R B C 膜 粘 附 的I C
b 分 子 可 与酵 母 多
, 。如果 R B C C b 受 体 花 环降 低 ,
IC 花环率 高
为 继 发 性 红 细 胞免 疫 功 能 低
预备 试 验
是 C IC 增 加
R B C 粘 附 I暇过
(肝 素 抗 凝 ) 悬 液 (指 血
静 脉血 均
(每 次 2 0 0 0
两 项 试验 可 为 临床 上 做为 免 疫 性 疾 病 预 后 疗
可 ) 经 生 理盐 水 洗 涤 离 心
效 指 标 使 用 ; 可 做为 器 官 移 植
疾病 发病 机
~ 5 m i 。) 按 红 细 胞 计数 方 法配
m l使 用 液备 用 ; ( 2 )
理 与 药 物 筛 选 红 细 胞免 疫 指 标 使 用 , 可 作为
补体 致 敏
中医 中药免 疫 学 研 究 指 标 使 用
酵 母 多糖 冻 干 试 剂 (我 室 商 品供 应 ) 按 说 明 书 要 求 溶解
红 细 胞 S P A 混 合 花 环 试脸 “
用 生 理盐 水 洗涤 离 心 1 次 (水
葡萄球 菌 A 蛋 白 ( PA ) 能 S
按 R B C 计数 法 计 数 配 成
, c 与 红 细 胞膜 粘 附 IC 中Ig G F 段 相 结 合
m l使 用 液 备 用
正 式试 验
取 两 试管
C 。b 致敏 酵 母菌 能 与红 细 胞 膜 上 未 粘 附 IC 的
C b 受 体 相结 合
各 自形 成 花环
用 抗 人 Ig G
抗 Ig A 的 单 克 隆
在 试 管 内加 入 洗 过 3 次待
试 验 可 提 高 敏感 度
测 红 细 胞 液 (1
出 红 细 胞 膜 上 Ig G 型
红细胞 抗体
Ig A 型 I 及抗 C
体 致 敏 酵 母 菌 悬 液 (1
0 5 m l混 合
水 浴 3 om
o 5 m l S PA
预 备试 验 :
鼠 抗 人 Ig G 单
液 (洗 过 一 次 后 按 红 细 胞 计 数 法
克 隆 抗 体 (上 海 生 物 制 品研 究所 生 产 )
价为 血 凝 效 价 1 0
C 混 匀3 7 o
n 水 浴3 0 m i
取 出水 平 个
双 扩散 效价 为 l ,
瑞 氏染 色
油 镜观 察
用 含 双 抗 (青
链 霉 素浓 度 2
5 万单 位 16
以 上 酵 母 菌 为 R B C C b 受 体花 环 ( 酵 母 菌
) / m l 生 理 盐 水将单 克 隆 抗 体 配 成 l
0 结 上 1 个 以 上 S PA 菌 体 为 R BC I C
浓 度 使 用 ; 待 测肝 素 抗 凝 血 用 菲 可 分 离 液 分
花 环 ( PA 菌 体 花环 ) S
结 上 1 个S P A 菌体 0
离 红细胞 经 生理盐 水洗 涤
m l备 用 。
个酵 母菌 以 上为 混 合 花 环
未接 上S P A
正 式试 验
( 1 ) 常规
菌 体 与酵 母 菌 为 裸 体 红 细 胞
计数 2 0 R B C
在 康 氏 管 中加 入 0 l m l红 细 胞 悬 液 和 0 1 单 克 隆 抗 体 使用 液
然 后 取 出混 匀
算 出 各 自花 环 率
R B C为 红色
酵母 菌 为 兰
g m l鼠抗人 I G
混 匀后 放
S PA 菌 体为 小 的 浅 兰 色
7 3 ℃水浴 Z
用 毛 细 滴管
注 意事 项
基 本 同R B C C b 受 体 花
滴 放玻 片 上
低 倍 镜 下 观 察 红 细胞 凝 集
另 需 注 意 的 是 染色 要 适 当
不能 太 深 ;
( 2 ) 微量 法
在 微量 细 胞 培 养 皿
同时 注 意 区 别 红 细 胞 棘 突 变型 与 S P A 菌 体 的
区 别 (如 SL E 患 者 有棘状 红 细 胞 出现 )
) 3 标 S P A 或 SP A 纯 蛋 白 可 代替 S P A 菌 体 (
(或 血 凝 稀 释 板 ) 上 操 作
红 细 胞悬 液
滴 鼠 抗 人 Ig G 单 克隆抗 将 培 养皿 放 入
以 震 荡 充 分 混 匀约 5 m il
基 本 同R B C C b 受 体 花 环
搪瓷 皿 内3 ℃ 孵 育过 夜 7
头 吸 管 轻轻 混 匀
2 然 后 取 出 用 1 号针
与 R B C IC 花 环
但 该 试 验 同 时显 示 四 种 免
取滴 悬 液 放 玻 片 上
疫 功 能 状 态 不 同 的红 细 胞
R B C 分 为 四 种亚 群
按 程度 不 同
镜 下 观 察血 细胞 凝 集程 度 加 红 细 胞 作 为对 照
同 时 用 生 理盐水
S PA 菌体 花 环为 已全 被
结 果 判 断标 准
C I 或 抗 R B C 抗 体 粘 附 的 红 细 胞 亚群
低倍 镜 下 多观 察 几 个 视 野 按 如 下 标 准 判 断
( 1 ) 红 细 胞 全 部散 在 为 阴 性 ;
花 环 为 未 粘 附 IC 或 抗 R B C 抗 体 的 红 细 胞 亚
群 , 混 合 花环为 部 分 粘 附 IC 或 少 许有 抗R BC
个 红 细胞 凝 集 &
% 为 阳 性 可 凝 (土 )
3 并C b 受 体有 空 位 的 红 细 胞 亚 群 , 裸
( 3 ) 红 胞 细为 小 块 凝 集 约 占2 % 判为 6 ( 4 ) 红 细 胞 为 中小 块 凝 集 约
红 细 胞 为 未 粘 附 IC 或抗体 亚群
并且 C b 受 体 活
占5 % 判 为 0
性低 (不能 粘 附 补 体 致 敏 酵 母 菌 ) 的 红 细 胞
此 实 验 做 为 科 研 方 法深 入 研究 各 种 免
红 细 胞为 中 小 块凝 集 约 占7 % 判 5
( 6 ) 红 细 胞为 较 大 凝 块 约 占1 0 % 0
疫 性 疾 病 的免 疫学发 病 机 理 更 有 价 值
验 的成 功也 证 明红 细 胞按 免 疫 功 能 状 况 不
注 意 事项
( 1 ) 购 入 单克 隆 抗体
可 分为 亚群
试 验 使用 可
要 注 意效价
保 存方 法
避 免 抗体 活
能 更 有 价 值 在 资 料 不 断 积 累 过 程 中会 进 一 步 并拓 该 试 验 的 实 用 价 值 对 自身免 疫 溶 血
性 下 降, 起 假 凝 集,
( 2 ) 红 细 胞要 洗 尽
避 免 自凝 ;
( 3 ) 要 加双 抗
避免 夏天 反 应 液 长 菌
性贫 血 发病 机理 新 的 解 释 会 进 一 步 深 化
( 4 ) 单 克 隆抗 体为 腹 水 来源
单克 隆 筑休 c
‘ m b ‘s 试脸 ( )
应用 纯 品
避 免 嗜 异 性抗 体 引 起假性 凝 集
红 细 胞膜 C b 受 体 能免疫 粘
涂 片要 薄
便 于 判 断 凝 集程 度
Ig A 型 单抗 C o o m b 产 s 试 验 做 法 类 同
比 通 用 C 。。m b
b受 体 花环抑 制 率 (R FIR )
试 验敏 感
同时做 单 抗 直 接 法 与间接 法 C
验 都 阳 性 为 抗 R BC 抗 体
试验 可 两 种试
8 5 ℃ 灭 活 血 清 组 花环 玺 二鱼鱼鲤壑具 胚主 笙 丽 万灰居 而清 组 花 环 率
鉴 别是 R B C 膜 上 IC 还 是抗 R BC 抗 体
注 意 事项
基 本 同红 细 胞 C b 受 体
只 是直 接 法 阳 性
花 环试 验 8 5 ℃)
另对 血 清 灭 活 温 度 的 控 制 (保持
则 可 能 是 红 细胞 膜 上 IC 引 起 洲 定沙
作 用 时 间 (固 定 半 小 时 ) 很 重 要
血 清 中红细 胞免 咬润 节 因 子 活性 的
原理 血 清 中存 在促 进 与 抑 制 红 细
正 常 O 人 型 红 细 胞 要肝 素 抗 凝 新 鲜 血
研 究 组 与 实 验组 标 本 同批 化 验 致敏 酵 母 菌
用 同批 补 体
5 胞 免 疫 功 能 的 两种 物 质 (
n i 不被 灭
为 红 细 胞免 疫 自身 调控 机 理
后 者 不 耐 热 (5 ℃ 3 8 0
灭 活) 而设
研 究提 供 简 便 有 效 的手 段 ; 对药 物 作 用 免 疫
。计 红 细 胞 C b 受 体花 环促 进 与抑 制 试 验
学 机理 及 发 病 机 理 研 究都有 其 价 值
该 两 种 方 法可 同 时 操 作
红 细 胞增 强 白 细 胞 吞 噬 作 用 的简 易
三 支 试管
二 支 试 管 加 入 待 涎新 鲜 血
第一 管 放 5 ℃ 水 浴 3 8 0 第 三 支管加 入 O
红 细 胞 通过 补 体 受 体 粘 附 补
二 管放 室 温
O7 m l 生 5
体 抗 原 结合 体 (如 补 体 致 敏酵 母 多糖 )
强 吞 噬 细胞 膜 补 体 受 体 的免 疫 粘 附
水 , 然 后 每 管再 加 入 洗 过 红 细 胞 悬 液 (1 液 (l
s o t in n
次 的正 常 人 O 型
细 胞 膜 S O D 酶 抗吞 噬 过 程 中产 生 的 过 氧化 阴
放 3 ℃ 水 浴3 m 7 0 i
再 加 补 体 致 敏酵 母菌 悬
离 子的 毒 性 作 用
保 护吞 噬 细 胞 膜 不 受 破
, l) 0 0 5 m l混 匀
C 放 3 7 o 水浴
增 强吞 噬作 用
滴 生 理盐 水 混 匀
预 备 试 验 待 测 肝 素抗 凝
戊 二醛 混匀
从 各 管 中取 出 约 1 / 3 细
血 经 菲 可 分 离液 水 平 离 心
取红 细胞 表层 粒
胞 悬液 水 平涂 片 瑞 氏液 染 色 色
加 甲醇 固 定 后
细 胞 至 另 一 试 管 内 加蒸 馏 水
红 细胞 呈 红 色
酵 母菌 呈兰
放 冰水 中
。, 轻轻 吹打 l m i
血 清 灭 活管 涂 片 高 倍 镜下 计 数 二 种花 环
氯 化钠 溶 液 中 和
红 细胞 破 坏 后
取出 按 红
一 种 是 红 细胞 结 上
个 或 以 上 酵母 菌
细 胞 计数 法 配 成 s
1 o。/ m l悬
为 一 朵 花环 (计 算 促 进 率 使用 )
一 种是 结
取 二试 管
第 一 管 加 红 细 胞 悬 液 (洗 过
上 3 个或 以 上 酵母 菌 为 一 朵 花 环 (计 算 抑 制
和 补体 致 敏 酵 母 菌
血 清 未 灭 活 管 涂 片 高 倍 镜 计数
悬 液 (浓 度 l
红 细 胞 结 上 3 个或 以 上 酵 母 菌为 一 朵 花 环
(计 算 抑 制 率 使 用 )
试管 加 补 体 致 敏 酵 母 菌 悬 液 和 生 理 盐 水 各 混 匀 放 3 7 ℃ 水浴
生 理 盐水 管 涂 片 高 倍
i s m il :
镜 计 算红 细 胞 结 上
个 或 以 上 酵母 菌 为 一 朵
别 加 o 0 m l粒 细 胞 (PM N ) 悬 液 5
l 7 3 ℃ 水浴 2 m i 0
每管 涂 片都计 数2 0 个红 细 胞
取 出后 加 o 0 5
取 适量 涂片
算出 花 环 率
按不 同公 式求 出促 进
二 醛 轻 轻混 匀
用瑞 氏姬 姆 萨
率 与抑 制 率
以 此 标 准 代 表 血 清 中红 细 胞 免
, 高 倍 镜 下 计数 2 0 个 PM N
疫 促进 因 子和 红 细胞 免 疫 抑 制 因 子活 性
R B C C 3 b 受体 花 环促 进率 = ( R FE R )
以 上 酵 母菌 的 PM N 所 占 百分 比 (吞 噬 率 ) 按
下 列 公 式 计 算:
吞 噬增 强率 ( % )
℃ 灭 活 血 清 组 花 环率
生理 盐 水组花 环率 生理 盐 水组花 环率
加 红细 胞 P M N 蚕噬叁二对皿鱼里坦丝逃连 对照 组 P M N 吞噬串
注 意 事项
( 1 ) 粒 细胞 提 取
再 加 正 常人 O 型 红 细胞 悬液
馏 水破 坏 R B C 时 应 在 冰 水 中 进 行
3 7 ℃ 水 浴 3 o m in
取 出按 上 法
避 免P M N
失去 活 性
( 2 ) 酵 母 菌不 ( 3 ) 第 一 次孵
涂片 染 色
计 数 花环 率
(3 同 时 测 )
以 免 影 响吞噬 率
份 待 测 血 标 本 的 红 细 胞 与 血 清 中 补 体 样物 质
育时不 能 太 长
验 的 敏 感度
否 则 两管充 分 吞 噬
在 免疫 粘 附 肿 瘤 细 胞 中 的 协 同 作 用 同肿瘤 红 细胞 花 环 试 验 腹 水 癌悬 液 各 o
, ( 4 ) 染 色不 能太 深
取 待 测 血 清 加 艾氏
, ℃ 水 浴 3 o m i。,
噬 现 象不 易 观 察
( 5 ) 涂 片 不 能太 厚
i m l混 匀 , 3 7
则不 易 鉴 别
加生 理 盐 水
此 方 法 简便 易 行
洗涤水 平 离心 一 次
倒尽 上 清
可 在 临床
再加 同 一 份 标本 的待 测红细 胞悬 液 0 0 5
, , 混 匀3 了℃ 水 浴 3 o m 初
红 细 胞 免 疫学 研 究 及 基 础 理 论 研 究 上 使 用
然后 按 同 样方 法
探讨 红 细胞 与 吞 噬 细 胞 之 间的 关 系
涂片 染色 计 数
临床 上 最 常 用 的是 协 同 肿 瘤
基 本 同 红 细 胞 C 。b 受体
用 于 药物免 疫 学 机 理 与 免疫 性 疾 病
红 细 胞 花 环 试 验 (统 称 肿瘤 红 细 胞 花 环 )
注 意 事项
机 理研 究
很 有参 考价 值
红 细 胞 免 疫粘附 肿油 细 胞 能 力 的 侧
另 外 癌细胞 要 新 鲜 或 冻 干 制 品
癌 细 胞 不能 混 有 自己 的 红 细 胞
否 则干扰 花
肿瘤 细 胞 可 旁 路 激 活 粘 附 补
红 细 胞 与血 清 都 要 新 鲜
癌 细 胞种
可 与红 细 胞 C b 受 体 结合
红 细胞 还 可
类不 限 方便
但 常规 法勒 细 胞使 用 艾 氏 腹 水 癌 较 意义
识 别 抗 原 与肿 瘤细 胞 粘 附
攻 击癌 细 胞
我 室 有 商 品供 应
形 成花环 状
为 肿瘤 红 细 胞 免 疫 研 究提 供
预 备试 验
靶细胞 用 艾 氏
了 一 个简 便 的 基 本 方 法
各 种肿 瘤 红 细 胞花
腹 水 癌 细 胞 经 生 理 盐 水 洗 涤 离 心 1 次配 成
环 的 配 合 应 用 为 研 究 肿 瘤 病 人 红 细 胞 与 血清 中补 休 样 物质 在 共 同 围 攻 癌 细 胞能 力的变化
规律 及 机 理 提供 了 有 力 的 手 段
/ 川 使用 液
根据 研 究 目
1 ( ) 单 测 定红
的 的不 同 环
有 三种 测定方 法
为 广 泛开 展
细胞 免 疫 粘附 活 性
直 向 肿瘤 红 细 胞 花
肿 瘤红 细 胞 免 疫 研 究 奠 定 了 基 础 附肿 抽 细 胞 能力 的 浦 定 方 法 (
用 正 常 人 新 鲜 血 清 (或 新 鲜 豚 鼠 血
红 细 胞 促 淋 巴 细 胞 与 粒 细 胞 免 疫粘
0 1 毫升 加 艾 氏 腹 水 癌使 用 液 0
n 7 3 ℃ 水 浴3 0 m i
用 生理盐 水 加 满 洗 涤 水 平 离
i n ) s m in 10
红 细 胞 膜 C 。b 受体 可 免 疫 粘
心 (2 o 0 0 r p m / m
后 加待 测 红 细 胞悬
附补 体 致 敏 的 癌细 胞 而 且 有 补 体 受 体 的 N K
水 浴3 0 再加 色
等淋 巴 细 胞 及 粒细 胞 也 可 免 疫 粘 附 到补 体 致
敏癌 细 胞 上
, 取 出加 。l m l生 理 盐 水 混 匀后
红 细 胞 通 过 补体 的 桥 梁作 用 及
5 0 m l混匀
水 平 涂片
S O D 酶 的作 用
以 及 红 细胞 对癌 细 胞 抗 原 信
瑞 氏染 色
一 朵 花环
肿 瘤细 胞 呈 兰 色
红细胞呈红
息传 递 作 用 能 调 节 与 增 强淋 巴 细 胞 与粒 细 胞
一 个 肿瘤 细 胞 结 上 3 个红 细 胞 或 以 上 为
对 癌细 胞 的 免 疫 粘 附 围歼 作 用
计 数 1 0 个癌 细 胞
算 出花环 率
预 备试 验
用 菲 可 分 离液 分
2 ( ) 单 测 血 清 中 补 体 样 物 质 对 红 细 胞免 疫
离淋 巴 细 胞 与粒 细 胞 (粒 细 胞 用 蒸馏 水 破 坏
粘 附肿 瘤 细 胞 的 增 强 作 用 胞花环 试 验
促肿 瘤 红 细
方法 同 红 细胞 增 强 P M N 吞 噬 形 态
艾氏 腹 水 癌 细 胞 使 用 液 0
学 法) 各用 H
k s 液 分 别配 成 1
m l 0 l m l 测 新 鲜血 清 加 待 m i
7 3 ℃ 水 浴3 0
红细胞 洗 涤 离心
次 后 配成
再 加生 理 盐 水 洗 涤 一 次
倒 尽上 清 液
/ m l 艾 氏 腹水 窟 细胞 经 生 理 盐水 氏
涤离 心 l 次后
枷 等体 积 的
率 + 忡 瘤 红细 胞拉细 胞花 环 率
新 鲜人 血 清 混 匀 3 ℃ 水 浴 3 m 过 取 出 用 生 理 7 0 盐 水 洗涤 水 平 离 心 l 次 理 盐 水配 成 1
注 意事 项
同肿 瘤 红 细 胞 花 环 试 特别 注 意 染色 技 巧
倒尽 上 清 液
该 两 种 试验
正 式试 验
胞 呈红 色
癌 细 胞 呈 紫 红色 意义
淋 巴细 胞 呈深
(1 ) 肿 瘤 红细 胞 淋 巴 细 胞 混合 花 环 试 验 :
粒细 胞 呈 浅 兰 色
实验 管 与对 照 管
前管 加 。o 2 5 m l红 细 胞 悬
为 肿 瘤 红 细 胞免 疫 学 以 及 血
液 和 0 0 m l 清致 敏 癌细 胞 悬 液 5 血
后 管加 然后
液免 疫学 的 基 础 理 论 与 临 床 应 用
以 及 红细
5 m l 理 盐水 和 。生
5 n 0 I l血 清 致 敏 癌 细 胞
淋 巴 细胞
粒 细 胞 在抗 癌 免 疫 反 应 中 互
, 两 管 都 混 匀放 3 ℃ 水浴 3 m 加 7 0
相 关系 之 研 究
提 供 了有 效 手 段
我们 初 步
两 管 分 别 加 淋 巴 细 胞 悬 液 0 0 m l混匀 放 3 ℃ . 5 7
资料 显 示 红 细胞 在 围歼 癌 细 胞免 疫反 应 中不
仅 有 调 节 增 强 其 它 免疫 细胞 的 作 用
第 二 天取 出 混
而且 占 在 较晚
匀加 0 2 % 戊 二 醛 o 5
混匀 分 别 涂 片
我 们 发现在 荷 瘤小 鼠 腹 水 中
瑞 氏染 色 高倍 镜 下 各计 数 1 0 个癌 细 胞
期 血 性 腹 水 中 也 观 察 到红 细 胞 与 淋 巴 细 胞 围 攻 癌 细胞 的
个 瘩 细 胞 结上
红 细 胞 花环
个 红 细胞 或 以 上 为 一 朵 肿 瘤
卫 星观 察
5 2 例试 验
6 9 士 10 0 8
个或 以 上 淋 巴 细 胞 为 一
组 肿 瘤 淋 巴 细 胞 花 环率 1 3
朵 肿瘤 淋 巴 细 胞花 环
同 时 结上 2 个或 以 上
肿 瘤 红 细 胞 花 环 率2 9
淋 巴 细 胞 和 红 细 胞 为一 朵 肿 瘤红 细 胞淋 巴 细
红 细 胞 对淋 巴 细胞 免疫枯 附癌 细胞 促进 串
而对 照 组 肿瘤 淋 巴 细 胞 花 环 率 为 7 2 4
肿 瘤红 细 胞 花 环 率 0
差别 显 著
对 照 组淋 巴 细 胞 花环率
P& 。0 ) 1
3 5 例 试验
实验 组 肿 瘤 粒 细 胞
肿 瘤 红细 胞 花 环 率
公 式 中淋 巴 细 胞花环率
肿 瘤淋 巴 细 胞 花
花环 率2 4 6 9 士 3
22 8 士5 9
环 率 + 肿瘤 红细 胞 淋 巴 细 胞 混 合 花环串
对 照 组 肿 瘤 粒 细 胞 花 环率
) 胞 混 合 花 环 (2 肿 瘤 红 细 胞 粒 细 胞 混 合 花环
率 分 实 验 管 与 对 照 管 前管 加 O O2 m l红 细 5
33 士 2 3 0%
差 别 显 著 (P&
目 前 国外 学 者对 红 细 胞 免疫 调 控 其 它免
胞 悬液 和o 0 5
m l 清 致 敏瘤 细 胞 悬 液 血
疫 活 性 细 胞 的研 究工 作 正 在 兴 起 验 资料 证 实红 细胞 参 与不 于 扰 素
有 许 多实
白 细胞 介
加 。o 2 m l 理 盐 水和 。0 5 生 5
m l血 清 致
胞 悬 液 两 管 都 混 匀 放3 ℃ 水 浴 3 7 0
白细 胞 介 素 2
免 疫 球蛋 白 等产生 的
两 管 分 别 加 粒 细胞 悬 液 o 0 t l 混 匀 放 3 ℃ 5 n 7
n 水浴3 Om i
并能 促 进 T
B 淋 巴细 胞 转 化
取 出按 肿 瘤红 细 胞 淋 巴 细 胞 混
A D C C细 胞
L A K 细 胞 活 力有 增 强 作
合 花环 同 样 方 法 涂片 染 色
高 倍 镜下 各管 计
一 个癌 细 胞 结 上
但 这 些 研 究方 法 复 杂
需 要组 织
数 1 0 个 癌 细胞
一 个 癌 细 胞 结上 2 个 粒 细
培养 设 备 与 专 门 技 术
里 推 广应 用研 究
难 以 在我 国 广 大 医 院
胞 为 一 朵 肿 瘤粒 细 胞 花 环
细 胞 结上
我 们 发 现 的 红 细 胞 能促 进
个红 细 胞 为 一 朵 肿 瘤 红 细 胞 花环
淋 巴 细 胞 及粒 细 胞免 疫 粘 附 肿 瘤 细 胞 的现 象
个 粒 细 胞 与 2 个红 细 胞 以 上 为 一
是 与 国 外发现 的有 关 事 实是 一 致 的
朵 肿瘤 红细 胞 粒 细 胞 混合 花 环
明在 这 方 面 我们 同 国 外 是 同步 研 究 的 向
红 细 胞对 拉 细 胞免 疫粘 附肿溜 细 胞促 进串
我 们 已将 此 项 研 究 引 入 肿 瘤免 疫 调 控研 究 方 形成 了 自 己 的特 色 ( )
缨 粤黯猛碧黔鹦巡
这 些 方法 简便
更 适 合 国情 ,
对 推 动 我 国 肿瘤 红 细 胞
公 式 中拉细 胸花 环 串
肿 瘤拉 细胸花 环
免疫 调 控研 究 具有 实用价值
医 学进 行 研 究 小
走 出 中 国红 细 胞 免 疫研 究 自
己 的 新 路子
概 括 我 室 红 细 胞 免 疫及 其 调 节 功能 测 定 研 究为 三 个发 现 和 三 个 测定
三 个 发现 即 :
血 清 中 存 在 红 细 胞免 疫 粘 附 促 进 因 子的
中华 医 学杂志
上 海医 学
6 2 (1 2 ) :
红 细 胞 能 免 疫 粘 附 肿 瘤 细胞的 发
1 0 (1 2 ) 6 0 2 1 9 8 外 9 (1 ) :
红 细 胞 能 促进淋 巴 细 胞 和粒 细 胞 免 这 是 国 际 上 未见 报 红 细胞 免疫 粘 附 功
卜 免 疫 学杂 志 海
疫 粘 附 肿 瘤 细 胞 的发 现 道的
三 个 测 定即
中华 血 液 学 杂 志
能 测 定 方 法 的 建立 环
R B C C b 受体 花
上 海 免 疫学 杂 志
上 海 免 疫学 杂 志
R B C IC 花环 红 细胞 SP A 混 合 花 环 肿
‘s 。瘤 红 细 胞 花 环及 抗 Ig G 单克 隆 抗 体 C 。m b
红 细 胞 免 疫 功 能 自身 调 控 能 力
包括 血 清 中 红 细 胞 免 疫 粘 附 抑 制 因 红细 胞对 其 它免
第 二 军 医 大学 学 报
子及 促 进 因 子的 测 定 ;
8 (3 ) 2 0 7
疫 细 胞 的 免 疫 调 控 能 力 的测 定
细 胞淋 巴 细 胞 混 合 花环 混 合 花环
中 西 医 结合杂 志 上海免 疫 学杂 志
1 9 8 叭 9 (7 ) :
胞 促 粒细胞 吞 噬 劝 能 的 形 态 学 方 法
1 9 8 。, 9 (2 )
肿 瘤 红 细胞 粒 细 胞
以 上 试 验 多为 花 环 法
第二 军 医大 学 学 报
1 0 (6 ) :
行 便 于 推广
由 于 试验 反 应温 度都 是 s ℃ 7
故 不 易 受 气 候 条 件的 影响
比 测 定 T 淋 巴细
胞数 的E 花 环 稳 定
易 于 常规 化
19 8 8 4 8 6 6 匀 6
名 5 子 fu
l M e th o d s
1 9 8 4 7 2 1 67
本 文 介绍 的 方 法 中
还 需 通 过 实践
有 些 已 成熟
l C e l l Im m
1. 8 8 ; 1 1 6 :
不断 积累 资料加 以 完 善
望 全 国同道 共 同 努力
结 合 临床
结合 祖 国
( 19 8 0 年 7 月 19 日收稿 )
第一篇:红细胞的作用中国综合临床 2006年 12月第 22 卷第 12期
C l in ica lM ed icin e of C h ina, D ecem ber 2006 , V o.l 22 , N o. 12
表 1 2 组间血糖控制情况的比较 ( 例 , % )
组别 HbA 1 c[ 7 . 5% 组 HbA 1 c& 7 . 5% 组
例数 55 116
空腹血糖 [ 7. 0 mm ol /L 42 ( 76 . 4) 25 ( 21 . 6) & 7 . 0 mmo l/L 13( 23. 6) * 91( 78. 4) [ 3] [ 4] [ 10 . 0 mm ol /L 16 ( 29 . 1) 3( 2 . 6)
非空腹血糖 & 10. 0 mm ol /L 39( 70. 9) * 113( 97. 4)
注 2组比较 , * P & 0. 001
血糖水平 。综上所述, 快速测定的血糖水平与 H bA 1 c 之 间 存在着可预测的相关性, 明确这种相关性有助于医师 和患者根据 H bA1 c的控制目标设立每日各时段或各 点血糖控制水平。
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网织红细胞参数在再生障碍性贫血治疗中的意义
林静华 焦晓阳 蔡应木 吴映娥 李粉莲
=摘要 & 目的 探讨网织红细胞参数 在再生 障碍性 贫血患 者治疗过 程中的 变化及 其临床 意义 。方法
将 35 例患者分成 2组 治疗有效组 ( 27 例 ) 和治疗 无效组 ( 8 例 ); 测 定其治疗 前 、 后外周 血的网织 红细胞 参数 , 并对结果进行对比分析 , 同时分析 相应骨髓象 。并与正常对照组比较 。结果 ? 再生障碍性贫血组治 疗前网织红细胞参数均低于正 常对照组 , 差别有显著性意义 ( P & 0. 01); ? 治疗有效组 治疗后网 织红细胞参 数比治疗前升高 , 差别有显著性 ( P & 0 . 01), 骨髓 增生度 比治疗 前增高 ; ? 治 疗无效 组治疗 后网织红 细胞参 数 ( 网织红细胞百分数及绝对值 、 高散射光 网织红细胞百分数及绝对值和未成熟 网织红细 胞指数 ) 与治疗前 无明显差别 ( P & 0. 05), 治疗前后骨髓造血功能无明显改 变 ; ? 治疗中各参 数开始升 高时间 ( 中位 数 )网织 红细胞百分数为 11 . 4 高散射光网织红细胞百分数为 5 未成 熟网织红细胞指数 5. 6 d 。结论 网织红细 胞参数为反映骨髓造血功能较 好的指标 , 其中高散射光网织红细胞百分数 、 未成熟网织红细胞指数为更灵敏 指标 ; 网织红细胞参数测定对于再障治疗效果监测具有重要意义 。=关键词 & 再生障碍性贫血 ; 网织红细胞 ; 骨髓象 =中图分类号 & R 556 . 5 =文 献标识码 & A =文章编号 & ( 3-03
S ign ificance of re ticu locyte ind ice in treat m en t of ap lastic ane m ia. L in J inghua, J iao X iaoyang, Cai Y ingm u, et al. Clin ical Laboratory, F irs tA ff ilia ted H osp ita l , Shantou University M ed ical Co llege( Shantou 515031, China ) = Abstract & O bjective T o explo re the c lin ica l significance o f reticu locyte indices, in aplastic ane m ia( AA ). M ethods 35 cases of patients w ere div ided into tw o groupseffective group ( n = 27) and ineffec tive g roup ( n = 8). The reticu locy te indicesw ere deter m inded before and afte r treatm ent and sa m e ti m e the bone m arrow sm ears w ere analyzed. Resu lts ? T he re ticulocy te indices in AA groups were low er than those o f norma l contro l group ( P & 0. 01). ? The re ticulocy te indices after treat m ent in e ffective groups w ere h ighe r than tho se befo re treatm ent ( P & 0. 01); The increasing degree o f bone m arro w was h ighe r than tho se o f befo re treatm ent . ? T he ind ices in inef fective g roup had no t sign ifican t d ifference co m pa red to those o f before treatm ent ( P & 0 . 05). T he he m opo ietie func tion of m arrow had not s ignificantly changed . ? T he ti m e w hen each index increased was 11. 4 day to R et , 5 day to HLR and 5. 6 day to I R F respective ly . Conc lusion R e ticulocy te ind ices are the ideal ind ices reflecting the bone m arrow hemopo ietie function, o f wh ich HLR and IRF are mo re sensib le and the reticu locyte indices de ter m ina tion have i m portant sign ificance to AA treatm ent . = K ey words& A R Bone m arrow
作者单位 515031 广东省汕头市 , 汕头大学医学院附属第一医院检验科
中国综合临床 2006 年 12月第 22 卷第 12期
C lin icalM ed icine of Ch ina, D ece m ber 2006, V o.l 22 , N o. 12
再生障碍性贫血 ( 简称再障 )是以造血干细胞损 [ 1] 伤、 外周全血细胞减少为 特征的疾病 。其起病原 因不明, 病情严重且治疗效果不佳, 预后差 , 并伴发 感染及出血的危险极大。临床药物治疗时尽早得到 骨髓造血功能恢复的提示对于指导临床用药及预防 感染、 出血具有重要意义。网织红细胞是反映骨髓 造血功能的重要指标。近年 来, 随着荧光染色技术 的发展和高性能全自动血细 胞分析仪的应用, 在检 测血细胞常规参数的同时还可以检测网织红细胞及 相关参数, 这些参数, 对临床疾病的诊断、 治疗和疗 效观察有重要作用。为了观察网织红细胞参数在再 障治疗过程的价值, 我们于 2004 年 10 月至 2006 年 2 月对再障患者的网织红细胞相关参数进行动态观 察 , 以其作为 评价再障患者造血功能恢复的敏感指 [ 2] 标 。1 资料与方法 1 . 1 一般资料 再障患者 35 例 , 男 22 例, 女 13 例 ; 年龄 7~ 70岁。均经临床、 骨髓、 血液学检查并参照 [ 3] 1987年第四届全国再 障学术会 议制定的 标准 确 诊 , 按治疗效果分为治疗有效组 27 例, 治疗无效组 8 例。正常对照组 33 例为健康体检者主要脏器无症 状和异常体征; 肝功能正常; 男 19 例, 女 14 例 , 年龄 22~ 67 岁。1 . 2 仪 器、 试 剂 和质 控 物 美国 贝 克 曼 库 尔特 ( BEACKMAN COULTER LH 750) 型全自动血液分析 仪及配 套试剂 ( 美国 BEACKMAN COULTERR 公司 R 生产 ), 高、 中、 低 3 种浓度的全血质控物 ( Cou lter 5C cell contro l) 及 高、 中、 低 3 种 浓 度 的 RET 质 控物 R T M ( Coulter RET IC-C coulter) 。1 . 3 实验方法 静脉血 1~ 2 m l于 EDTA-K 2 抗凝 管中混匀, 室温存放。4 h 内严格按照仪器操作规程 完成检测, 每日质控。1 . 4 统计学方法 所有数据经 SPSS11 . 0 统计软件 处理, 结果以 x ? ? s 表示, 组内比较采用配对 t 检验, 2 组间比较采用两样本均数 t检验。2 结果 2 . 1 再障治疗前后网织红细胞参数测定结果与正 常对 照 的 比 较 各 组的网织红 细胞百分数 ( RET% )、 网织红细胞绝对值 ( RET# ) 、 高散射光网 织红细胞百分数 ( HLR% ) 、 高散射光网织红细胞绝 对值 ( HLR# ) 、 未成熟网织红细胞指数 ( IRF ) 比较, 见 表 1。2 . 2 2 组网织红细胞各参数治疗前后比较 治疗有 效组网织红细胞各参 数开始升 高的时间 RET% 为 11. 4 d ( 中位 数 ) , H LR% 为 5 d ( 中位 数 ) , IRF 为 5 . 6 d( 中位数 ) 。治 疗无效组网织红 细胞各参数在 治疗前后无明显升高趋势。2 . 3 治疗有效组和治疗无效组治疗前后骨髓检查
结果 见表 2 。3 讨论 再障是以全血细 胞减少引起的进行性贫 血、 出 血和反复发热、 感染为其主要特点 , 出血和感染为死 亡的重要原因 , 一般无肝、 脾和淋巴结肿大, 对一般 [ 4] 抗贫血治疗无 效 。骨髓全面衰竭呈增 生障碍, 有 核细胞增生明显低下或极度低下 , 淋巴细胞相对增 多, 同时伴有非造血细胞 ( 网状纤维、 组织细胞、 脂肪 [ 5] 细胞、 吞噬细胞、 浆细胞、 组织嗜碱细胞 ) 增多 ; 通 过骨髓造血功能的动态观察 , 对指导临床在不同时 期给予积极的对症和支持治疗有重要意义。本研究结果显示 , 再障治疗前骨髓造 血细胞粒 系及红、 巨核三系比例减少, 非造血细胞明显增多, 骨髓造血功能受抑制, 治 疗无效组比治疗有效组造 血功能受抑制更加明显, 治疗有效组治疗后骨髓造 血功能有进步, 这说明再 障治疗是否有效与骨髓造 血功能受抑制程度相关, 尤其与红系增生受抑程度、 非造血细胞异常增生程度密切相关 , 可见红系是反 映骨髓造血功能的重要指标。[ 6] RET 参数的变化可反映幼红细胞合成 H b , 流 式细胞术在测定 RET 的同时还可根据荧光强度将其 分为低、 中、 高 ( LFR、 MFR、 H FR ) 3 种荧光类型 , 较幼 稚的 RET 由于胞质中 RNA 较多, 有较强的荧光, 多 为 H FR 和 MFR, 较成熟的 RET 胞质中 RNA 较少 , 荧 [ 6 ~ 8] 光强度较弱, 为 LFR , 在 造血受 到刺激时 , 幼稚 RET 从骨髓释放入外周血 , MFR 和 HFR 显著增高, 而未成熟网织红细胞指数 ( I R F ) 为 H FR 和 M FR 之 和与所有 RET 的比值 , 因此 I RF 和 H FR 均可提示红 [ 8] 细胞生成的开始 。再障是由于骨髓造血功能障碍而引起的三系减 [ 9] 少的一种获得性疾病 。本研究结果显示再障组治 疗前网织红细胞参数 网织红细胞百分数及绝对值、 高散射光网织红细胞百分数及绝对值和未成熟网织 红细胞指数 ( RET% 、 RET#、 HLR% 、 HLR#和 IRF ) 同 正常对照组比较显著下降 , 提示网织红细胞参数是 反映骨髓红系统造血功能的敏感指标 ; 治疗有效组 治疗后网织红细胞参数网织红细胞百分数及绝对 值、 高散射光网织红细胞 百分数及绝对值和未成熟 网织 红细 胞 指 数 ( RET% 、 RET #、 H LR% 、 HLR# 和 IRF )与治疗前比较显著升高, 提示随着骨髓造血功 能的恢复 , 网织红细胞参数均有不同程度增加 , 结合 骨髓细胞学检查结果, 说 明再障治疗过程中网织红 细胞参数的升高是骨髓造血功能 恢复的敏感指标; 治疗无效组治 疗前后网 织红细 胞参数 均无明 显变 化, 骨髓增生 程度也 无明 显改变 , 本研 究与新 国芬 [ 10 ] 等 报道的一致; 治疗无效组治疗前网织红细胞参 数网织红细胞百分数及绝对值、 高散射光网织红细 胞百分数及绝对值和未成熟网织红细胞指数 ( RET
中国综合临床 2006年 12月第 22 卷第 12期
C l in ica lM ed icin e of C h ina, D ecem ber 2006 , V o.l 22 , N o. 12
表 1 再障治疗前后网织红细胞参数测定结果与正常对照的比较 ( ? x ? s)
组别 正常对照组 治疗有效组 治疗前 治疗后 治疗无效组 治疗前 治疗后 8
* 0. 27 ? 0 . 10 ww
例数 33 27
R ET% 1. 47 ? 0 . 45
RET# 0. 068 ? 0 . 023
HLR% 0 . 45 ? 0. 14
HLR# 0. 021 ? 0 . 007
I RF 0 . 31 ? 0. 03
* 0. 79 ? 0 . 28 # 3. 13 ? 0 . 97
0. 016 ? 0 . 010* 0. 073 ? 0 . 035#
0 . 24 ? 0. 12* 1 . 19 ? 0. 55#
0. 008 ? 0 . 004* 0. 066 ? 0 . 035#
0 . 19 ? 0. 05* 0 . 41 ? 0. 12#
0. 007 ? 0 . 004* 0. 010 ? 0 . 007n
0 . 07 ? 0. 03* 0 . 11 ? 0. 04n
0. 002 ? 0 . 001* 0. 003 ? 0 . 001n
0 . 15 ? 0. 10* 0 . 25 ? 0. 1n
0. 44 ? 0 . 18n
注 2组治疗前与正常对照组比较 ,
P & 0. 01 ; 治疗有效组内治疗前后比较 , P & 0 . 01; 2 组治疗前比较,
P & 0. 05 ,
P & 0. 01 ;
表 2 再生障碍性贫血治疗有效组和治疗无效组治疗前 后骨髓检查结果 ( x ? ? s)
组别 治疗有效组 治疗前 治疗后 治疗无效组 治疗前 治疗后 8 17. 3 20. 5 1 . 0 1 . 3 47 . 0 49 . 0 0 0 .4 [ 3] [ 4] [ 5] [ 6] [ 7] 26. 7 24. 8 6 . 0 7 . 0 2 . 2 1 . 9 重度低下 -低下 重度低下 -低下 例数 27 22. 7 43. 3 13 . 5 20 . 5 53 . 5 30 . 8 1 .1 4 .4 8. 3 1. 6 3 . 8 2 . 4 1 . 2 0 . 8 重度低下 -低下 低下 -活跃 粒系 (% ) 红系 (% ) 淋系 (% ) 巨核系 (个 ) 非造血细胞 (% ) 网状细胞 浆细胞 组织嗜碱细胞 增生度
%、 RET#、 H LR% 、 HLR# 和 I RF ) 比治疗有效组治疗前 显著下降, 说明再障治疗效果与治疗前骨髓受抑制的 程度密切相关。同时本研究结果表 2 显示 , 再障治疗 后网织红细胞百分数、 高散射光网织红细胞百分数和 未成熟网织红细胞指数 ( RER% 、 H LR% 和 IRF ) 开始 升高的时间分别为 11 . 4 d、 5 d和 5 . 5d , 高散射光网 织红细胞百分数和未成熟网织红细胞指数 ( HLR% 和 I RF ) 比网织红细胞百分数 ( RET% ) 提前 6 d 左右, 提 示治疗药物作用于骨髓红细胞系统, 刺激红系增生 , 导致幼稚网织红细胞 ( RET ) 从骨髓释放入外周血, 高 散射光网织红细胞百分数和未成熟网织红细胞指数 ( H LR% 和 IRF ) 的变化是观察再障治疗后骨髓造血 功能恢复的较敏感指标, 通过检测网织红细胞参数可 以早期观察再障患者骨髓对治疗的反应。
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