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【讨论】对MCAO模型的新认识（二）
【讨论】对MCAO模型的新认识（二）
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这个帖子发布于5年零118天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近对MCAO模型又有了些新认识，和大家分享下，同时希望大家一起来来思考脑缺血模型在脑缺血药物研发中的利弊。1.动物模型与人类脑缺血的差异之处。Human strokes are mostly small in size (Table 1). In large population studies and clinical trials, strokes range from 28–80 mm3. Using human hemisphere volumetricmeasurements,this translates to 4.5–14%
of the ipsilateral hemisphere （ Table 1).Malignant infarction comprises approximately 10% of all strokes .可以看到人类的脑缺血梗死面积%大约是占同侧大脑半球4.5%-14%，而往往我们所采用的脑缺血模型如tMCAO/pMCAO梗死面积%大多超过了30%，那么由于这种差异的存在，我们采用tMCAO/pMCAO 来筛选药物，合适吗？不合适，如何改进呢？或者说如何来减少这种评价的误差呢？
zhoujuan_sy edited on
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2.下面是Bederson评分方法。但是我们在实验中大家可能都遇到过这样的情况，tMCAO中有的大鼠没有明显的行为学症状，但是TTC染色时会发现还是存在梗死。有时行为学症状评3分，染色后梗死面积也并不是特别的大，为什么会这样呢？
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Our technique for the assessment of neurologic
function currently is limited by the 88.0% sensitivity. Three rats with areas of infarction of 9.9 ± 0.2% thatwere confined to small areas of the caudate-putamen and dorsolateral cortex (fig. 3) were graded 0. Ablation of dorsolateral frontal cortex has no effect oncircling behavior or performance in a Y maze for rats,27 which confirms that lesions in this location do not produce deficits that can be assessed readily. A more rigorous motor task such as one requiring fine digital manipulation22 might detect the missed abnormalities.这段话的意思是Bederson评分也只有88%的敏感性。当大鼠损伤的是尾状核及背外侧皮质时，行为学评分表现的是0分，这表明这个部位即使有梗死，也不能表现出行为学缺陷。我们需要更精密的仪器来评价这些缺陷。也有很多文献支持这样的观点：行为学症状与梗死面积的大小并不存在线性关系。我们在MCAO模型中一般是用梗死面积的减少来作为评判药效的标准，而在人类行为学症状的改善是观察的主要方面，那么在药物筛选中需要从哪些方面来综合评价药物的疗效呢？如果是进行行为学的评价，需要用哪种模型呢（tMCAO/pMCAO /开颅电凝法/4VO等）？
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我非常认同你提出的新认知，实验应与临床症状相对应，不是要把动物模型缺血面积做的越大越好，临床上大脑一侧30％的脑细胞死亡，人是无法生存的。线栓的结果与临床病症差异太大了。我认为行为学评分更有实际意义。另外，人为的特意再灌注加大缺血损伤到底有多大的意义？
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lixiaofeng112 人为的特意再灌注加大缺血损伤到底有多大的意义？这个问题的确让我们深思。如何让动物模型更好的反应临床，我们的动物模型如何创新，我们应该一起来关注这个问题。
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确实是值得思考的问题关注中
关于丁香园利用人工智能系统预测大面积脑梗死患者的转归--《中国卫生统计》2014年01期
利用人工智能系统预测大面积脑梗死患者的转归
【摘要】：目的大面积脑梗患者死亡的主要原因是脑疝形成,本实验的目的是建立一个有效的预测模型,对脑疝的发生进行早期预测。方法采用回顾性调查的方法,搜集74名大面积脑梗患者(19名患者发生脑疝)的临床、生化、影像学指标44项。利用单因素判别分析建立单因素模型,利用逻辑回归(logistic recession,LR)、随机森林(random forest,RF)、人工神经网络多层感知机(multiplayer perception,MLP)建立多因素预测模型,对大面积脑梗患者的预后进行预测。用受试者工作特征曲线下面积(area under receiver operation characteristic,AUROC)评判预测模型好坏。结果在单因素模型中,以梗死最大截面面积为预测因子的模型预测效果最好,其AUROC为0.87,选择40cm2为截断点时敏感度为0.93、特异度为0.64。在多因素模型中,LR模型其敏感度为0.89、特异度为0.84、AUROC为0.89;MLP模型其敏感度为0.93、特异度为0.79、AUROC为0.88;RF模型其敏感度为0.95、特异度为0.74、AUROC为0.92。结论 RF模型效果优于其他模型,可用作医学辅助诊断系统来预测脑疝在大面积脑梗患者的发生。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R743.3【正文快照】：
大面积脑梗死是一种常见且非常严重的神经内科疾病,其发病人数约占所有脑梗患者的10%左右。它的病死率极高,大约为80%[1-4]。目前,大量的研究表明在患者症状发生恶化前进行积极的外科干预效果比后期干预更好[5-6]。于是在早期对患者预后进行有效的判断从而选择有效的治疗方案
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重组人促红细胞生成素对急性脑缺血大鼠脑梗死体积及Nrf2、HO-1表达的影响
&&&&&&本期共收录文章20篇
　　摘要：目的 研究重组人促红细胞生成素（rhEPO）对急性脑缺血大鼠脑组织中核因子E2相关性因子2（Nrf2）及血红素加氧酶（HO1）表达的影响，探讨rhEPO的抗氧化作用机制。方法 随机将36只雄性SD大鼠分为假手术组、缺血组和rhEPO治疗组。采用线栓法制作大鼠永久性局灶性脑缺血（pMCAO）模型。rhEPO治疗组在缺血2 h后腹腔注射rhEPO 5 000 IU/kg，模型组和假手术组在等时间点给予等量的生理盐水。TTC（2，3，5氯化三苯基四氮唑)法测量脑梗死体积，免疫组化方法测定脑组织中Nrf2及HO1的表达。结果 rhEPO治疗组与缺血组相比，脑梗死体积减小，各组脑组织中Nrf2及HO1的表达量按假手术组、缺血组、rhEPO治疗组依次增高，各组间差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论 急性脑缺血后，脑组织中Keap1Nrf2/ARE抗氧化系统被激活，rhEPO可能通过激活该氧化系统而发挥脑保护作用。中国论文网 /6/view-3427448.htm　　关键词:脑缺血；重组人促红细胞生成素；E2相关性因子2；血红素加氧酶；Keap1Nrf2/ARE抗氧化系统　　中图分类号：R743 R255.2 文献标识码：A 文章编号：12）　　氧化应激在急性缺血性脑损伤中发挥了重要的作用［1］。近年来有大量研究证实，重组人促红细胞生成素（rhEPO）在缺血性脑损伤中发挥了抗氧化作用［2］，但其作用机制仍不清楚。本研究采用大鼠永久性局灶性脑缺血（pMCAO）模型，通过对缺血脑组织中脑梗死体积、核因子E2相关性因子2（Nrf2）及血红素加氧酶（HO1）表达的研究，探讨rhEPO在缺血性脑损伤的抗氧化作用机制。　　1 材料与方法　　1.1 实验动物 36只健康雄性SD大鼠（山西医科大学实验动物中心提供），体重230 g～270 g。　　1.2 药品及试剂 重组人促红素注射液（北京四环生物制药有限公司），Nrf2、HO1兔抗鼠多克隆抗体（北京博奥森生物技术有限公司，免疫组化用），PV6001二步法免疫组化检测试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司），辣根过氧化物酶标记的二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司）。　　1.3 分组 随机将36只SD大鼠分为假手术组（n=12）、缺血组（n=12）和rhEPO治疗组（n=12）。每组随机选取6只行免疫组化。　　1.4 模型制作与取材　　1.4.1 模型制作 采用改良的ZeaLonga法［3］制备pMCAO 模型。大鼠在术前24 h禁食，术前4 h禁水，10%的水合氯醛(0.35 mL/kg)腹腔注射麻醉后，仰卧位，取颈正中切口，暴露并钝性分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)。结扎ECA远端、CCA近心端，用动脉夹夹住ICA，在CCA近分叉处约5 mm处剪一“V”型小口，将预先准备好的直径约0.26 mm的蘸有石蜡的尼龙线头轻轻插入CCA，从CCA分叉处计算，插入18 mm～20 mm时稍遇阻力即可停止，并结扎CCA，逐层缝合筋膜、皮肤，建立pMCAO模型。假手术组除插入鱼线约10 mm外，其余操作与缺血组相同。rhEPO治疗组在缺血2 h时腹腔注射rhEPO 5 000 IU/kg，假手术组与缺血组则给予等量的生理盐水。参考 Zea Longa评分标准，评分为0分和4分者均剔除。缺血24 h后处死大鼠。　　1.4.2 取材 造模完成后，各组随机取6只在相应时间点心脏灌注去血后，断头取脑，经10%中性甲醛固定24 h后，取视交叉后1 mm～4 mm脑组织，石蜡包埋，切片行免疫组化。　　1.5 脑梗死体积的测量 大鼠在缺血24 h后以10%水合氯醛麻醉后断头取脑，以生理盐水冲洗后，将脑组织迅速置于－20 ℃冰箱冻存20 min后取出，去除嗅球、小脑和低位脑干，切除额极和枕极，以2 mm间距行冠状位切片，共5片，然后浸于2%的TTC（2，3，5氯化三苯基四氮唑)磷酸盐缓冲液中，置于37 ℃　　的水浴箱中染色30 min，再在4%的多聚甲醛溶液中固定12 h,取出后用数码相机照相，最后利用图像分析软件计算出梗死区域的面积，为了消除脑水肿的影响，梗死区域体积用占对侧大脑半球体积的百分比来表示。　　1.6 免疫组化检测Nrf2及其HO1的表达 免疫组化方法严格按说明书染色步骤进行，抗原修复后，孵育一抗，Nrf2和HO1兔抗鼠多克隆抗体分别按1∶100和1∶200稀释。每片在高倍镜（400倍）下随机选取损伤侧（左侧）皮层范围内5个非重叠视野，利用ImagePro Plus软件计算平均阳性细胞数。　　1.7 统计学处理 采用SPSS11.5统计软件包进行分析，数据用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析和StudentNewmanKeuls (SNKq)检验。　　2 结 果　　2.1 各组大鼠脑梗死体积比较 TTC染色结果：脑组织梗死灶呈白色，正常组织呈红色，部分组织表现为由白色向红色过渡区。缺血组左侧半球梗死灶主要位于额顶叶皮质及纹状体。假手术组无梗死体积。与缺血组相比，rhEPO治疗组脑梗死体积明显减小，有统计学意义（P<0.01）。详见表1。　　2.2 免疫组化测定脑组织中Nrf2及HO1的分布与表达 假手术组可见HO1在细胞浆中有少量表达；缺血组阳性细胞增多，阳性细胞主要为缺血区的神经元和星形胶质细胞。与假手术组相比，差异有统计学意义（P<0.01）；rhEPO治疗组阳性细胞增多更为明显，与缺血组比较差异有统计学意义（P<0.01）。?　　假手术组中有少量Nrf2浆阳性细胞，无明显核阳性细胞。缺血组可见明显的Nrf2核阳性细胞，核阳性细胞主要为缺血区的神经元和星形胶质细胞。与假手术组比较，差异有统计学意义（P<0.01）；rhEPO治疗组可见大量的核阳性细胞，与缺血组比较，差异有统计学意义（P<0.01）。表明rhEPO能增加核内Nrf2的含量。详见表2。
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BMSC移植对小鼠pMCAO模型IL23p19Th17轴的免疫调控作用
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