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RFLP, RAPD, STS and DDRT-PCR techniqueswere applied to Þnd molecular markers linkedto Pm13, an Aegilops longissima gene conferring resistanceto powdery mildew in wheat. The experimentalstrategy was based on the di¤erential comparisonof DNAs from common wheat and from commonwheat/Ae. longissima recombinant lines carrying shortsegments of the 3SlS chromosome arm containing thePm13 gene. Sixteen RFLP clones that detect loci previouslylocated in the short arms of group-3 wheatchromosomes were screened for their ability to hybridiseto Ae. longissima restriction fragments derived fromthe 3SlS segments introgressed into the recombinantlines. Eight RFLP clones and one STS marker detected3SlS-speciÞc fragments whose location relative to thewheat-alien chromatin breakage point of the recombinantlines was determined. Four ampliÞcation productswere identiÞed through the screening of about 200RAPD primers. Their polymorphism was associatedwith the introgression of the alien DNA. One of thedi¤erential fragments was derived from the 3SlS DNAsegment, while the remaining three corresponded to thereplaced 3DS DNA. Further analyses carried out using40 combinations of DDRT-PCR primers detected anadditional reproducible polymorphism associated withthe presence of 3SlS DNA. In view of their possibleutilisation in Pm13 marker-assisted selection, di¤erentiallyampliÞed RAPD and DDRT-PCR fragmentswere cloned, transformed into RFLP markers and convertedinto STS markers.
的RFLP , RAPD分析, STS和mRNA差异显示技术适用于&nd分子标记联系以pm13 ,山羊长基因赋予的阻力白粉病在小麦。实验战略的基础上,邸¤ erential比较对DNA的普通小麦和从共同小麦/爱。长重组系进行短期阶层的3sls染色体臂载pm13基因。 16限制性片段长度多态性无性系的检测点以前坐落在短期内武器的小组- 3小麦染色体进行筛选,他们的能力hybridise 以爱。长限制性片段来自该3sls部分导入重组线。 8限制性片段长度多态性无性系和1 STS标记检测3sls - speci&c片段,其位置相对向小麦-外来染色质断裂点重组电话线的决心。 4 ampli&cation产品被identi&ed通过筛选约200 的RAPD引物。其多态性相关与渗入的外国人的DNA 。其中的邸¤ erential片段来自3sls的DNA 部分,而其余3对应到取代三维动画的DNA 。进一步的分析进行使用40组合的差异显示PCR引物检测1 额外的重现性相关的基因多态性与在场的3sls的DNA 。鉴于它们的可能使用率在pm13标记辅助选择,直接投资¤ erentially ampli&ed RAPD和mRNA差异显示片段被克隆,转化为RFLP标记及改装
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RFLP、RAPD、STS和DDRT-PCR技术 被申请了于连接的Þnd分子标志 对Pm13,对白粉菌的内呲脓肿穿破longissima基因商谈的抵抗在麦子。 实验性 战略根据di¤erential比较 DNAs从普通小麦和从共同性 wheat/Ae. 运载3SlS染色体胳膊的短的段的longissima再组合线包含Pm13基因。 以前查出所在地的十六RFLP克隆位于小组3麦子的短的胳膊 染色体被筛选了为了他们的能力能杂交到Ae。 longissima制约片段从3SlS段获得了introgressed入再组合线。 八RFLP克隆和一个STS标志查出了3SlS-speciÞc相对再组合线麦子外籍人染色质破损点的地点是坚定的片段。 四个ampliÞcation产品 通过大约200 RAPD底漆掩护identiÞed。 他们的多形性是伴生的 外籍人脱氧核糖核酸的introgression。 而保持的三对应了于被替换的3DS脱氧核糖核酸,其中一个di¤erential片段从3SlS脱氧核糖核酸段获得了。 使用DDRT-PCR底漆的40个组合被执行的进一步的分析查出了另外的可再生多形性与3SlS脱氧核糖核酸相关出现。 由于他们在Pm13的可能的运用标志协助了选择, di¤erentially ampliÞed RAPD和DDRT-PCR片段 被克隆了,被变换了成RFLP标志并且被转换了成STS标志。
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我也很恨很想知道啊~ 真的好漂亮、环境也很干净
歌也很好听。^ ^
不知耶!!
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