土壤多酚氧化酶英文名称活性测定中,用乙醚做萃取剂有一定的风险,能否换一种其他的萃取剂?标准曲线又该如何处理

邻苯三酚比色法测定土壤多酚氧化酶活性;试剂配制;(1)1%邻苯三酚溶液(2)乙醚;HCl(相当于50mI醚中含5mg紫色没食子素);(5)pH4.5柠檬酸――磷酸缓冲液;2;无基质的土壤的对照中,用水代替基质进行培养;3.活性表示紫色没食子索的量,根据用重铬酸钾绘制;数表示;我不知道找个“紫色没食子素”是什么意思?是不是要;使其成为乳状液;回复:;没食子素就
邻苯三酚比色法测定土壤多酚氧化酶活性
(1)1%邻苯三酚溶液
(3)0.5N盐酸。
(4)重铬酸钾标准溶液――o.75g重铬酸钾溶于1升0.5N
HCl(相当于50mI醚中含5mg紫色没食子素)。
(5)pH4.5柠檬酸――磷酸缓冲液。标收曲线绘制:取重铬酸钾标准溶液,用o.5N HCI稀释成各种不同浓度。定容后,在分光光度计上于430nm处比色测定。以光密度位为纵坐标,以浓度为横坐标绘制标准曲线。
2。投作步骤
取1g土样(过o.25mm筛),置于50ml三角瓶中,然后注入10ml 1%邻苯三酚溶液,将瓶内含物摇荡后放在30度恒温掐小培养2h。取出后加4mlpH 4.5柠檬酸――磷酸缓冲液,再加35ml乙醚,用力摇荡数次,萃取30min。最后,将含溶解的紫色没食子素的着色乙醚相进行比色。比色时用波长为430nm的滤光片。为防止因乙醚引起的误差,每比色一次用元水乙醇洗涤比色液槽一次。 为了消除土壤中原有的醚溶性有机物质而引起的误差及校正 没食于酚的纯度,需设无基质的土壤和无土壤的基质作对照。在
无基质的土壤的对照中,用水代替基质进行培养。
3.活性表示
紫色没食子索的量,根据用重铬酸钾绘制的标准曲线查知。
多酚氧化的活性,以2h后1g土壤中紫色没食子素的毫克
我不知道找个“紫色没食子素”是什么意思?是不是要找个试剂啊?我问了几个老师,他们都没有听说过这个试剂。我的有的药品冯老师本来说他那有,可是我做的时候去找了,缺了几个,王老师说想办法买了,已经给李老师说了,买了后做,这几天榆林大风降温,那个移栽没有办法进行,上面红颜色的我不知道怎么做了,萃取不知道是萃取什么,看不太懂,还有测那个中性磷酸酶时的酚溶液是苯酚加水就可以了么?我这几天在图书馆查了很多资料,可是都没有啥结果( 配制方法: 在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g 苯酚,在水 浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内,轻轻振荡混合,
使其成为乳状液。静止7~10小时,乳状液变成两层透明溶液,下层为被水饱和的酚溶液,放出下层,贮存于棕色瓶中备用。)
没食子素就是邻苯三酚。紫色没食子素就是多酚氧化酶催化氯化没食子素生成的东西。
乙醚萃取的时候会分层,之前不是加邻苯三酚了嘛,乙醚相中萃取出的多酚物质被邻苯三酚着色了生成紫色没食子素。萃取出来的成分就是你在430nm处测定的物质啊!
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大实验―土壤酶活性的测定
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&&环境工程专业大实验其中重要的一部分,土壤酶活性的测定,包括脲酶和多酚氧化酶。
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