戴氏苏木精怎么配?硫酸铝铵含氮多少饱和溶液怎么配?

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试剂的配制
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生物常用试剂配制
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卡诺氏固定液15
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持;达到优良染色效果;单纯的固定液一般难以达到这些要求,因此在实验中使;临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分;水稻根尖染色体标本制备;作者:biozxp发布日期:查;1.取材:选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺;压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右去壁低渗;处理方法0.002
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。单纯的固定液一般难以达到这些要求,因此在实验中使用两种混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分钟至24小时,冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。水稻根尖染色体标本制备 作者: biozxp
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出自: http://emuch.net1.取材: 选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺有滤纸的培养皿内,在约28℃条件下发芽培养,当胚根长至1~1.5cm时,剪下备用。 2.预处理压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右 去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法 0.002mol/L8-羟基喹啉 α-溴萘饱和溶液 低温(-4℃) 卡诺氏Ⅰ固定液 处理时间(h) 1 24 24 24注:卡诺氏Ⅰ固定液 乙醇:冰醋酸(3:1)3.固定 卡诺氏Ⅰ固定液,固定时间以不超过24h为宜。经过固定的材料如不及时使用,可经90%酒精换到70%酒精各半小时,再换入一次70%酒精,在0~4℃冰箱内备用。 去壁低渗法a.将3固定的材料用DDW洗净后,0.075mol/LKCL溶液室温条件下处理约30min。b.酶解去壁 吸取低渗液,加入1%混合酶液(1%果胶酶与1%纤维素酶的混合液,均为Sigma公司),28℃左右,酶解4.5~5h.酶解过程中,将材料瓶轻轻摇动1~3次,使材料与酶液充分接触。 c.后低渗 吸取酶液,用DDW冲洗材料2~3次,然后在DDW中停留30min。 d.重固定 吸取低渗液后,加入新配制的卡诺氏Ⅰ固定液,固定时间约20min。e.标本制备 吸取固定液后,将根尖捣碎,再滴入新鲜固定液3~5滴,制成细胞悬液,充分搅匀。吸出细胞悬液滴于清洁载玻片上。(为了使细胞悬液能充分散开,载玻片可预先放置于-20℃冰箱内保存,使用时取出)再将载玻片于酒精灯下来回移动,烤片。f.染色 改良品红[11]染色30~50min。染色完毕,洗去染液,脱水透明,干燥后镜检。根尖压片法解离: 将1.3固定好的材料用DDW冲洗2~3次,放入盛有1N盐酸(浓盐酸:DDW 1:11)的小瓶中,在60℃左右水浴锅中处理15min。解离完毕时,根尖分生区是乳白色,而根冠和伸长区则显透明。 色约5h。压片: 取染色完毕的根尖置于干净载玻片上,切除根冠,切下根尖分生区,加入一滴清水,盖上玻片后压片。镜检,如果染色过深,可滴加一滴45%醋酸溶液分色。染色: 将材料水洗3~5次,注意,一定要将解离液冲洗干净,否则材料不易着色。改良品红染附录二: 常用固定液和染色液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材略减冰醋酸,略增福尔马林。若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml 2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA) 福尔马林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定24h,可长久保存。 3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative) 配方Ⅰ:纯酒精3份 + 冰醋酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份 + 冰醋酸1份 + 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。固定时间不宜过久。 4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h,亦可长久保存。 5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml 此液也可长期储存材料。 6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml (2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml (3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和几分钟至1h。中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透,可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h。 强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透,可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h或更长。 7. 铬酸-醋酸-福尔马林混合液这3甲、乙两液均为贮备液,使用之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水多的材料,可选用Ⅰ或Ⅱ固定,用高浓度的Ⅳ或Ⅴ,一般材料多用Ⅲ。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时,常用桑弗利斯固定液。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ固定液桑弗利斯液固定时间为4~6h。8. 铬酸-锇酸-醋酸固定液(Flemming fixative)强液:10%铬酸水溶液3.1ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml + 蒸馏水 11.9ml 中液:10%铬酸水溶液0.33ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml + 蒸馏水6.27ml弱液:10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml + 蒸馏水96.5ml 此固定液需现用现配。固定物组织的固定。 9.Lichent’s固定液1%铬酸水溶液15ml + 冰醋酸5ml +福尔马林80ml 此固定液适用于固定丝状藻类和真菌。
附录二: 常用固定液和染色液的配制常用染色液的配制 1. 番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。 2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。 3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。 4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。 5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。 6.改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。 原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。 7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。 8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。 9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。 10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末(切记不可一次倒入)。待全部12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种: 配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。 配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin) 甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml 丙液:甘油25ml + 甲醇25ml置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。 配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。配制时,先将苏木精溶于化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。 13.席夫试剂(Schiff’s regent)馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。冷却至25酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,14.硫堇染液 15.亚甲基蓝染液0.1g亚甲基蓝溶入100ml蒸馏水即可。 16.詹纳斯绿B(Janus green B)染液5.18g詹纳斯绿溶入100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释,稀释倍数应视材料而异。 17.苏木精-曙红(HE)染液曙红(Eosin),酸性染料,为最优良的动物细胞染料,与苏木精配合使用(复染)对动物组织进行对比染色。 苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法: 配方Ⅰ:曙红0.5g + 95%酒精100ml
配方Ⅱ:曙红0.5g + 蒸馏水100ml配方Ⅲ:曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸馏水75ml可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱将0.25g硫堇粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor)在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。
在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量秋水仙素,使正在分裂的细胞停留在中期,以获得大量分裂相供分析之用。秋水仙素的浓度范围比较宽,一般使用浓度0.05―0.8微克/毫升,在终止培养前处理2―4小时。但在实际工作中需要借助浓度和处理时间来控制染色体的收缩程度。秋水仙素作用时间越长,被阻断的中期分裂相越多,但是染色体也越凝聚和收缩,所以还视各实验室经验而定。 二、低渗液(hypotonic solution)低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液,例如水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾(0.65M)、氯化钾(0.075M)等。低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展,同时可使粘附于染色体的核仁物质散开,以便能在一个平面上观察所有染色体形态。实验室中一般选用0.075M KCl为低渗液(具体情况取决于实际操作,鉴于实验的连续性和稳定性,本实验室采用0.35%KCl),其优点有:①染色体轮廓清楚,可染色性强,染色时间短,②用于显带染色时能充分显示带型特点。
低渗处理为37℃,15-25分钟,以预实验条件为准。
三、固定液固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。单纯的固定液一般难以达到这些要求,因此在实验中使用两种混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分钟至24小时,冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。 四、滴片滴片使细胞悬液从一定高处落在载玻片上,淋巴母细胞膜破裂,染色体分散开。载玻片可用冰片和干片,效果均好。滴片后需空气干燥。 五、Giemsa染色Giemsa染料不是一种单一染料,而是天青、伊红、甘油和甲醇的混合物,配制后原液储存。在常规染色中,并不比其他染料优越,但在显带技术中,却是无可比拟的。Giemsa工作液在使用前临时配制,浓度可在2.5-10%之间(原液2份加pH7.4磷酸缓冲液10-40份)。染色后,染色质呈红色,细胞核是蓝色。包含各类专业文献、高等教育、文学作品欣赏、应用写作文书、生活休闲娱乐、行业资料、中学教育、专业论文、卡诺氏固定液15等内容。 
 注意:1)卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid): 配方(v/v) :3 份无水酒精:1 份冰醋酸 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片 等。有...  遗传学实验考题 1、 固定植物材料的卡诺氏(Carnoy)固定液配方是什么? 配方 :无水酒精 3 份 :冰醋酸 1 份或无水乙醇 6 份,氯仿 3 份,冰醋酸 1 份 2、...  (6)?卡诺氏固定液、醋酸洋红、脱水透明封片剂配制方法同实验三《花粉母细胞涂抹 制片》 。四、实验步骤 1、?材料准备 选取蚕豆等种子,在 40℃~50℃的热水中...  (二)可供使用的药品,试剂及染色液 0.02%秋水仙素,0.1%KCl 溶液,卡诺氏固定液,5%Giemsa 染色液,中性树胶,蒸馏水,吸水纸, 载玻片,盖玻片,解剖刀,培养皿(各...  选用胡萝卜作材料提取胡萝卜素的实验中,用无水乙醇作萃取剂 D.低温诱导洋葱染色体数目变化的实验中,卡诺氏固定液的作用是将细胞解离 3.下图①②分别代表不同的...  2.在使用焙花青-铬钒溶液时,需要首先将花药用卡诺氏固定液处理 20m in。该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为 3:1 的比例 混合均匀。 3.填写...  卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定 -6- 22、解离液(5%盐酸和 95%酒精按 1:1 的比例配成) :有丝分裂中根尖的分离与固定 23、层析液:用于叶绿素的...  卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定 22、解离液(5%盐酸和 95%酒精按 1:1 的比例配成) :有丝分裂中根尖的分离与固 定 -7- 23、层析液:用于叶绿素的...  固定时,将预处理过 的根尖用蒸馏水冲洗两次 ( 约 5 分钟 ) 。然后移入卡诺氏固定液中,在 4 ― 15 ℃ 条件下固定 20 一 24 小时后用 70 %酒精冲洗 2...常用染色液的配制34
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常用染色液的配制34
一、常用染色液的配制;⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色;配方:碘化钾2g;蒸馏水300ml;碘1g;先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振;⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的;配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉;95%酒精1;(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,;(3)苏丹III70%乙醇的饱和溶液;⒊1%
一、常用染色液的配制⒈ 碘-碘化钾(I2-KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ; 碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。⒉ 苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉 ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入10ml甘油(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。⒊ 1%醋酸洋红(aceto carmine) 酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。配方:洋红1g ; 45%醋酸100ml煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。⒋ 改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂。配制步骤: 先配成三种原液,再配成染色液。原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。
⒌ 中性红(neutral red)溶液 用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。配方:中性红 ;蒸馏水100ml使用时再稀释10倍左右。⒍ 曙红Y(伊红,eosin Y)酒精溶液 常与苏木精对染,能使细胞质染成浅红色,起衬染作用。配方:曙红 ; 95%酒清100ml也常用于95%酒精脱水时,加入少量曙红溶液,其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。⒎ 钌红(ruthenium red)染液 钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。
配方:钌红5~10mg ; 蒸馏水25-50ml⒏ 龙胆紫(gentian violet) 为酸性染料,适用于细菌涂抹制片。配方:龙胆紫0.2~1 g ;蒸馏水100ml⒐ 苯胺兰(aniline blue)溶液 为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色,对于高等植物多用于与番红作双重染色。配方:苯胺兰1 g ; 35%或95%酒精100ml⒑ 间苯三酚(phloroglucin)溶液用于测定木质素。配方:间苯三酚5g ; 95%酒精100ml注:此溶液呈黄褐色即失效。⒒ 橘红G(orange G)酒精溶液 为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。
配方:橘红G 1g ; 95%酒精100ml⒓ 番红(safranin O)为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。配方:(1)番红水溶液番红0.1或1 g ;蒸馏水100ml(2)番红酒精溶液番红0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml(3)苯胺番红酒精染色液甲液 番红5 g +95%酒精50ml乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀,过滤后使用。⒔ 固绿(fast green)又称快绿溶液。为酸性染料,能将细胞质,纤维素细胞壁染成鲜艳绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。配方:(1)固绿酒精液固绿0.1 g ; 95%酒精100ml(2)苯胺固绿酒精液固绿 1 g ;无水酒精 100ml ;苯胺油 4ml配后充分摇匀,过滤后使用。现配现用效果好。⒕ 苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料,而且可以分化出不同颜色。配方很多,现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。配方:甲液(媒染剂): 硫酸铁铵(铁明矾)2-4g ;蒸馏水100ml(必须保持新鲜,最好临用之前配制)乙液(染色剂):苏木精 0.5-1g ;95%酒精 10ml;蒸馏水 90ml配制步骤:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长期保存。切片需先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。⒖亚甲基蓝染液 常用于细菌、活体细胞等的染色。取亚甲基蓝,溶于100ml蒸馏水中即成。⒗詹纳斯绿B(Janus green B)染液将 绿溶于100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。
⒘硫堇染液取克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。使用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反应。18.黑色素液水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛(福尔马林)。可用作荚膜的背景染色。19.墨汁染色液 国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。用作荚膜的背景染色。20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液A液:美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝),95%乙醇30mL;B液:。混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。21.革兰氏染色液(1)结晶紫(cristal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。(2)芦戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL,即成。配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色能使用。(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸馏水90mL。(5)番红溶液:番红O(safranine O,又称沙黄O),95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。以上染色液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌,前者蓝紫色,后者淡红色。22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液:碱性复红溶于95%乙醇10mL中为A液;溶液100mL为B液。混合A、B液即成。23.姬姆萨(Giemsa)染液(1)贮存液:称取姬姆萨粉,甘油33mL,甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细,再逐滴加入甘油,继续研磨,最后加入甲醇,在56℃放置1-24h后即可使用。(2)应用液(临用时配制):取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也可以贮存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液。24. 1%瑞氏(Wright's)染色液称取瑞氏染色粉6g,放研钵内磨细,不断滴加甲醇(共600mL)并继续研磨使溶解。经过滤后染液须贮存一年以上才可使用,保存时间愈久,则染色色泽愈佳。二、常用试剂的配制(一)显微镜镜头清洁剂将乙醚和乙醇按7∶3混合,装入滴瓶备用。用于擦拭显微镜镜头上油迹和污垢等(注意瓶口必须塞紧,以免挥发)。(二)固定液1.福尔马林-乙酸-酒精固定液(FAA,又称万能固定剂)福尔马林(38%甲醛)5ml+冰乙酸5ml+70%酒精90 ml,可用于固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩;还可加入5ml甘油(丙三醇)以防蒸发和材料变硬。FAA 可兼作保存剂。2.福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml+丙酸5ml+70%酒精90ml,用于固定一般的植物材料,通常固定24h,效果比FAA 好,并可长期保存。3.福尔马林-丙酸-氯仿固定液(卡诺固定液)配方一:无水酒精3份+冰乙酸1份。配方二:无水酒精6份+冰乙酸1份+氯仿3份。是研究植物细胞分裂和染色的优良固定液,材料固定后,用95%和85%的酒精浸洗,清洗2-3次,也可转入70%酒精中保存备用。4.甘油-酒精软化剂甘油1份+50%或70%酒精1份,适用于木材的软化,将木质化根、茎等材料排除空气后浸入软化液中,时间至少一周或更长一些,也可将材料保存于其中备用。5. 铬酸-乙酸固定液根据固定对象的不同,可分强、中、弱3种不同的配方:弱液配方:10%铬酸2.5 ml+10%乙酸5.0 ml+蒸馏水。中液配方:10%铬酸7 ml+10%乙酸10 ml+蒸馏水83 ml。强液配方:10%铬酸10 ml+10%乙酸30 ml+蒸馏水60 m1。弱液用于固定较柔嫩的材料,例如藻类、真菌类、苔药植物和蕨类的原叶体等,固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12-24 h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟到1h。
中液用作固定根尖、茎尖、小的子房和胚珠等,固定时间12-24 h或更长。强液适用于木质的根、茎和坚韧的叶子、成熟的子房等。为了易于渗透,可在中液和强液中另加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12-24 h或更长。(三)离析液1. 铬酸-硝酸离析液铬酸为三氧化铬的水溶液:(1) 10 ml铬酸;(2) 10 ml浓硝酸。将上述两液等量混合均匀后再使用。适于对导管、管胞、纤维等木质化的组织进行解离时使用。2. 盐酸-酒精固定离析液将浓盐酸、95%酒精等量混合备用,一般用于离析根尖细胞。包含各类专业文献、行业资料、应用写作文书、高等教育、外语学习资料、各类资格考试、常用染色液的配制34等内容。 
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