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大肠埃希菌
在人和动物的肠道中大量存在，其中有少数几种能引起人类食物中毒。根据致病性的不同，致泻性大肠埃希菌被分为产肠毒素性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠集聚性黏附性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌5种。部分埃希菌菌株与婴儿腹泻有关，并可引起成人腹泻或食物中毒的暴发。肠出血性大肠埃希菌O157:H7是导致1996年日本食物中毒暴发的罪魁祸首，它是出血性大肠埃希菌中的致病性血清型，主要侵犯小肠远端和结肠。常见中毒食品为各类熟肉制品、冷荤、牛肉、生牛奶，其次为蛋及蛋制品、乳酪及蔬菜、水果、饮料等食品。中毒原因主要是受污染的食品食用前未经彻底加热。中毒多发生在3-9月。（1）中毒表现：不同的致泻性大肠埃希菌引起的中毒，症状各不相同。①产肠毒素性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是水样腹泻、腹痛、恶心、低热。每天腹泻可达8～12次。②肠道侵袭性大肠埃希菌的中毒症状与志贺菌引起的痢疾相似，发热、剧烈腹痛、水样腹泻、粪便中有少量粘液和血。③肠道致病性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是发热、不适、呕吐、腹泻、粪便中有大量粘液但无血，有约20%患者由呼吸道症状，感染的症状通常比较严重。④肠集聚性黏附性大肠埃希菌引起的中毒症状成年人表现为中度腹泻，病程1～2天。婴幼儿多表现为2周以上的持续性腹泻。⑤肠出血性大肠埃希菌引起的中毒，一般3～10天发病，常有突发性的腹部痉挛，有时类似于阑尾炎的疼痛。有的病人只有轻度腹泻；有些病人由水样便，转为血性腹泻，腹泻次数有时可达10多次，低热或不发热；许多患者同时有呼吸道症状。可发展为溶血性尿毒综合征和血栓性血小板减少性紫癜等多器官损害。老人和儿童患者死亡率很高。（2）紧急处理：排除毒物，必要时进行催吐、洗胃和导泻；对症治疗；抗生素治疗，首选氯霉素、多粘菌素、庆大霉素、卡那霉素。对于肠出血性大肠埃希菌感染者，应慎用抗生素，因抗生素非但不能缩短病程，反而回增加发生溶血性尿毒综合征的机会。（3）中毒预防：不吃生的或加热不彻底的牛奶、肉等动物性食品。不吃不干净的水果、蔬菜。剩余饭菜食用前要彻底加热。防止食品生熟交叉污染。养成良好的个人卫生习惯,饭前便后洗手。食品加工、生产企业特别是餐饮业应严格保证食品加工、运输及销售的安全性。
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诊断检查诊断在流行期间，凡是腹泻的婴幼儿，应首先考虑为大肠埃希杆菌性胃肠炎，先隔离治疗，等待病原学检查确诊。在非流行期，特别是散发病例，仅靠临床常难以诊断，必须结合病原学、血清学检查确诊。实验室检查1.采集标本 以无菌棉拭子蘸取腹泻病患者粪便，如无粪便，以浸湿磷酸盐缓冲液的直肠拭子插入肛门4～6cm(婴幼儿2～3cm)处，在直肠内旋转擦取直肠表面黏液后取出，盛于运送或保存液中，如不能及时送检，样品应在4℃冷藏保存，但以不超过8h 为宜。2.增菌和分离培养 对于大肠埃希杆菌的分离应在初代分离时选用弱选择性培养基，如伊红亚甲蓝、中国蓝蔷薇酸式山梨醇麦康凯平板。划线分离，35～37℃培养18～24h 后，观察菌落形态特征，选取紫红色或暗红色、大小1～3mm、边缘整齐有光泽、中央凸起的单个菌落进行鉴定。3.鉴定(1)初步鉴定：根据菌落特征、涂片染色的菌形及染色反应，取纯培养物细菌作图1 所示生化反应，凡符合于表1 所示结果可初步鉴定为大肠埃希杆菌。(2)最后鉴定：一般常规检验做到上述初步鉴定即可，必要时可按《伯杰系统细菌学手册》所列生化反应做出最后鉴定，其中主要的鉴定试验为：触酶阳性，氧化酶阴性；发酵葡萄糖产酸产气或只产酸，发酵乳糖产酸产气或迟缓发酵产酸，不发酵肌醇；IMVC 反应分别为+，+，-，-(占94.6%)；脲酶阴性，H2S 阴性，苯丙氨酸脱氨酶阴性，硝酸盐还原阳性，动力多数阳性。简便的方法是采用肠杆菌科试剂盒，根据反应结果编码后做出最后鉴定。(3)鉴定试验：某些大肠埃希杆菌，尤其是无动力的不发酵乳精株，应与志贺菌相鉴别，二者的主要鉴别试验可用醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及黏质酸盐产酸3 种试验。大肠埃希杆菌均为阳性，而志贺菌为阴性。
① 致病性大肠埃希杆菌：A.假定试验：于鉴别平板上菌落生长稠密处挑取培养物，以EPEC 的3 种多价O 血清作玻片凝集试验。如与某一种多价O 血清凝集，再与该多价血清所包含的O 单价血清做试验。如与某个O 单价血清凝集，再挑取3～5 个单个菌落，与该血清作凝集试验。B.生化试验：选择O 单价血清强凝集的菌落接种三糖铁琼脂，悬挂靛基质试纸片，经36℃培养18～20h。凡是乳糖、蔗糖产酸，葡萄糖产酸并多数产气，H2S阴性，靛基质阳性的菌株，可证实为大肠埃希杆菌。如果靛基质为阴性时，还必须V-P 试验为阴性，且不能在西蒙枸橼酸盐琼脂上生长，方可证实为大肠埃希杆菌。C.血清学证实试验：刮取三糖铁琼脂上的培养物，用生理盐水制成菌悬液，稀释至与MacFarland 3 号比浊管相当的浓度。0 单价血清如果原效价在1∶(160～320)，则可l∶40 稀释(用0.5%盐水)。在10mm×75mm 试管内，将稀释的抗血清与菌悬液等量混合，于50.6℃水温中16h 后观察结果。如果出现凝集，可证实为该O 因子。②出血性大肠埃希杆菌：已知为出血性肠炎患者的粪便，可划线接种以山梨醇代替乳糖的麦康凯琼脂平板。经培养后，挑选3～5 个山梨醇不发酵的菌落，以O157 血清(最好同时再以H7 血清)作玻片凝集试验和单管凝集试验以确定诊断。分离的菌株应接种三糖铁琼脂，悬挂靛基质试纸片，经36℃培养18～20h。典型的生化特性为乳糖、蔗糖产酸，葡萄糖产酸产气，H2S 阴性，靛基质阳性。并接种山梨醇发酵管，为迟缓发酵。③毒性大肠埃希杆菌：A.生化试验：于鉴别平板上挑取可凝菌落5 个，一般挑取乳糖发酵的典型菌落，分别接种三糖铁琼脂，悬挂靛基质试纸片，经36℃培养18～20h。凡是乳糖、蔗糖产酸，葡萄糖产酸并多产气，H2S 阴性，靛基质阳性的菌株，可证实为大肠埃希杆菌。如果靛基质为阴性时，还必须V-P 试验阴性，且不能在西蒙枸橼酸盐琼脂上生长，方可证实为大肠埃希杆菌。B.肠毒素试验：产毒性大肠埃希杆菌主要靠肠毒素试验证实。肠毒素试验的方法甚多，国内目前以双相琼脂扩散试验测定LT，以乳鼠灌胃试验测定ST，有时亦采用家兔结扎回肠段试验以测定LT 和ST。
当前已有采用基因诊断法测定这两种肠毒素。a.双向琼脂扩散试验：将被检菌株按5 点环形接种于Elek 培养基上，以同样操作，共做两份，于36℃培养48h。在每株菌的菌苔上放一片多黏菌素B 纸片，于36℃经5～6h，使肠毒素渗入琼脂中。在离菌苔各5mm 处的中央，挖一个直径4mm 的圆孔，并用一滴琼脂垫底。在孔内滴加LT 抗毒素30μl，并用已知产LT 和不产毒菌株作对照。于36℃培养15～20h 观察结果。在菌斑和抗毒素孔之间出现白色沉淀带者为阳性，否则为阴性。b.乳鼠灌胃试验：将被检菌株接种于Honda 产毒肉汤内，于36℃培养24h，3000r/min 离心30min，取上清液经薄膜滤器过滤，60℃加热30min，每毫升滤液内加入2%伊文思蓝溶液0.02ml。将此滤液用塑料小管注入1～4 天龄的乳鼠胃内0.1ml，同时接种3～4 只。禁食3～4h 后用氯仿麻醉，取出全部肠管，称量肠管(包括积液)重量及剩余的体重。肠管重量与剩余体重之比大于0.09 为阳性，0.07～0.09 为可疑。c.家兔结扎回肠段试验：将被检菌株接种于Honda 产毒肉汤，于36℃培养24h，3000r/min 离心30min，取上清液经薄膜滤器过滤。滤液分成两份，一份不加热，供测LT 用；另一份60℃加热30min，供测ST 用。取体重2kg 家兔，禁食1 天。麻醉后剖腹，取出回肠段，按10～15cm 为一段，分段结扎。取一段注射肉汤2ml 作为阴性对照，另一段注射已知产毒菌肉汤培养物的滤液2ml 作为阳性对照。其他各段分别注射待试菌株肉汤培养物的滤液2ml，将腹壁缝合。测定ST时，于注射后6～8h 剖腹检查；测定LT 时，于注射后18h 剖腹检查。抽取各肠段内的滤液，测定其容量，并测定肠段的长度。积液量(ml)与肠段长度(cm)之比大于1 为阳性。d.血清学试验：肠毒素试验阳性菌株可用ETEC 有关的多价O 血清及单价血清作玻片凝集试验，以确定其O 抗原。
④侵袭性大肠埃希杆菌：A.生化试验：于鉴别平板上挑取菌落3～5 个，一般应多挑取与志贺菌相似的不发酵乳糖的菌落，但发酵乳糖的优势菌落亦可适当挑取。将挑取的菌落接种半固体管，36℃培养18～24h。有动力的菌株一般可以弃去，除非经血清学鉴定为0124。留下无动力的菌株，接种三糖铁琼脂，悬挂靛基质试纸片，36℃培养18～20h。同时并作赖氨酸脱羧酶试验。EIEC 的典型生化特性为：乳糖、蔗糖不产酸或产酸，葡萄糖产酸、产气或不产气，H2S 阴性，靛基质阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，除O124 外均无动力。赖氨酸脱羧酸试验亦可以放在血清学试验以后做。B.血清学试验：挑取三糖铁琼脂培养物，用EIEC 的两个多价O 血清作玻片凝集试验，以确定其O 抗原的成分。C.豚鼠角膜试验：将菌液滴入豚鼠眼内2～5 天内观察是否有红肿、流泪、充血症状。D.ELISA 试验：用已知EIEC 或志贺菌属的有毒菌株免疫家兔，所得之免疫血清用同型的无毒菌株吸收。用ELISA 法测定，EIEC 各型的有毒菌株及志贺菌属各型的有毒菌株均为阳性。此法系检测被检菌的侵袭性多肽，亦可采用基因探针法检测。⑤集聚性大肠埃希杆菌：集聚性大肠埃希杆菌(EAEC)的重要特征是在Hap-2细胞周围形成特征性的集聚性黏附。Yamamoto 发现在37℃培养时，EAEC 的此种聚集性黏附可发生在某些液体培养基的生长表面，形成很厚的黏附聚集性菌块。在25℃或42℃则无此现象，液体培养基以L 或M-H 培养基最佳，以此可作为EAEC的初步鉴定手段。液体培养基中菌块形成试验：大肠埃希杆菌接种于M-H 液体培养基(Difco)，35～37℃温育18～24h，凡表面(部分下沉管底)形成菌块者为阳性，均匀混浊无菌块者为阴性。1996 年王梅等对肠道凝聚性-黏附性大肠埃希杆菌进行简易筛查试验，将M-H 培养基上的菌块形成试验与Hep-2 细胞黏附试验进行对比，发现两者的一致率达77%，如包括弥散型和局限型在内则达88.5%。表明菌块形成试验是可靠的初步筛查EAggEC 的方法。
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此类是人畜共患疾病。人感染此类病菌，多是菌群失调现象，可以侵入尿道，生殖通道，膀胱等地方。此菌群为阴性菌群，对抗生素耐药。
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为兴趣而生，贴吧更懂你。或靛基质（吲哚、I）实验、甲基红（MR、M）实验、乙二酰（VP、V）实验、枸橼酸盐利用（C）试验的合称缩写，常用于鉴定肠道杆菌。尤其对形态、革兰染色反应和培养特性相同或相似的细菌更为重要（主要用于鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检验）。靛基质（吲哚）试验原理某些细菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基质），吲哚能与对二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈红色。实验方法试剂盒法：将对二甲基氨基苯甲醛加入细菌蛋白胨水培养液中。（注：不能摇晃试剂盒） 试管法：以接种环将待检菌新鲜斜面培养物接种于Dunham氏蛋白胨水溶液中，置37℃培养24~48h（可延长4~5d）；于培养液中加入戊醇或二甲苯2~3mL，摇匀，静置片刻后，沿试管壁加入Ehrlich氏或Kovac氏试剂2mL。 斑点试验法：将一片滤纸放在培养皿的盖子上或一张载玻片上，滴加1~1.5mL试剂液于滤纸上使其变湿，取18~24h琼脂平板培养物涂布于浸湿的滤纸上，在1~3min内观察。
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大肠杆菌的靛基质试验为阳性，是因为大肠杆菌能分解
真实姓名李飞
单选题：大肠杆菌的靛基质试验为阳性，是因为大肠杆菌能分解含硫葡萄糖乳糖色氨酸枸橼酸盐正确答案回帖回答后可见：游客，如果您要查看本帖隐藏内容请
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