SAGE和RACE原理,望大神有约浅显易懂的回答,真的看不懂。。。

关于基本的smart race技术得到cDNA全长原理里一点不明白的地方,希望大神帮我!_百度知道
关于基本的smart race技术得到cDNA全长原理里一点不明白的地方,希望大神帮我!
用smart race得到第一链cDNA后,其3'端是已知的SMART引物序列加ccc,5'端是oligo T,这两端都已经知道了,然后根据3'端的SMART引物序列设计出引物进行PCR不就能直接扩增出cDNA全长的双链了吗?为什么还要扩增出第二链cDNA,然后根据保守区设计的简并引物进行3'RACE和5'RACE????
提问者采纳
你可以根据添加的CCC序列设计上游引物,但是你的下游引物呢?你的意思是下游引物是oligoT?但是这样扩增得到的cDNA没有特异性啊,你怎么保证获得你所需要的目的cDNA呢?正好这段时间我也要做RACE,可以讨论
哦,那我知道了,这么说的话,当获得第一链cDNA后,用ccc序列互补的链做上游引物,自己设计的GSP2做下游引物,就能完成5'RACE,然后用GSP1做上油引物,oligo T的互补链做下游引物就能完成3'RACE吗?
对的,就是这样
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