大肠杆菌37度条件下培养多长时间可见清晰菌落,如若时间过长细菌是否还会传代?
正常情况下培养16h左右即可见清晰菌落,大肠杆菌的代时是20min左右.时间过长细菌会老化!
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扫描下载二维码培养基灭菌时间过长会不会影响实验结果(灭菌,培养基,高温,细菌)
12:40:07&&&来源：&&&评论：&&
[培养基灭菌时间过长会不会影响实验结果(灭菌,培养基,高温,细菌)] 我是个新手，我做细菌总数实验，配好培养基后要求高温灭菌20分钟，现在实际灭菌大概40分钟，会对实验有什么影响？ 关键词:[灭菌 培养基 细菌 高温]…
我是个新手，我做细菌总数实验，配好培养基后要求高温灭菌20分钟，现在实际灭菌大概40分钟，会对实验有什么影响？
回复不知道是什么培养基，培养海洋细菌的培养基如2216E等多灭一会影响不大；但象做组织培养的话高压长时间则会使里面有微量元素及营养物质降解，对结果有影响。建议用116度灭菌20 min，总的原则是低压，长时间。回复建议你最好重新配制培养基重新高压，因为培养基高压时如果时间过短会杀不灭孢子；而如果时间过长则会破坏培养基内的一些营养成分，如培养基内的牛肉浸液，或糖类等物质会分解，会破坏培养基的成分！高压时间太长了，40分钟，很难讲会发生什么，为了实验的考虑，建议宁愿费事重新来过！所以建议你最好不要使用高压了40分钟的培养基，重新配制高压使用！回复我认为影响不大，细菌总数对培养基的营养要求不高。但培养基高温灭菌时间过长，其PH值会下降，水份会丧失过多，蛋白胨、牛肉膏会有部分分解，降低了培养基的营养。回复一般细菌，没事。回复一般卫生细菌的细菌总数测定所用的培养基为营养琼脂，有些单位用制备好的商品培养基（各市的疾控一般都有售），主要成分为蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和琼脂。这几种成分对高温都不敏感，一般不会影响结果。GB规定是121℃，15分钟。就像上面占有说的，有一些PH的变化，但对于细菌总数来说，影响不会很大。你可以参考一下王秀茹教授主编的《预防医学微学及检验技术》中P885—88页，培养基配置的一般程序，看看影响因素。回复121℃高温灭菌15min，葡萄糖被破坏24%，这是因为葡萄糖与氨基发生反应所致，并会使培养基呈深红色、pH下降。生成的糖胺类物质可能会对菌体生长有一定抑制、毒害作用。另外一些金属离子会与磷酸根发生沉淀反应。所以含葡萄糖培养基一般在115℃灭菌20min，同时易发生沉淀反应的成分应分开灭菌。回复微实验中的灭菌通常是用“嗜热芽孢杆菌”作为参考。所以通常都是121℃高温灭菌15min。但可以根据具体情况作一些改变，如HollowHills　朋友所说的。但对于一些热敏感的物质，及一些金属离子，如Ca, Mg　等离子，最好采用的方法除菌。即在其他成分灭完菌后，再加入这些经过的成分。（超滤：可用0.22um的滤膜）回复我和cailiang一样，是新手，遇到了类似的问题。我的问题是：要求121℃下高温灭菌，我的达到了128℃左右，我的结果还没有出来，但我认为可能已经影响了结果，况且我的培养基里还有Mg离子。回复更正一下，葡萄糖高压灭菌损失原因：1.磷酸根存在条件下生成酮糖类物质2.与氨基酸的“美拉德”反应3.自身的焦糖化反应回复培养基中如果灭菌的压力比规定的高、灭菌的时间比规定的长通常会破坏一些甚至全部的营养成分。这样会导致细菌生长所需的营养不够，往往很难达到想要的结果。比如，MRS培养基灭菌压力过高，培养基会由棕黄色变成黑褐色，乳酸杆菌根本不能在上面生长。回复这个时间是否长应该考虑两个方面的问题：1）你的灭菌温度，如过温度在121℃及以上，那可能时间太长了；2）你所灭菌的培养基的组成成分。如果含有葡萄糖等，那温度一定不能太高。一般按经验，只要培养基中含有葡萄糖我用110℃灭菌，把温度降低，时间可以稍微延长。总之，在对培养基进行灭菌的时候必须考虑在灭菌杀灭孢子的情况下，保持培养基的营养成分。回复关于这个问题，我得观点是对营养成分有点影响但是不是很大，因为如果温度太高含糖或者碳水化合物很高容易焦化，有影响。但是你的实验条件决定那个培养基要求不是很高的。因为是常规的实验。所以高一点一般影响不大。具体灭菌时间其实有时达到126度以上了，但是有时报告出来的数据好像还是很科学的。高于正常温度的话你可以参照标准F0 值进行推算。至于影响到什么程度，一般在进行细菌的常规实验中要进行培养基的灵敏度检验，如果合格就可以了。不合格你可以去校正，如果你做的很多报废花费太大的话。有时候对实验结果影响大的并不是温度。本实验的结果与个人的经验，和实验操作熟练程度有很大关系。回复时间过长，肯定有一定的影响，若是培养一般细菌，问题不大。回复温度过高,时间过长均对培养基有影响,主要表现在培养基的营养成分会分解以及会产生一西抑制性的成分.一般都是在121度时灭15分钟,这足以杀灭所有的生物(包括孢子),如果是灭水之类的东东,可以延长到40分钟.回复会有影响的，一般有葡萄糖的培养基灭菌温度不应超过115度，时间不应超过15分钟；但低温长时间灭菌有时的效果好于高温短时灭菌。回复我认为这个问题，除了上述理论上的回答外，在实际应中最好的办法是通过验证得出。比如：采用两个灭菌温度及时间，选用多种标准菌株，进行比对即可。121℃下灭菌15分钟是最长采用的方法，几大培养基制造商，如BD、MERCK、OXOID都是这一灭菌条件。回复如果是普通细菌问题不是很大,主要是PH很重要,要比要求的稍高0.2左右.回复121℃下高温灭菌15~20min一般不会产生什么影响回复一般来说，灭菌时间过长，会破坏培养基的营养成分，如淀粉分解甚至焦化，维生素被破坏等。如果你做精细试验，你最好重新做培养基，如果一般试验应当对结果无太大影响。回复要看你在到达121度后多长时间，而不是看总时间回复各位朋友：大家好！我是搞消毒实验工作的。从消毒学的角度谈一下这个问题和大家探讨。高压蒸汽灭菌的目的是要将试验用的培养基灭菌处理以达到灭菌的要求。要做到灭菌就要严格按照高压蒸汽灭菌要求的方法、时间、压力和温度进行。决不能因为自己的要求更改灭菌程序。但是高压蒸汽灭菌有不同的压力温度的要求，可根据所用培养基成分的要求选择适宜的压力温度。常用的适合培养基的高压蒸汽灭菌温度有两种：一、121℃持续20min：适用于含一般营养成分的普通培养基；二、115℃持续30min：适用于含糖类和氨基酸等。低于以上温度达不到灭菌的要求，而高了对培养基的成分有影响，因此而影响实验结果，应根据具体情况采用响应的灭菌方法。以上是一些工作经验，不一定全对，请大家谅解。另外。望有消毒工作经验的朋友们到微生物学术讨论版中的消毒讨论专区来讨论和指导！回复我觉得在实验室中灭菌时间和温度的波动在保证彻底灭菌的前提下问题不大。但在生产实践中却不一样，对于培养基的灭菌时间和温度的要求较高。我从生产实践的角度谈谈对培养基灭菌的要求。1.对于生产来说，对培养基灭菌的要求是：对培养基营养的破坏最小，同时要求彻底灭菌。2.必须进行灭菌工艺（包括时间和温度）的验证。消毒效果以芽胞杆菌为指示菌。3.一旦验证完毕，灭菌过程是不可以任意更改的。4.空罐灭菌一般使用121度30分钟；实罐灭菌121度时间15-30分钟（具体时间以验证结果为准）。含葡萄糖的培养基量少时使用115度20分钟防止葡萄糖焦化。大量使用葡萄糖时如在流加时葡萄糖均使用0.22um过滤除菌，防止养分的破坏。5.工业发酵(吨级)对于培养基的灭菌要求更高，既要节约成本（灭菌彻底同时降低营养的破坏），可以想象如果由于灭菌不彻底所造成的污染和倒罐，损失将会很大。一般采用间歇灭菌。回复公司车间空罐灭菌是大于120度 1小时，可能是灭的彻底吧回复还应当注意到灭菌的时间与采用的容器和装液量有较大的关系，有的１５分，有的２０分，有的更多，记不清了，不过，复旦大学出版的微生物实验书上有．回复我用的(antibiotic)一型培养基，不知道是菌被烫死了，还是灭的时间过长，短小长的不好
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这个要看你培养的目的了.如果是平板计数的话,培养过长菌落会相连,无法准确计数；如果的划线挑单菌落,培养过长菌落相连,无法找到单菌落；如果是种子液的话,一般要控制在对数期,时间过长可能到稳定器甚至是衰亡期,造成接种后迟滞期（或称调整期）过长；如果提基因组的话,培养时间过长可能会到衰亡期,可能衰亡的细菌对基因组的提取不利吧
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