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高效TAIL-PCR方法
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3秒自动关闭窗口扩增已知序列旁邻的未知DNA序列的高效TAIL-PCR方法（hiTAIL-PCR）
扩增已知序列旁邻的未知DNA序列的高效TAIL-PCR方法
扩增已知序列旁邻的未知DNA序列是分子生物学研究中非常重要的任务。华南农业大学的Yao-Guang
教授发明的TAIL-PCR是解决该问题的有效方法。为了提高获得特异的、长片段目标产物的成功率，最近刘教授对TAIL-PCR方法作了较大改进，创建了新的hiTAIL-PCR方法（Liu
Chen，2007）。该方法用在水稻、拟南芥、番木瓜、昆虫等生物的未知DNA序列扩增都获得很好效果。本文所介绍LAD简并引物及AC1引物都是通用的，而特异引物序列是基于CAMBIA载体、1300的RB边界附近序列设计的，用于扩增上述载体的转基因植株的T-DNA插入点旁邻未知基因组序列非常有效。使用者也可根据本文的原理，利用本文的LAD简并引物及AC1引物，再加上自行设计的特异引物，扩增其他类型的未知DNA序列。
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下面介绍一下该方法的原理及设计引物和实验过程应该注意的事项，供参考。如在使用该方法过程中有信息或问题需反馈，可直接留言，以便改进。
图1: 第一轮扩增
第二轮扩增
第三轮扩增
模板 DNA：常规方法提取。用5 mM
Tris-HCl pH8.0 或 1/3 x TE 稀释成 20-50
ng/μL.（电泳检测调整浓度）&
琼脂糖胶浓度1％较好，过高浓度会导致大分子产物分不开
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