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抗生素能有效地杀死细菌，事实果真如此吗？对此，某学习小组的同学进行了青霉素杀菌作用的实验，他们的实验步骤及观察结果如下：①实验步骤。把几滴土壤细菌培养液加在培养皿的营养琼脂上，然后把一些小圆纸片浸在不同浓度的青霉素中，再放在培养皿的营养琼脂表面，另外两片浸了蒸馏水的圆纸片也放在培养皿的营养琼脂表面（见下图）。把培养皿盖上盖，放在37℃的恒温箱内一天。②实验现象。一天后取出培养皿，实验现象如下图所示。请分析回答：（12分）（1）把几滴土壤细菌培养液加在培养皿的营养琼脂上，这个步骤是细菌、真菌培养方法中的_____________。（2）将培养皿放在37℃的恒温箱内一天，温度设定在37℃的目的是_____________________________________________。（3）浸有蒸馏水的两个圆纸片周围没有出现清晰区，它们在实验中起___________作用。浸有不同浓度青霉素的圆纸片周围都出现没有细菌菌落的清晰区，这一现象说明：_______________________，其中清晰区越大，表明圆纸片浸有的青霉素浓度_____________。（4）观察实验现象时，看到的细菌菌落的形态特点是：菌落比较小，表面_____________。每个菌落是由_____________个细菌繁殖后形成的肉眼可见的集合体。（5）实验前要将培养皿、营养琼脂、圆纸片等各种器具进行高温灭菌，这样做的目的是_______________________________________。（6）营养琼脂煮沸后胶化为固态物质用来培养细菌，这些固态物质叫做_____________。（7）青霉素是由_____________产生的物质，这种生物与细菌在细胞结构上的主要不同点是：_______________________________________（2分）。
题型：探究题难度：中档来源：不详
（1）接种&&&（2）该温度适宜细菌的生长和繁殖（3）对照&&&青霉素能杀死细菌&&&越高&&&（4）光滑黏稠&&& 1（5）杀死各种器具上的细菌或真菌的孢子，排除实验外其它环境的污染&（6）培养基（7）青霉&&&青霉有成形的细胞核，细菌无成形的细胞核试题分析：（1）把几滴土壤细菌培养液加在培养皿的营养琼脂上，这个步骤相当于细菌、真菌一般培养方法中的接种，接种就是把已有的菌种，用某种方式取少量的菌种，放到培养基上的过程；（2）细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物，因此，将培养皿放在37℃的恒温箱内一天，温度设定在37℃的目的是该温度适宜细菌的生长和繁殖；（3）由资料可知，将浸有蒸馏水的两个圆纸片周围没有出现清晰区，和浸有不同浓度青霉素的圆纸片周围都出现没有细菌菌落的清晰区，形成对照，这一现象说明：青霉素能杀死细菌，其中清晰区越大，表明圆纸片浸有的青霉素浓度越高；（4）菌落是指一个细菌或真菌在适宜的培养基上繁殖后形成的肉眼可见的集合体，细菌菌落特征：菌落较小，形状表面或光滑黏稠，或粗糙干燥，易挑起，多为白色，每个菌落是由 1个细菌繁殖后形成的肉眼可见的集合体；（5）实验前要将培养皿、营养琼脂、圆纸片等各种器具进行高温灭菌，目的是杀死各种器具上的细菌或真菌的孢子，排除实验外其它环境的污染；（6）营养琼脂煮沸后胶化为固态物质用来培养细菌，这些固态物质叫做培养基；（7）细菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质和DNA集中的区域，没有成形的细胞核，没有叶绿体，青霉素是由青霉菌产生的物质，青霉菌是真菌基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，液泡，没有叶绿体，因此青霉菌与细菌相比，在结构上最大的不同点是青霉有成形的细胞核，细菌无成形的细胞核。
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据魔方格专家权威分析，试题“抗生素能有效地杀死细菌，事实果真如此吗？对此，某学习小组的同学..”主要考查你对&&细菌的形态结构和功能，细菌的种类，细菌的生殖，细菌的生活方式及营养方式&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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细菌的形态结构和功能细菌的种类细菌的生殖细菌的生活方式及营养方式
细菌的形态：细菌是个体十分微小，只有用高倍显微镜或电镜才能观察到细菌的形态；细菌的结构：细菌是单细胞个体，其细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质等部分构成，但没有成形的细胞核，只有DNA集中的核区，这是细菌的基本结构，是所有细菌都具有的。另外，有些细菌除具有这些基本结构外，还有一些特殊结构，如有些细菌细胞壁外有荚膜，有些生有鞭毛。如图所示为细菌的结构示意图。&细菌菌落和霉菌菌落的区别：&&& 细菌菌落比较小，表面或光滑黏稠或粗糙干燥；真菌的菌落一般较大，霉菌的菌落常呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有时还能呈现红、褐、绿、黑、黄等不同的颜色。易错点：误认为细菌有真正的细胞核&&& 细菌也是一个细胞，但它和动植物细胞不同，主要区别在于它虽然具有DNA集中的区域，却没有成形的细胞核。细菌的种类：&& 细菌都是形体十分微小的单细胞个体，只有在高倍显微镜或电镜下才能观察到细菌的形态。细菌的形态因种类不同而不同，其基本形态有球状、杆状、螺旋状，分别称为球菌、杆菌、螺旋菌，如图所示。虽然有些细菌相互连接成球团或长链，但每个细菌都是独立生活的。细菌的生殖方式：细菌的生殖方式为最简单的分裂生殖，是无性生殖。芽孢：&& 有些细菌在生长发育的后期个体缩小，细胞壁增厚，形成芽孢。芽孢是细菌的休眠体，能耐受低温、高温和干燥，对不良环境有较强的抵抗能力。芽孢小而轻，可随风飘散到各处，当遇到适宜的环境时．芽孢可萌发成一个细菌。芽孢是细茵抵抗不良环境的休眠体，而不是细菌的生殖细胞。细菌的营养方式：&& 由于细菌的细胞内没有叶绿体，大多数细菌只能利用现成的有机物生活，并把有机物分解为简单的无机物，这种营养方式属于异养。异养的细菌又分为腐生和寄生两类：寄生的细菌从活的动植物体内吸取有机物生活(如痢疾杆菌)；腐生的细菌依靠分解动植物遗体、遗物，从中吸取有机物生活，它们是生态系统中的分解者(如枯草杆菌)。只有极少数的细菌能自己制造有机物维持生活，其营养方式属于自养(如硫细菌)。
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与“抗生素能有效地杀死细菌，事实果真如此吗？对此，某学习小组的同学..”考查相似的试题有：
123657171018200097126460212526183945解析试题分析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，A正确。消毒是使用较为温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，B正确。灼烧法灭菌主要对象时金属器具，也可以是玻璃器具，C正确。常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法，D错误。考点：本题考查微生物实验室培养的灭菌和消毒方法，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。
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科目：高中生物
题型：单选题
下列关于细胞结构与功能叙述中，正确的是A．水分在衰老、癌变细胞中含量较少，而在分裂、成熟的细胞中含量较多 B．ATP和NADPH在叶绿体中随水的分解而产生，在线粒体中随水的生成而产生 C．吞噬细胞摄取流感病毒与抗体结合形成的沉淀并将其水解，可产生4种核糖核苷酸 D．设法让洋葱根尖吸收含3H标记的尿嘧啶核糖核苷酸，只能在分生区细胞中检测到放射性
科目：高中生物
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下列育种不需要使用生物工程技术的是A．高产青霉素菌株B．能分泌含抗体的乳汁的母牛 C．生长较快的鲤鲫鱼 D．利于贮藏的白菜—甘蓝
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下列关于传统发酵技术的温度条件叙述中，正确的是(　　)。A．腐乳制作过程中，为了促进毛霉的生长，温度应控制在30℃左右 B．醋酸菌是一种嗜温菌，要求较高温度，一般在35℃以上最好 C．制作泡菜时，温度控制在35 ℃时以利于减少亚硝酸盐的产生 D．酿酒时无论是促进酵母菌繁殖还是促进酒精产生，温度都要控制在20℃左右。
科目：高中生物
题型：单选题
下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是(　　)。A．利用稀释涂布平板法对微生物进行计数时只选择菌落数在30—300的稀释平板统计并计算平均数 B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落，每次换方向划线时都需对接种环灭菌 C．根据菌落数统计培养液中活菌数往往比实际活菌数少，原因是有可能2个或多个细菌形成一个菌落 D．鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基要求只含纤维素为唯一碳源
科目：高中生物
题型：单选题
酵母菌被广泛用于发酵，为研究酒精发酵的产物，某研究小组设计了如图所示的装置图。1号、2号试管中均加入3 mL蒸馏水和少许0.1% BTB溶液至蓝绿色(若为较强酸性时，BTB溶液呈黄色)。下列有关叙述合理的是 (& )A．1号试管可以去除或将1号试管中BTB溶液换成澄清石灰水B．该装置无法检验CO2的生成，仍需再补充其他装置C．温度偏高，导致发酵管内O2少，酵母菌繁殖速率减慢，不利于发酵D．为使发酵管中尽量少的含有O2，应先将葡萄糖溶液煮沸，待冷却后加入鲜酵母，再加入少许石蜡油，使之浮于混合液表面
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题型：单选题
下列关于细胞生命历程的说法，正确的是(& )A．细胞分裂都会出现遗传物质的复制和纺锤体 B．细胞分化过程中遗传物质不变，细胞凋亡过程中没有基因的表达 C．能将自身的基因组整合到人的基因组中，从而诱发细胞癌变的病毒一定是DNA病毒 D．在清除衰老、死亡细胞的过程中，溶酶体起重要作用
科目：高中生物
题型：单选题
下图是人体内环境的调节机制示意图，下列说法不正确的是 (& )A．图示的人体内环境的调节机制是神经—体液—免疫调节机制 B．免疫活动既可以由神经系统直接调节，也可以通过有关激素间接调节 C．由于精神因素引起的兴奋传导至神经末梢时，神经末梢膜外电位变化是由正变负 D．若该免疫细胞进行体液免疫时，裂解靶细胞是通过细胞间的直接接触实现的
科目：高中生物
题型：单选题
对于多细胞动物而言，下列有关细胞生命历程的说法，正确的是 (& )A．细胞凋亡受基因控制，细胞坏死时膜通透性逐渐降低&B．肝脏干细胞分化成肝脏细胞的过程表现了细胞的全能性&C．衰老的生物体内的细胞都处于衰老状态&D．细胞受到致癌因子的作用，原癌基因和抑癌基因发生突变&
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微生物实验注意事项
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细胞培养器械的清洗与消毒方法
细胞培养器械的清洗与消毒方法
来源：互联网
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【实验原理】
在组织培养过程中，离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。毒性物质包括解体的微生物
及细胞残余物以及非营养的化学物质，因此对新采用和重新使用的培养皿等培养用品都要严格清洗和消毒。
【实验目的】
学习并掌握细胞培养
使用的器皿、器械的洗涤和消毒。
【仪器、材料及试剂】
1.仪器：超净工作台，干燥箱，高压锅，过滤器
2.材料：紫外灯，0.22&m微孔滤膜。
3.试剂：75%酒精，0.1%新洁尔灭，高锰酸钾，重铬酸钾，浓硫酸。
【操作步骤】
(1)玻璃器皿的清洗
步骤：按浸泡&刷洗&浸酸&冲洗等四步程序进行。
①浸泡：新购进的玻璃器皿常带有灰尘，呈弱碱性，或带有铅、碑等有害物质，故先用自来水浸泡过夜、水洗，然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min，水洗。要领：培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中，使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着，干涸后不易刷洗掉，用后要立即用清水浸泡。
②刷洗：用软毛刷、优质洗涤剂，刷去器皿上的杂质，冲洗晾干。要领：浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多，会损害器皿的表面光洁度，洗涤剂有使pH上升的趋势，所以易选用软毛刷和优质洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲干净。
③浸酸：将器皿浸泡于清洁液24h，如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成，具有很强的氧化作用，去污能力很强。经清洁液浸泡后，玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被完全清除。
④冲洗：先用自来水充分冲洗，吸管等冲流10min，瓶皿需每瓶灌满、倒掉，反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿，凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡过夜，未污染者可不需灭菌处理，但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜，冲洗等。
【附】清洁液的配制和使用注意事项
1.清洁液(配方见表2-1)
重铬酸钾(g)
浓硫酸(ml)
硫酸浓度(v/v)
①选用耐酸塑料桶或不锈钢桶配制为宜。
②先将重铬酸钾溶于水(用玻璃棒搅拌助溶，有时不能完全溶解)。
③缓缓加入浓硫酸，切忌过急，否则将产热而发生危险(绝不可将重错酸饵液倒入浓硫酸中)。
④清洁液配好呈棕红色，待变绿色时表明失效。
由于清洁液的腐蚀性极强，配制与应用时必须小心，并做好防护。
2.矽酸钠洗液
贮存液(×100)
砂酸纳80克加偏磷酸钠9克加热溶在1000ml水中。使用时用水稀释100倍，将器皿放入煮沸20min，冷却后冲洗，再用2%HCl浸泡2h后，自来水冲洗。矽酸钠洗液较清洁液安全，但价格较贵。
(2)塑料器皿清洗
自来水充分浸泡&冲洗&2%Na0H浸泡过夜&自来水冲洗&2%~5%盐酸浸泡30min&自来水冲洗&蒸馏水漂洗3次 &晾干&紫外线照射30min(或先用75%酒精浸泡、擦拭，再用紫外线照射30min)。凡能耐热的塑料器皿，最好经101.3kPa(121.3℃)高压灭菌。
(3)胶塞等橡胶类处理
新购置者先经自来水冲洗&2%NaOH煮沸15min& 自来水冲洗&2%~5%HCl煮沸15min& 自来水冲洗5次以上&蒸馏水冲洗5次以上& 蒸馏水煮沸10min，倒掉沸水让余热烘干瓶塞等。或蒸馏水冲洗晾干，整齐摆放于小型金属盒内经101.3kPa高压灭菌。
(4)金属器械的清洗
新购进的金属器械常涂有防锈油，先用沾有汽油的纱布擦去油脂，再用水洗净，最后用酒精棉球擦拭，晾干。用过的金属器械应先以清水煮沸消毒，再擦拭干净。使用前以蒸馏水煮沸10min，或包装好以101.3kPa高压15min。
(5)除菌滤器
用过的滤器
将滤膜去除，用三蒸水充分洗净残余液体，置干燥箱中烘干备用。
包装的目的是防止消毒灭菌后再次遭受污染，所以经清洗烤干或晾干的器材，应严格包装后再行消毒灭菌处理。包装材料常用包装纸、牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、玻璃或金属制吸管筒、纸绳等。包装分为局部包装和全包装两类，前者用于较大瓶皿，一般用硫酸纸和牛皮纸将瓶口包扎好;后者适于较小培养瓶皿、吸管、注射器、金属器械和胶塞等，以下为常用瓶皿、吸管、无菌衣帽等的包装方法，其它物品可参照处理。
①瓶类：硫酸纸罩以瓶口,外罩二层牛皮纸用绳扎紧。
②小瓶皿、胶塞、刀剪等器械可装人饭盒，饭盒再以牛皮纸包好，绳扎好。
③吸管、滴管口用脱脂棉塞上(不要太紧或太松)装人消毒筒内，滤器、滤瓶、橡皮管等都要用牛皮纸包好瓶口等，外罩一层牛皮纸包好，再用包布包好。
④无菌衣、帽、口罩，均以牛皮纸或包布包好，绳扎好。
3.消毒灭菌
严格的消毒灭菌对保证细胞培养的成功是极为重要的，其方法分为物理法和化学法两类。前者包括干热、湿热、滤过、紫外线及射线等，后者主要指使用化学消毒剂等。
①热灭菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。
②蒸气灭菌：用于玻璃器皿、滤器橡胶塞、解剖用具、耐热塑料器具、受热不变性的溶液等，不同物品其有效灭菌压力和时间不同，如培养用液、橡胶制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高压灭菌10布类、玻璃制品、金属器械等用103kPa(121.3℃)高压灭菌15~20min。
③滤过除菌：适于含有不耐热成分的培养基和试剂的除菌，用孔径为0.22&m微孔滤膜可除去细菌和霉菌等，用此滤膜过滤两次，可使支原体达到某种程度的去除，但不能除去病毒。
④紫外线：紫外线的波长为200~300nm，最强是在254 nm，6~15平方米最少一只紫外灯，高度要在2.5m以下，湿度45%~60%，杆菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌最差，实验前应不低于30分钟的照射时间。
⑤熏蒸消毒：当遇有细胞培养出现多次污染，或实验室两个月一次的常规消毒，均可用高锰酸钾5~7.5g，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一开放容器内，立即可见白色甲醛烟雾，消毒房间需封闭24小时，致少4小时以上。
⑥煮沸消毒：紧密情况时使用，金属器械和胶蹇在水中煮20~30分钟，趁热倾去水分即可使用。
⑦化学消毒：化学药品消毒灭菌法是应用能杀死微生物的化学制进行消毒灭菌的方法。实验室桌面、用具及洗手用的溶液均常用化学药品进行消毒杀菌。常用的有：2%煤酚皂溶液(来苏尔)、0.25%新洁尔灭、1%升汞、3~5%甲醛溶液、75%酒精。
相关实验方法
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