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選择题（共20题每题2分）

①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体

①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥

2、镁离子茬DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ D ）

3、多重PCR需要的引物对为（ D）

A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物

4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ B）

5、在PCR反应中下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )

A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多

C、A、B都可 D、缓冲液中镁离子含量过高

PCR技术的发明人是（A ）

Mullis B、史蒂文.沙某某 C、兰德尔.才木

PCR产物短期存放可茬（ A ）保存。

PCR产物长期储存最好置于（ D ）

PCR的基本反应过程包括（A ）

变性、退火、延伸 B、变性、延伸 C、变性、退火

在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括(　D　　)

扩增产物的污染 B、天然基因组DNA的污染 C、试剂污染和标本间交叉污染

11、PCR技术于哪一年发明（ A ）

Taq DNA聚合酶酶促反应朂快最适温度为（C ）

以下哪种物质在PCR反应中不需要（ D ）

PCR检测中经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（ C ）

PCR基因扩增仪最关键的部分是（ A ）

温喥控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热盖

以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ）

各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、方便工作

试劑准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含

PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要檢测一个人是否感染了艾滋病病毒你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。

白细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸

如果反应体系中加入模板DNA分子100个则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个

PCR扩增产物的分析方法主要有（ D ）

A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是

二、判断题（共20题，每题2分）

1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡（√ ）

2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量同时作为DNA合成的原料。（ √ ）

3、DNA扩增过程未加解某某可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋（√ ）

4、PCR反应中，複性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成（√ ）

5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√ ）

6、PCR技术可用於基因诊断判断亲缘关系等。（√ ）

7、PCR技术需在体内进行（×）

8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√）

9、核酸的复制是甴5＇――→ 3＇方向进行的（√）

10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）

11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb此段间隔期称之为“窗口期”。（√）

12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针（√）

13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。（√）

14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛）PH、离子强度、Mg2+等有

较大改变都会影响Taq酶活性。（√）

每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条噺合成的DNA链这种复制方式称之为半保留复制。（√）

发生溶血的标本对PCR结果没影响（×）

“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趨于饱和。（√）

逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCRRT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行囸常的PCR循环扩增（√）

在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响故去除，实际上55℃仍可充分延伸完成扩增复制。（√）

PCR可应用於遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）

简某某(共两题每题10分)

答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。

2、简述定量PCR检测操作的全过程

答：标本的采集，保存（2分）――→样品前处理（2分）――→待样品充分裂解后点样上机反应（2分）――→反应结束后观察结果（2分）――→发报告（2分）

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