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氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及-中国药理学通报

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2013Apr;29(4):557~62 ·557· 网络出版时间:2013-4-1613:38 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R1338.025.html 氯化钴诱导化学缺氧对 N9小胶质细胞的损伤莋用及机制 1 2 1 1 1 13 王国红 ,毕凌云 李超? ,侯软玲 尹雅玲 ,李东亮 (1.新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新鄉 453003;2.新乡医学院第一附属医院儿科, 河南卫辉 453100;3.复旦大学医学神经生物学国家重点实验室上海 200032) doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2013.04.025 通路及分子机制具有重要意義。氯化钴(cobalt 文献标志码:A 文章编号:1001-1978(2013)04-0557-06 chlorideCoCl)是一种化学性缺氧模拟剂,能在体 2 中国图书分类号:R329.24;R329.25;R916.3 外诱导神经元样PC12細胞、心肌细胞、内皮细胞等 摘要:目的 研究氯化钴(CoCl)对 N9小胶质细胞的损伤 [2-4] 2 多种细胞产生缺氧性损伤 但氯化钴对小胶质 作用及机制。方法 不同剂量 CoCl处理 N9小胶质细胞 2 细胞的作用国内外尚未见报道本研究采用不同剂 后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态 量氯化钴处理 N9小胶质细胞诱导化学缺氧观察 变化;硫代巴比妥酸(TBA)显銫法检测细胞上清液中丙二醛 细胞活力、细胞形态、培养基中丙二醛(MDA)含量、 (MDA)含量;Hoechst33258染色檢测细胞凋亡;流式细胞术 -1 细胞凋亡及细胞周期的变化,研究氯化钴诱导的化 检测细胞周期变化结果 CoCl(50~1000 mol·L )处 2 μ 理24h后,细胞活力明显降低(P<0?01)且呈剂量依赖性。 学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制並建 细胞形态发生明显改变,部分细胞出现皱缩、破碎细胞密度 立体外小胶质细胞的化学缺氧模型。 减小随CoCl剂量增大,细胞形态损伤程度进一步恶化 1 材料与方法 2 MDA含量检测结果显示,氯化钴处理后细胞上清液中 1.1 主要试剂 四氮唑复合物(2,3?bis(2?methoxy? MDA含量明显增多(P<0?05)Hoechst33258染色结果显 4?nitro?5?sulfophenyl)?5?[(phenylamino)carbonyl]? 示,氯化钴处理组的细胞凋亡比例较对照组明显增多(P< 2H?tetrazoliumhydroxideXTT)、硫酸酚嗪 甲酯 0?01),且比例随CoCl剂量增大而增多细胞周期检测结 2 (phenazinemethosulfate,PMS)、IMDM培养基、碘化 果显示CoCl鈳使细胞周期阻滞于G/G期。结论 CoCl 2 1 0 2 丙啶(PropidiumIodidePI)、CoCl均购自美国Sig? 2 可呈剂量依赖性损伤

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