鉴定转基因四个步骤小麦苗的实验流程

本实验介绍了拟南芥转基因四个步骤植株的初步鉴定方法包括:阳性苗的筛选,GUS基因表达分析组织PCR和RT-PCR分析。

抽真空泵培养箱,PCR仪电泳装置,水浴锅

1. 拟南芥阳性苗嘚筛选

将转基因四个步骤拟南芥植株叶片取样后加入含有缓冲液和底物(X-Gluc终浓度为0.5 mg/ml)的离心管中,真空抽气使材料完全没入反应液后取出37℃下染色过夜,经75%乙醇脱色后观察GUS染色情况

取野生型及转基因四个步骤水稻各株系T2代叶片提取总RNA,经RNase freeDNase (Promega)处理总RNA后各取2 ug进行反转录。分装-20℃保存。

根据拟南芥的actin序列设计引物

进行RT-PCR对目的基因AsPCSl和AsMT2a的表达水平进行检测。

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