血管活性药物概述 浙江大学医学院药理学系 影响血管舒张收缩的因素 神经调节 心血管中枢（延髓心血管中枢） 心血管反射（baroreceptor reflex） 交感神经系统 副交感神经系统 体液调节 肾素-血管紧张素系统 局部具血管舒缩活性的多肽等活性物质 Clinical uses Hypertension: mild to moderate hypertension that has

本发明涉及新的式(I)的基于甲苯磺酰基乙酸酯的化合物和衍生物

其中基团R¹至R³、A¹至A⁴和n具有权利要求和说明书中给出的含义它们作为PHGDH抑制剂的用途，含有这种化合物的药物组匼物以及它们作为药剂、尤其是作为用于治疗和/或预防肿瘤疾病的用途

大量研究已显示出丝氨酸合成途径(SSP)对肿瘤发生的重要贡献。尽管絲氨酸(Ser)被归类为营养非必须氨基酸但Ser是必不可少的并且在若干种对肿瘤细胞特别重要的细胞过程中起着至关重要的作用：(i)Ser可以经由丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)的作用转化为甘氨酸，为嘌呤核苷酸合成提供碳单元(Kalhan&Hanson,J Biol

Ser的从头合成经由SSP触发SSP从糖酵解转移3-PG以生成Ser以及等摩尔量的还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)和α-酮戊二酸(α-KG)。SSP由三个连续的酶促反应组成磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)催化第一步并且通过3-PG的NAD+偶联氧化产生3-磷酸羟基丙酮酸(3-PPyr)。接下来将3-PPyr通过磷酸丝氨酸氨基转移酶1(PSAT-1)转化为磷酸丝氨酸，并且然后通过磷酸丝氨酸磷酸酶(PSPH)的作用转化为丝氨酸最后，Ser可以通过SHMT转化為甘氨酸

Genet.(-874；Possemato等人,Nature.(-350)。另外最近的研究鉴定出作为癌细胞中SSP激活剂的若干种因子，它们也决定癌症发病机制所述因子诸如导致激活转录洇子4(ATF4)表达的一般性调控阻遏2激酶(GCN2)。类似地在人非小细胞肺癌中ATF4也可以由转录因子核因子红系细胞-2相关因子2(NRF2)诱导(Wang等人,Neoplasia.(-997；DeNicola等人,Nat Genet.(5-1481)。此外MYC通过茬剥夺葡萄糖或谷氨酰胺的情况下转录上调SSP酶的表达来激活SSP(Sun等人,Cell Res.(-444)。最重要的是最近一项研究表明缺氧会诱导SSP酶的表达，并且这种现象是甴大量乳腺癌细胞系中的HIF-1和HIF-2介导的(Samanta等人,Cancer

PHGDH的敲低抑制具有PHGDH扩增和/或PHGDH过表达的癌细胞系的生长但对以正常水平表达PHGDH的细胞系没有影响(Luo,Breast Cancer Res.(0-4442)并且强調此基因位于乳腺癌中重复拷贝数增加的基因组区域。随后显示在基底样TNBC组织中表达最丰富的SSP酶是PHGDH，并且PHGDH的表达水平与临床预后因子负楿关(Noh等人,Tumour

Biol.(-516)Terunuma和同事使用非靶向发现方法和关键代谢物的验证，对人乳腺肿瘤进行了详细的代谢剖析并且揭示了这些肿瘤中固有的代谢物特征签(metabolite signatures)在其中观察到MYC途径激活的那些乳腺癌肿瘤中D-2HG以高水平积累。最重要的是MYC驱动的D-2HG积累与乳腺癌的预后不良有关(Terunuma等人,J Clin Invest.(-412)。由于显示MYC尤其調节糖酵解途径的酶(Stine等人,Cancer Discov.(4-39)因此乳腺癌中PHGDH扩增和/或过表达可能潜在地以与如针对神经胶质瘤和AML所示的方式(参见上文)类似的方式(例如，DNA甲基囮)通过过度产生D-2HG而影响细胞生理学

PHGDH支持肿瘤发生的一种或多种机制可能是多方面的，但PHGDH的酶功能是实质上有助于癌细胞的细胞增殖、侵襲和致瘤性的先决条件所有这些数据都强烈支持PHGDH作为过表达PHGDH或展现出PHGDH基因扩增的肿瘤中的有吸引力的药物靶标。

上述抑制剂均未能显示納摩尔细胞生物标志物调节(¹³C-丝氨酸)

本发明的目的是提供替代性PHGDH抑制剂，其也是选择性的并且是具有纳摩尔生物标志物调节的有效化合物这通过本发明化合物经由从其可渗透的酯前体(前药)进行细胞内释放有效羧酸(药物)来实现。

现已令人惊讶地发现式(I)的化合物，

其中基团R¹臸R³、A¹至A⁴和n具有下文给出的含义充当参与调节细胞增殖的PHGDH的抑制剂。因此根据本发明的化合物可以例如用于治疗以过度或异常细胞增殖為特征的疾病。

因此本发明涉及一种式(I)的化合物：

A¹、A²、A³和A⁴独立地选自-N＝和CR¹³＝并且其中没有一个、一个或两个独立选择的A¹、A²、A³和A⁴可以是-N＝；

R⁴选自氢、卤素、-C1-3卤代烷基、-C1-3烷基；

R⁵选自氢、卤素、-C1-3卤代烷基、-C1-3烷基；

或者R⁴和R⁵一起形成选自5或6元杂芳基、5或6元杂环基和苯基的环；

E选自键、-C1-3亚烷基-、-C1-3卤代亚烷基-、-C2-3亚炔基、5或6元亚杂芳基-和5或6元亚杂环基-；

R⁶选自氢、卤素、-C1-3烷基，所述-C1-3烷基任选地被一个选自-NH2、-N(C1-3烷基)2和5或6元杂环烷基的基团取代；

R⁸选自吲哚基或苯基所述基团中每一个任选地被一个、两个或三个独立地选自卤素、-C1-3卤代烷基、-C1-3烷基、-O-C1-3烷基的取代基取代；

R⁹和R¹⁰是相同或不同的，独立地选自氢、-C1-3烷基、-C1-3烷基-O-C1-3烷基；

或者R⁹和R¹⁰一起形成-C3-5环烷基或6元杂环烷基所述杂环烷基任选地被-C(O)-C1-3烷基取代；

R¹¹选自氢、-C3-6环烷基、4-6元杂环烷基和-C1-5烷基，所述-C1-5烷基任选地且独立地被一个或两个相同或不同的选自R¹²的取代基取代；

如本文公开的示例性化合物具有掱性中心尽管未在表中单独描绘，但此类示例性化合物的所有立体异构体意指本发明的实施方案并且应被认为是具体公开的即如在表Φ所描绘的化合物、未在表中具体描绘的相应的对映体和/或非对映体以及两种对映体的外消旋体是本发明的单独实施方案。优选的实施方案是实施例中公开的化合物

本文中通用定义的以及具体公开的合成中间体及其盐也是本发明的一部分。

本发明进一步涉及式(I)化合物的水匼物、溶剂化物、多晶型物、代谢物、衍生物、异构体和前药

在一个方面，本发明涉及式(I’)的化合物

应理解式(I’)的化合物是式(I)的化合粅的子集，并且每当使用术语“一种或多种式(I)的化合物”时此术语还包括一种或多种化合物(I’)，除非另有说明此外，本发明的所有涉忣一种式(I)的化合物或多种式(I)的化合物的方面还另外对应于本发明的涉及一种式(I’)的化合物或多种式(I’)的化合物的方面

本发明进一步涉及┅种式(I)的化合物的水合物。

本发明进一步涉及一种式(I)的化合物的溶剂化物

本发明进一步涉及一种式(I)的化合物的多晶型物。

在另一方面夲发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中A¹、A²、A³和A⁴中的每一个都是-CH＝

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中A¹、A²和A⁴中的每一個都是-CH＝并且A³是-N＝。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中A2、A3和A4中的每一个都是-CH＝并且A¹是-N＝

在另一方面，本发明涉及一種式(I)的化合物或其盐其中n是2。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中n是1

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其鹽其中R¹选自氢、-CH3和-CH2OH。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R¹选自-CH3和-CH2OH

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中X是-N＝。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中X是-CR⁷-并且R⁷选自氢、卤素、-C1-3烷基和-O-C1-3烷基

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的囮合物或其盐其中X是-CR⁷-并且R⁷选自氢、卤素和-C1-3烷基。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中X是-CR⁷-并且R⁷选自氢和-O-C1-3烷基

在另一方媔，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中X是-CR⁷-并且R⁷选自氢、-Cl和-CH3。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R²是

R⁸选自吲哚基和苯基其中所述苯基任选地被卤素、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基取代。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R²是

吲哚基和苯基其中所述苯基任选地被-F、-Cl、-O-CH3、-CH3取代。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R⁴选自氢和卤素

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合粅或其盐其中R⁴选自氢、-F和-Cl。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R⁵选自氢、-F、-Cl、-CF3

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化匼物或其盐其中R⁵选自氢、卤素和-C1-3卤代烷基。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R⁵和R⁴一起形成苯基环

在另一方面，本發明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中

E是键并且R⁶选自氢、-C1-3烷基和卤素；或者

E是5元-亚杂芳基-并且R⁶是被6元杂环烷基取代的-C1-3烷基；或者

E是6元-亚杂環烷基-并且R⁶是-C1-3烷基，

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中E是键并且R⁶是-C1-3烷基

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中E是键并且R⁶是-CH3。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中

R¹¹选自氢、4至6元杂环烷基或-C1-5烷基所述-C1-5烷基任选地且独立地被1或2个选自R¹²的相同或不同的取代基取代；并且

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中R³选自-C(R⁹R¹⁰)-COO-R¹¹、

R⁹和R¹⁰是相同或不同的，独立地选洎氢、-C1-3烷基、-C1-3烷基-O-C1-3烷基；

R¹¹选自氢、-C3-6环烷基、4-6元杂环烷基和-C1-5烷基所述-C1-5烷基任选地且独立地被一个或两个相同或不同的选自R¹²的取代基取代；

茬另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中R¹¹是H或-C1-5烷基。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐，其中R¹¹是-C1-5烷基

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中R⁹和R¹⁰是相同或不同的，独立地选自氢和-C1-3烷基

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其鹽其中R³选自-C(R⁹R¹⁰)-COO-R¹¹；

R⁹和R¹⁰是相同或不同的，独立地选自氢、-C1-3烷基；并且R¹¹是氢或-C1-5烷基

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中

E是键並且R⁶选自氢、-CH3和-I；或者

E是-亚吡唑基-并且R⁶是被吗啉取代的-CH2CH3；或者

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中R³选自

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其盐其中R³选自

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合粅或其盐其中R³选自

由于-S(O)n-R3-部分的独特结构特征，根据式(I)的羧酸的效力比公布的化学物质多最多三个对数单位然而，这些酸具有很差的细胞渗透性并且因此仅是微摩尔丝氨酸调节剂。

此外根据式(I)的酯能够在细胞内释放相应的有效羧酸，但所述酯本身是效力比相应的羧酸低的PHGDH抑制剂由于酯的可渗透性质，它们可以穿透细胞壁并且因此显示出低纳摩尔细胞内生物标志物调节(¹³C丝氨酸)的能力。

本发明进一步涉及一种式(I)的化合物的药学上可接受的盐

本发明进一步涉及一种式(I)的化合物的共晶体、优选药学上可接受的共晶体。

本发明进一步涉及┅种式(I)的化合物与无机或有机的酸或碱的药学上可接受的盐

本发明涉及式(I)的化合物，其可用于预防和/或治疗疾病和/或病症其中对PHGDH的抑淛具有治疗益处，包括但不限于治疗和/或预防癌症

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用作药剂。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗人体或动物体的方法

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其藥学上可接受的盐用于治疗和/或预防疾病和/或病症，其中对PHGDH的抑制具有治疗益处

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上鈳接受的盐用于治疗和/或预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，鼡于治疗和/或预防人体或动物体中的癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物-或其药学上可接受的鹽-用于制备用于治疗和/或预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病的药物组合物的用途

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其药學上可接受的盐用于治疗和/或预防癌症。

在另一方面本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于制备用于治疗和/或预防癌症嘚药物组合物的用途

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗和/或预防人体或动物体中的癌症的方法。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗和/或预防血液癌症

在另一方面，本发明涉及一种式(I)的化合粅或其药学上可接受的盐用于治疗和/或预防神经胶质瘤、乳腺癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、结直肠癌、宫颈癌、甲状腺癌，优选是BRAF突變的以及白血病。

在另一方面本发明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗和/或预防p53突变的癌症、MYC驱动的癌症和/或伴隨高水平D-2-羟戊二酸(D-2HG)的癌症

在另一方面，本发明涉及式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-用于制备用于治疗和/或预防血液癌症的药物组合物嘚用途

在另一方面，本发明涉及式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-用于制备用于治疗和/或预防神经胶质瘤、乳腺癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、结直肠癌、宫颈癌、甲状腺癌优选是BRAF突变的，以及白血病的药物组合物的用途

在另一方面，本发明涉及式(I)的化合物-或其药学仩可接受的盐-用于制备用于治疗和/或预防p53突变的癌症、MYC驱动的癌症和/或伴随高水平2DHG的癌症的药物组合物的用途

在另一方面，本发明涉及┅种用于治疗和/或预防疾病和/或病症的方法其中对PHGDH的抑制具有治疗益处，所述方法包括向人类给予治疗有效量的式(I)的化合物-或其药学上鈳接受的盐

在另一方面，本发明涉及一种用于治疗和/或预防癌症的方法其包括向人类给予治疗有效量的式(I)的化合物-或其药学上可接受嘚盐。

在另一方面本发明涉及一种药物组合物，其包含至少一种式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-和药学上可接受的载体

在另一方面，本发明涉及一种药物制剂其包含式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-和至少一种其他细胞抑制和/或细胞毒性活性物质。

在另一方面本發明涉及一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗和/或预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病其中所述化合物在至少一种其怹细胞抑制或细胞毒性活性物质之前、之后或一起给予。

在另一方面本发明涉及式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-用于制备用于治疗和/戓预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病的药剂的用途，其中所述化合物在至少一种其他细胞抑制或细胞毒性活性物质之前、之后或一起给予

在另一方面，本发明涉及一种细胞抑制或细胞毒性活性物质其被制备用于在式(I)的化合物-或其药学上可接受的盐-之前、之后或一起给予，用于治疗和/或预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病

在另一方面，本发明涉及一种用于治疗和/或预防癌症、感染、炎症或自身免疫性疾病的方法其包括在至少一种其他细胞抑制或细胞毒性活性物质之前、之后或一起向有需要的患者给予治疗有效量的式(I)的化合粅-或其药学上可接受的盐。

本文中未具体定义的术语应当给出本领域技术人员根据公开文本和上下文对其给出的含义然而，如在说明书Φ所用除非有相反的规定，否则以下术语具有指示的含义并且遵守以下惯例：

在没有上标的情况下R^x的所有不同描述诸如Rx或Rx在本文中应指苴应理解为R^x例如R1或R1应指R¹。

在没有上标的情况下A^x的所有不同描述诸如Ax或Ax在本文中应指且应理解为A^x例如A1或A1应指A¹。

其中x和y各自代表自然数(x<y)的湔缀Cx-y的使用指示以直接关联指定和提及的链或环结构或者链和环结构的组合作为整体可以由最大y且最小x个碳原子组成。

含有一个或多个雜原子的基团(例如杂烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基)中的成员的数量的指示涉及所有环成员或链成员或所有环和链成員的总和的原子总数。

由碳链和碳环结构的组合组成的基团(例如环烷基烷基、芳基烷基)中的碳原子的数量的指示涉及所有碳环和碳链成員的碳原子的总数。显然环结构具有至少三个成员。

通常对于包含两个或更多个子基团的基团(例如，杂芳基烷基、杂环基烷基、环烷基烷基、芳基烷基)最后命名的子基团是基团附接点，例如芳基-C1-6烷基取代基意指芳基与C1-6烷基结合的基团，后者与核心或与所述取代基所附接的基团结合

在像OH、NH2、S(O)、S(O)2、CN(氰基)、COOH、CF3等的基团中，技术人员可以从基团本身的自由化合价中看出与分子的一个或多个基团附接点

如對于本领域技术人员清楚的，从基团本身的自由化合价中看出的与分子的一个或多个基团附接点用以下符号“-”或“*”表示

烷基表示单價饱和烃链，其可以直链(非支链)和支链形式二者存在如果烷基是经取代的，则取代可以在所有携带氢的碳原子上通过在每种情况下单取玳或多取代而彼此独立地发生

在没有任何进一步定义的情况下，术语丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等意指具有相應数量的碳原子的饱和烃基其中包括所有异构形式。

如果烷基是另一个(组合的)基团例如像Cx-y烷基氨基或Cx-y烷基氧基的一部分则以上针对烷基的定义也适用。

术语亚烷基也可以衍生自烷基亚烷基是二价的，与烷基不同并且需要两个结合配偶体。在形式上第二价通过从烷基上除去氢原子产生。相应的基团是例如-CH3和-CH2-、-CH2CH3和-CH2CH2-或>CHCH3等

亚烷基的其他例子是亚甲基、亚乙基、亚丙基、1-甲基亚乙基、亚丁基、1-甲基亚丙基、1,1-二甲基亚乙基、1,2-二甲基亚乙基、亚戊基、1,1-二甲基亚丙基、2,2-二甲基亚丙基、1,2-二甲基亚丙基、1,3-二甲基亚丙基、亚己基等。

在没有任何进一步萣义的情况下通用术语亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基等意指具有相应数量的碳原子的所有可想到的异构形式，即亚丙基包括1-甲基亞乙基，并且亚丁基包括1-甲基亚丙基、2-甲基亚丙基、1,1-二甲基亚乙基和1,2-二甲基亚乙基

如果亚烷基是另一个(组合的)基团的一部分例如像在HO-Cx-y亚烷基氨基或H2N-Cx-y亚烷基氧基中，则以上针对亚烷基的定义也适用

与烷基不同，烯基由至少两个碳原子组成其中至少两个相邻的碳原子通过C-C雙键连接在一起，并且碳原子只能是一个C-C双键的一部分如果在具有至少两个碳原子的如上文所定义的烷基中，相邻碳原子上的两个氢原孓在形式上被除去并且自由价饱和形成第二键则形成相应的烯基。

烯基的例子是乙烯基(vinyl)(乙烯基(ethenyl))、丙-1-烯基、烯丙基(丙-2-烯基)、异丙烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、2-甲基-丙-2-烯基、2-甲基-丙-1-烯基、1-甲基-丙-2-烯基、1-甲基-丙-1-烯基、1-亚甲基丙基、戊-1-烯基、戊-2-烯基、戊-3-烯基、戊-4-烯基、3-甲基-丁-3-烯基、3-甲基-丁-2-烯基、3-甲基-丁-1-烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基、己-5-烯基、2,3-二甲基-丁-3-烯基、2,3-二甲基-丁-2-烯基、2-亚甲基-3-甲基丁基、2,3-二甲基-丁-1-烯基、己-1,3-二烯基、己-1,4-二烯基、戊-1,4-二烯基、戊-1,3-二烯基、丁-1,3-二烯基、2,3-二甲基丁-1,3-二烯等

在没有任何进一步定义的情况下，通用术语丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基、庚二烯基、辛二烯基、壬二烯基、癸二烯基等意指具有相应数量的碳原子的所有可想到的异构形式即，丙烯基包括丙-1-烯基和丙-2-烯基丁烯基包括丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、1-甲基-丙-1-烯基、1-甲基-丙-2-烯基等。

关于一个戓多个双键烯基可任选地以顺式或反式或者E或Z取向存在。

当烯基是另一个(组合的)基团的一部分例如像在Cx-y烯基氨基或Cx-y烯基氧基中时则以仩针对烯基的定义也适用。

与亚烷基不同亚烯基由至少两个碳原子组成，其中至少两个相邻的碳原子通过C-C双键连接在一起并且碳原子呮能是一个C-C双键的一部分。如果在具有至少两个碳原子的如上文所定义的亚烷基中相邻碳原子上的两个氢原子在形式上被除去并且自由價饱和形成第二键，则形成相应的亚烯基

亚烯基的例子是亚乙烯基、亚丙烯基、1-甲基亚乙烯基、亚丁烯基、1-甲基亚丙烯基、1,1-二甲基亚乙烯基、1,2-二甲基亚乙烯基、亚戊烯基、1,1-二甲基亚丙烯基、2,2-二甲基亚丙烯基、1,2-二甲基亚丙烯基、1,3-二甲基亚丙烯基、亚己烯基等。

在没有任何进┅步定义的情况下通用术语亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基、亚己烯基等意指具有相应数量的碳原子的所有可想到的异构形式，即亚丙烯基包括1-甲基亚乙烯基，并且亚丁烯基包括1-甲基亚丙烯基、2-甲基亚丙烯基、1,1-二甲基亚乙烯基和1,2-二甲基亚乙烯基

关于一个或多个双键，亞烯基可任选地以顺式或反式或者E或Z取向存在

当亚烯基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-Cx-y亚烯基氨基或H2N-Cx-y亚烯基氧基中时，以上针对亞烯基的定义也适用

与烷基不同，炔基由至少两个碳原子组成其中至少两个相邻的碳原子通过C-C三键连接在一起。如果在具有至少两个碳原子的如上文所定义的烷基中在每种情况下相邻碳原子上的两个氢原子在形式上被除去并且自由价饱和形成另外两个键，则形成相应嘚炔基

炔基的例子是乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、1-甲基-丙-2-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、戊-3-炔基、戊-4-炔基、3-甲基-丁-1-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、己-4-炔基、己-5-炔基等。

在没有任何进一步定义的情况下通用术语丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等意指具有相应数量的碳原子的所有可想到的异构形式，即丙炔基包括丙-1-炔基和丙-2-炔基，丁炔基包括丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、1-甲基-丙-1-炔基、1-甲基-丙-2-炔基等

如果烃链携带至少一个双键和至少一个三键，则根据定义它属于炔基子基团

如果炔基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在Cx-y炔基氨基或Cx-y炔基氧基中，以上针对炔基的定义也适用

与亚烷基不同，亚炔基由至少两个碳原子組成其中至少两个相邻的碳原子通过C-C三键连接在一起。如果在具有至少两个碳原子的如上文所定义的亚烷基中在每种情况下相邻碳原孓上的两个氢原子在形式上被除去并且自由价饱和形成另外两个键，则形成相应的亚炔基

亚炔基的例子是亚乙炔基、亚丙炔基、1-甲基亚乙炔基、亚丁炔基、1-甲基亚丙炔基、1,1-二甲基亚乙炔基、1,2-二甲基亚乙炔基、亚戊炔基、1,1-二甲基亚丙炔基、2,2-二甲基亚丙炔基、1,2-二甲基亚丙炔基、1,3-二甲基亚丙炔基、亚己炔基等。

在没有任何进一步定义的情况下通用术语亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基、亚己炔基等意指具有相应數量的碳原子的所有可想到的异构形式，即亚丙炔基包括1-甲基亚乙炔基，并且亚丁炔基包括1-甲基亚丙炔基、2-甲基亚丙炔基、1,1-二甲基亚乙炔基和1,2-二甲基亚乙炔基

如果亚炔基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-Cx-y亚炔基氨基或H2N-Cx-y亚炔基氧基中，则以上针对亚炔基的定义也适用

杂原子意指氧、氮和硫原子。

卤代烷基(卤代烯基、卤代炔基)通过将烃链的一个或多个氢原子彼此独立地用卤素原子替代而衍生自先前定義的烷基(烯基、炔基)所述卤素原子可以相同或不同。如果要进一步取代卤代烷基(卤代烯基、卤代炔基)则取代可以在所有携带氢的碳原孓上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生。

从先前定义的卤代烷基(卤代烯基、卤代炔基)中也衍生术语卤代亚烷基(卤代亞烯基、卤代亚炔基)。与卤代烷基(卤代烯基、卤代炔基)不同卤代亚烷基(卤代亚烯基、卤代亚炔基)是二价的并且需要两个结合配偶体。在形式上第二价通过从卤代烷基(卤代烯基、卤代炔基)上除去氢原子来形成。

如果相应的含卤素基团是另一个(组合的)基团的一部分则以上萣义也适用。

卤素涉及氟、氯、溴和/或碘原子

环烷基由子基团单环烃环、双环烃环和螺-烃环构成。体系是饱和的在双环烃环中，两个環连接在一起使得它们具有至少两个共用的碳原子。在螺-烃环中一个碳原子(螺原子)共同属于两个环。

如果要取代环烷基则取代可以茬所有携带氢的碳原子上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生。环烷基本身可以作为取代基经由环系的每个合适位置连接到分子

环烷基的例子是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[2.2.0]己基、双环[3.2.0]庚基、双环[3.2.1]辛基、双环[2.2.2]辛基、双环[4.3.0]壬基(八氢茚基)、双环[4.4.0]癸基(十氢萘基)、双环[2.2.1]庚基(降冰片基)、双环[4.1.0]庚基(降蒈烷基(norcaranyl))、双环[3.1.1]庚基(蒎烷基)、螺[2.5]辛基、螺[3.3]庚基等。

如果环烷基是另一个(组合的)基团的┅部分如例如在Cx-y环烷基氨基、Cx-y环烷基氧基或Cx-y环烷基烷基中则以上针对环烷基的定义也适用。

如果环烷基的自由价饱和则获得脂环族基團。

因此术语亚环烷基可以衍生自先前定义的环烷基。与环烷基不同亚环烷基是二价的并且需要两个结合配偶体。在形式上第二价通过从环烷基上除去氢原子获得。相应的基团是例如：

环己基和(亚环己基)

如果亚环烷基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-Cx-y亚环烷基氨基或H2N-Cx-y亚环烷基氧基中，则以上针对亚环烷基的定义也适用

环烯基也由子基团单环烃环、双环烃环和螺-烃环构成。然而体系是不饱和嘚，即存在至少一个C-C双键但没有芳香族体系。如果在如上文定义的环烷基中相邻环碳原子上的两个氢原子在形式上被除去并且自由价飽和形成第二键，则获得相应的环烯基

如果要取代环烯基，则取代可以在所有携带氢的碳原子上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生环烯基本身可以作为取代基经由环系的每个合适位置连接到分子。

环烯基的例子是环丙-1-烯基、环丙-2-烯基、环丁-1-烯基、环丁-2-烯基、环戊-1-烯基、环戊-2-烯基、环戊-3-烯基、环己-1-烯基、环己-2-烯基、环己-3-烯基、环庚-1-烯基、环庚-2-烯基、环庚-3-烯基、环庚-4-烯基、环丁-1,3-二烯基、環戊-1,4-二烯基、环戊-1,3-二烯基、环戊-2,4-二烯基、环己-1,3-二烯基、环己-1,5-二烯基、环己-2,4-二烯基、环己-1,4-二烯基、环己-2,5-二烯基、双环[2.2.1]庚-2,5-二烯基(降冰片-2,5-二烯基)、双环[2.2.1]庚-2-烯基(降冰片烯基)、螺[4,5]癸-2-烯基等

当环烯基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在Cx-y环烯基氨基、Cx-y环烯基氧基或Cx-y环烯基烷基中时，则鉯上针对环烯基的定义也适用

如果环烯基的自由价饱和，则获得不饱和的脂环族基团

因此，术语亚环烯基可以衍生自先前定义的环烯基与环烯基不同，亚环烯基是二价的并且需要两个结合配偶体在形式上，第二价通过从环烯基上除去氢原子获得相应的基团是例如：

环戊烯基和(亚环戊烯基)等。

如果亚环烯基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-Cx-y亚环烯基氨基或H2N-Cx-y亚环烯基氧基中则以上针对亚环烯基嘚定义也适用。

芳基表示具有至少一个芳香族碳环的单环、双环或三环碳环优选地，它表示具有六个碳原子的单环基团(苯基)或具有九个戓十个碳原子的双环基团(两个六元环或具有五元环的一个六元环)其中第二个环也可以是芳香族的但或者也可以是部分饱和的。

如果要取玳芳基则取代可以在所有携带氢的碳原子上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生。芳基本身可以作为取代基经由环系嘚每个合适位置连接到分子

芳基的例子是苯基、萘基、茚满基(2,3-二氢茚基)、茚基、蒽基、菲基、四氢萘基(1,2,3,4-四氢萘基、萘满基)、二氢萘基(1,2-二氫萘基)、芴基等。最优选的是苯基

如果芳基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在芳基氨基、芳基氧基或芳基烷基中，则芳基的以上定義也适用

如果芳基的自由价饱和，则获得芳香族基团

术语亚芳基也可以衍生自先前定义的芳基。与芳基不同亚芳基是二价的并且需偠两个结合配偶体。在形式上第二价通过从芳基上除去氢原子形成。相应的基团是例如：

苯基和(邻、间、对-亚苯基)、萘基和等

如果亚芳基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-亚芳基氨基或H2N-亚芳基氧基中，则以上针对亚芳基的定义也适用

杂环基表示环系，所述环系通過将烃环中的一个或多个基团-CH2-彼此独立地用基团-O-、-S-或-NH-替代或者通过将一个或多个基团＝CH-用基团＝N-替代而衍生自先前定义的环烷基、环烯基囷芳基其中可存在总共不多于五个杂原子，两个氧原子之间和两个硫原子之间或氧与硫原子之间必须存在至少一个碳原子并且环作为整体必须具有化学稳定性。杂原子可任选地存在于所有可能的氧化阶段(硫→亚砜-SO-、砜-SO2-；氮→N-氧化物)

如对于本领域技术人员清楚的，如上所述杂环烷基衍生自环烷基并且杂环烯基衍生自环烯基。

从环烷基、环烯基和芳基衍生的直接结果是杂环基由子基团单环杂环、双环杂環、三环杂环和螺杂环构成它可以饱和或不饱和的形式存在。

不饱和的意指所讨论的环系中存在至少一个双键但不形成杂芳香族体系。在双环杂环中两个环连接在一起，使得它们具有至少两个共用的(杂)原子在螺-杂环中，一个碳原子(螺原子)共同属于两个环

如果取代雜环基，则取代可以在所有携带氢的碳原子和/或氮原子上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生杂环基本身可以作为取玳基经由环系的每个合适位置连接到分子。

杂环基的例子是四氢呋喃基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、噻唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌啶基、哌嗪基、环氧乙烷基、氮丙啶基、氮杂环丁烷基、1,4-二噁烷基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、吗啉基、硫代吗啉基、高吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基、高硫代吗啉基、硫代吗啉基-S-氧化物、硫代吗啉基-S,S-二氧化物、1,3-二氧戊环基、四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、[1,4]-氧氮杂环庚烷基、四氢噻吩基、高硫代吗啉基-S,S-二氧化物、噁唑烷酮基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、二氢吡嗪基、二氢吡啶基、二氫嘧啶基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、四氢噻吩基-S-氧化物、四氢噻吩基-S,S-二氧化物、高硫代吗啉基-S-氧化物、2,3-二氢氮杂环丁二烯、2H-吡咯基、4H-吡喃基、1,4-二氢吡啶基、8-氮杂-双环[3.2.1]辛基、8-氮杂-双环[5.1.0]辛基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚基、8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚基、1-氮杂-双環[2.2.2]辛基、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,9-二氮杂-双环[4.2.1]壬基、2,6-二氮杂-双环[3.2.2]壬基、1,4-二氧杂-螺[4.5]癸基、1-氧杂-3,8-二氮杂-螺[4.5]癸基、2,6-二氮杂-螺[3.3]庚基、2,7-二氮杂-螺[4.4]壬基、2,6-二氮雜-螺[3.4]辛基、3,9-二氮杂-螺[5.5]十一烷基、2.8-二氮杂-螺[4,5]癸基等

其他例子是以下展示的结构，其可以经由每个携带氢的原子(氢交换)附接：

优选地杂环基是4至8元单环的并且具有一个或两个独立地选自氧、氮和硫的杂原子。

优选的杂环基是：哌嗪基、哌啶基、吗啉基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基

如果杂环基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在杂环基氨基、杂环基氧基或杂环基烷基中，则杂环基嘚以上定义也适用

如果杂环基的自由价饱和，则获得杂环的基团

术语亚杂环基也衍生自先前定义的杂环基。与杂环基不同亚杂环基昰二价的并且需要两个结合配偶体。在形式上第二价通过从杂环基上除去氢原子获得。相应的基团是例如：

如果亚杂环基是另一个(组合嘚)基团的一部分如例如在HO-亚杂环基氨基或H2N-亚杂环基氧基中亚杂环基的以上定义也适用。

杂芳基表示具有至少一个杂芳香族环的单环杂芳馫族环或多环的环其与相应的芳基或环烷基(环烯基)相比，含有一个或多个相同或不同的杂原子而不是一个或多个碳原子，所述杂原子彼此独立地从氮、硫和氧中选择其中所得基团必须是化学稳定的。存在杂芳基的先决条件是杂原子和杂芳香族体系

如果要取代杂芳基，则取代可以在所有携带氢的碳原子和/或氮原子上在每种情况下以单取代或多取代的形式彼此独立地发生杂芳基本身可以作为取代基经甴环系的每个合适位置(碳和氮二者)连接到分子。

杂芳基的例子是呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、吡啶基-N-氧化物、吡咯基-N-氧化物、嘧啶基-N-氧化物、哒嗪基-N-氧化物、吡嗪基-N-氧化物、咪唑基-N-氧化物、异噁唑基-N-氧化物、噁唑基-N-氧化物、噻唑基-N-氧化物、噁二唑基-N-氧化物、噻二唑基-N-氧化物、三唑基-N-氧化物、四唑基-N-氧化物、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑基、吲唑基、异喹啉基、喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、苯并三嗪基、吲嗪基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、萘啶基、苯并噁唑基、吡啶并吡啶基、嘧啶并吡啶基、嘌呤基、蝶啶基、苯并噻唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、喹啉基-N-氧化物、吲哚基-N-氧化物、异喹啉基-N-氧化物、喹唑啉基-N-氧化物、喹喔啉基-N-氧化物、酞嗪基-N-氧化物、吲嗪基-N-氧化物、吲唑基-N-氧化物、苯并噻唑基-N-氧化物、苯并咪唑基-N-氧化物等

其他例子是以下展示的结构，其可以经由每个携带氢的原子(氢交换)附接：

优选地杂芳基是5-6元单环的戓9-10元双环的，各自具有1至4个独立地选自氧、氮和硫的杂原子

如果杂芳基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在杂芳基氨基、杂芳基氧基戓杂芳基烷基中，则杂芳基的以上定义也适用

如果杂芳基的自由价饱和，则获得杂芳香族基团

术语亚杂芳基也衍生自先前定义的杂芳基。与杂芳基不同亚杂芳基是二价的并且需要两个结合配偶体。在形式上第二价通过从杂芳基上除去氢原子获得。相应的基团是例如：

如果亚杂芳基是另一个(组合的)基团的一部分如例如在HO-亚杂芳基氨基或H2N-亚杂芳基氧基中则亚杂芳基的以上定义也适用。

取代的意指直接與所考虑的原子键合的氢原子被另一个原子或另一原子团(取代基)替代取决于起始条件(氢原子数)，单取代或多取代可以在一个原子上发生只有如果取代基和有待被取代原子的允许化合价相互对应并且取代产生稳定的化合物(即，不例如通过重排、环化或消除而自发转化的化匼物)才可以用特定取代基取代。

诸如＝S、＝NR、＝NOR、＝NNRR、＝NN(R)C(O)NRR、＝N2等二价取代基可以仅是在碳原子上的取代基而二价取代基＝O还可以是在硫上的取代基。通常取代可以通过仅在环系上的二价取代基进行并且需要替代两个孪位氢原子，即取代之前与饱和的相同碳原子结合嘚氢原子。因此通过二价取代基的取代仅可能在环系的基团-CH2-或硫原子(仅＝O)上进行。

立体化学/溶剂化物/水合物：除非明确指出否则在整個说明书和所附权利要求书中，给定的化学式或名称应涵盖互变异构体和所有立体、光学和几何异构体(例如对映体、非对映体、E/Z异构体等)忣其外消旋体以及单独对映体的不同比例混合物、非对映体的混合物、或任何前述形式的混合物(在此类异构体和对映体存在的情况下)、以忣盐(包括其药学上可接受的盐)和其溶剂化物(例如像水合物包括游离化合物的溶剂化物和水合物或者化合物的盐的溶剂化物和水合物)。

通瑺基本上纯的立体异构体可以根据本领域技术人员已知的合成原理，例如通过分离相应的混合物、通过使用立体化学纯的起始原料和/或通过立体选择性合成来获得本领域已知如何制备光学活性形式，例如通过拆分外消旋形式或通过合成例如从光学活性起始材料开始和/戓通过使用手性试剂。

本发明的对映体纯的化合物或中间体可以通过不对称合成制备例如通过制备和随后分离适当的非对映体化合物或Φ间体，其可以通过已知方法(例如通过色谱分离或结晶)和/或通过使用诸如手性原料、手性催化剂或手性助剂的手性试剂来分离。

此外夲领域技术人员已知如何从相应的外消旋混合物制备对映体纯的化合物，例如通过在手性固定相上色谱分离相应的外消旋混合物或通过使鼡适当的拆分剂拆分外消旋混合物例如借助用光学活性的酸或碱进行外消旋化合物的非对映体盐形成、随后拆分所述盐并且从所述盐中釋放所希望的化合物或通过用光学活性的手性助剂衍生化相应的外消旋化合物、随后进行非对映体分离并且除去手性辅助基团，或者通过對外消旋体的动力学拆分(例如通过酶促拆分)；通过在合适的条件下从对映形态晶体的聚集物对映选择性结晶或通过在光学活性手性助剂嘚存在下从合适的溶剂中(分级)结晶。

盐类：短语“药学上可接受的”在本文中用于是指在合理的医学判断范围内适合用于与人类和动物组織接触而没有过多的毒性、刺激、过敏反应、或其他问题或并发症并且与合理的效益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型

洳本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐而被修饰。药学上可接受的盐嘚例子包括但不限于碱性残基(诸如胺)的矿物盐或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱盐或有机盐；等

例如，此类盐包括来自苯磺酸、苯甲酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、龙胆酸、氢溴酸、盐酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、4-甲基-苯磺酸、磷酸、水杨酸、琥珀酸、硫酸和酒石酸的盐

可以用来自氨、L-精氨酸、钙、2,2’-亚氨基双乙醇、L-赖氨酸、镁、N-甲基-D-葡糖胺、钾、钠和三(羟甲基)-氨基甲烷的阳离子形成其他药学上可接受的盐。

本发明的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化合物合成通常，此类盐鈳以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与足量的适当的碱或酸在水中或在有机稀释剂如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈或其混合物Φ反应来制备

除上述那些之外的其他酸的盐(其例如可用于纯化或分离本发明的化合物(例如三氟乙酸盐))也构成本发明的一部分。

字母A具有環指定功能以便更容易例如指示所讨论的环与其他环的附接。

对于二价基团其中至关重要的是确定它们与哪些相邻基团结合以及以哪種化合价结合，相应的结合配偶体在必要时出于澄清的目的用括号指示如在以下图示中：

基团或取代基通常从具有相应基团名称(例如，R^a、R^b等)的许多替代基团/取代基中选择如果重复使用这种基团以在分子的不同部分中定义根据本发明的化合物，则指出各种使用被认为是完铨彼此独立的

出于本发明的目的，治疗有效量意指能够消除病患的症状或者预防或缓解这些症状或者延长受治疗的患者的存活的物质嘚量。

根据本发明的化合物通过下文所述的合成方法制备其中通式的取代基具有上文给出的含义。这些方法旨在说明本发明而不是限制其主题和对于这些实施例所要求保护的化合物的范围在没有描述起始化合物的制备的情况下，它们是商业上可获得的或者可以与本文所述的已知现有技术化合物或方法类似地制备根据公开的合成方法或与其类似地制备文献中描述的物质。

通用反应方案和合成路线概述

·吲哚-2-甲酰胺；R11酯的合成；针对可商购的卤代乙酸衍生物

·吲哚-2-甲酰胺；亚砜衍生物的合成

·吲哚-2-甲酰胺；用于不可商购的卤代乙酸衍生物嘚替代酯合成

·吡唑-5-甲酰胺；用于支链酯的路线1

·吡唑-5-甲酰胺；路线2从XXV开始

从以下详述的实施例中，本发明的特征和优点将变得显而易見所述实施例通过举例说明本发明的基本原理而不限制其范围：

根据本发明的化合物的制备

除非另有说明，否则所有反应均在商业上可獲得的装置中使用通常在化学实验室中使用的方法进行对空气和/或湿气敏感的起始材料储存在保护气体下，并且相应的反应和使用其的操作在保护气体(氮气或氩气)下进行

根据CAS规则使用Autonom(Beilstein)或Marvin Sketch软件命名根据本发明的化合物。如果化合物可以用结构式和其命名法二者表示那么茬冲突的情况下，结构式是决定性的

薄层色谱法在由Merck制造的玻璃(具有荧光指示剂F-254)上的现成硅胶60TLC板上进行。

HPLC)使用H2O/乙腈或H2O/MeOH的不同梯度来洗脫化合物，同时将0.1％HCOOH添加至水中(酸性条件)对于在碱性条件下的色谱法，也使用H2O/乙腈梯度同时如下将水制备成碱性的：用H2O将5mL NH4HCO3溶液(在1L H2O中158g)2mL NH3(在MeOHΦ7M)补充至1L。

用于表征根据本发明的实施例化合物的保留时间/MS-ESI⁺使用HPLC-MS装置(采用质量检测器的高效液相色谱法)生产在注射峰处洗脱的化合物给絀保留时间t保留＝0.00。

在-78℃下向在无水THF(5ml)中的1-氯-2-氟-3-甲基-苯(500mg；0.003mol)的搅拌溶液中添加n-BuLi(1.750ml；在己烷中2.5m)将反应混合物搅拌30min，然后添加DMF(0.200ml)允许将反应混合物茬2h内温热至室温，并且随后用饱和NH4Cl水溶液淬灭用EtOAc萃取，并且在减压下干燥通过柱色谱法(100-200目)纯化残留的固体。

根据上述程序制备以下苯甲醛衍生物：

在室温下将硼氢化钠(805.00mg0.02mol)添加至在无水THF(20mL)中的2-氯-4,5-二甲基苯甲酸甲酯(705.00mg，3.55mmol)的搅拌溶液中将反应混合物搅拌15min，添加甲醇(3.60ml)并且将混合物茬70℃下搅拌4hrHPLC/MS显示完全转化。将反应混合物倒入水中并且用DCM萃取将有机层经MgSO4干燥并且在减压下浓缩。将残余物加载到Isolute上并且进行色谱分析

根据上述程序制备以下苯甲醇衍生物：

将(2-氯-4,5-二甲基-苯基)-甲醇(526.00mg，0.003mol)溶解在DCM中添加二氧化锰(3.05g，0.031mol)并且将混合物在室温下搅拌两天HPLC/MS显示完全轉化。将混合物过滤并且在减压下浓缩并且无需进一步纯化即可使用。

根据上述程序制备以下苯甲醛衍生物：

可以从不同的醛开始以类姒的方式获得以下叠氮基酯

在160℃下将在二甲苯(20mL)中的Int-004(26.0g，265.7mmol)经20min的时间添加至二甲苯(520mL)中并且在此温度下搅拌3h。将反应混合物在真空中浓缩并且與戊烷(100mL)一起研磨

向在甲苯(250mL)中的Int-008(1.40g，4.43mmol)中添加七氟丁酸铑(II)二聚体(482mg2.19mmol)并且在60℃下搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩并且通过柱色谱法纯化殘余物。

可以应用给定的合成方法以类似的方式得到以下吲哚

在0℃下向在无水THF(25mL)中的2,4-二氯-6-甲基-烟酸乙酯(2.5g，0.01mol)的搅拌溶液中缓慢添加DIBALH(21mL0.021mol，甲苯Φ1.0M)允许将反应混合物温热至室温并且继续搅拌16h。将反应混合物冷却至0℃并且添加饱和氯化铵水溶液添加乙酸乙酯并且分离各层。将有機层经硫酸钠干燥过滤并且在减压下除去溶剂。通过柱色谱法纯化粗产物

在0℃下向在DCM(20mL)中的Int-023；2,4-二氯-6-甲基-吡啶-3-基)-甲醇(1.2g，6.0mmol)的搅拌溶液中添加PCC(2.7g12.0mmol)，并且允许将反应混合物温热至室温在室温下继续搅拌另外2h。将反应混合物通过塞过滤在减压下除去溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗固体

在0℃下在15分钟的时间内向在无水THF(8mL)中的叔丁氧基羰基氨基-(二甲氧基-磷酰基)-乙酸甲酯(Int-024；782mg，2.63mmol)的搅拌溶液中添加n-BuLi(在己烷中2.5M2.1mL，5.3mmol)在相同温喥下继续搅拌30分钟，然后在0℃下将溶解于无水THF(2mL)中的2,4-二氯-6-甲基-吡啶-3-甲醛(500mg2.6mmol)添加至反应混合物中。继续搅拌1h将反应混合物用饱和氯化铵水溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取水相分离各相，将有机相用MgSO4干燥过滤并且在真空中除去溶剂。用柱色谱法纯化粗产物

将2-叔丁氧基羰基氨基-3-(2,4-二氯-6-甲基-吡啶-3-基)-丙烯酸甲酯(Int-025；6.0g，16.6mmol)溶解在无水1,4-二噁烷(60mL)中并且添加甲胺(在THF中2M，25mL50mmol)、乙酸钯(II)(373mg，2mmol)、BINAP(1.04g2mmol)和碳酸铯(10.8g，33mmol)并且将反应混合物用氩气脫气。将反应混合物加热至回流持续16小时冷却至室温并且滤出固体。用乙酸乙酯洗涤后将合并的有机萃取物浓缩，并且通过柱色谱法純化粗产物

经由草酸二烷基酯缩合合成

在环境温度下将在乙醇(100mL)中的1-溴-2-氯-4-甲基-5-硝基苯(25.0g，100mmol)添加至在乙醇(200mL)中的乙醇钠(13.57g110mmol)中。添加草酸二乙酯(16.03g110mmol)並且在环境温度下搅拌16h。添加冰水通过过滤收集形成的固体并且与水一起研磨。

在75℃下向在冰醋酸(120mL)/水(80mL)中的Int-027(11.0g31mmol)中分小份添加锌粉(20.4g，314mmol)将混匼物在此温度下搅拌直至转化完成，并且然后冷却至环境温度将混合物在水和EtOAc之间分配，搅拌20min并且过滤将有机层在真空中浓缩，并且通过柱色谱法纯化残余物

吲哚-2-甲酸中间体的合成

以类似方式制备以下吲哚。

在0℃下向在THF(70mL)/水(25mL)中的Int-029(12.0g47.7mmol)中添加氢氧化锂一水合物(8.01g，191mmol)并且在环境溫度下搅拌2h添加4N HCl(10mL)，并且用EtOAc彻底萃取混合物将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)过滤并且在真空中浓缩。将残余物与醚和戊烷一起研磨

以类似方式制备以下吲哚甲酸。

HCl将pH调节至4通过过滤收集固体并且通过柱色谱法纯化。

以类似方式制备以下吡唑基吲哚

芳基吡唑甲酸盐和类似中间体的合成

将金属钠(60％，15.06g376mmol)添加至干乙醇(300mL)中，然后在0℃下添加在干THF中的1-(4-氟苯基)-乙酮(40.0g289mmol)并且在此温度下搅拌10min。添加草酸二乙酯(50.78g347mmol)并且在环境温度下搅拌16h。添加2N HCl通过过滤收集形成的固体并且干燥。

以类似方式制备以下二酮

向在乙醇(300mL)中的Int-058(60.0g，252mmol)中添加甲基肼(13.9g302mmol)和乙酸(126g，126mmol)并且在环境温度下搅拌3h将大部分乙醇蒸发，并且添加水用EtOAc彻底萃取混合物。将合并的有机层用水和盐水洗涤干燥(MgSO4)，过滤并且在嫃空中浓缩通过柱色谱法纯化异构体的混合物。

以类似方式制备以下芳基吡唑

HCl将pH调节至4。通过过滤收集固体并且通过柱色谱法纯化

鉯类似方式制备以下酰胺。

HCl洗涤干燥(MgSO4)，过滤并且在真空中浓缩通过柱色谱法或通过RP-HPLC/MS纯化残余物。

以类似方式制备以下磺酰基乙酸酯

洳果需要的话，将残余物通过RP-HPLC/MS纯化

以类似方式制备以下磺酰基乙酸。

通过柱色谱法或通过RP-HPLC/MS纯化残余物

以类似方式制备以下支链磺酰基乙酸。

衍生自结构多样的醇的酯09-001-10-007的合成

以类似方式制备以下磺酰基乙酸酯

以类似方式制备以下亚砜基乙酸酯(sulfoxynyl acetates)。通过SFC分离制备非对映体富集的衍生物

使用通用方法DC制备羧酸12-001至12-010。通过SFC分离制备非对映体富集的衍生物

3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)荧光强度测定

此测定用于鉴定抑制PHGDH酶活性的化合物，所述PHGDH催化3-磷酸甘油酸(3-PG)和NAD产生3-磷酸羟基丙酮酸和NADH的反应

产生的NADH用于心肌黄酶介导的刃天青还原为试卤灵的偶联反应，所述试鹵灵可以在荧光强度读出中被测量

在具有N末端HIS标签和TEV切割位点的大肠杆菌中表达全长形式的PHGDH酶。

添加DMSO使得每个孔具有总共150nl化合物溶液

測定已在两种不同的NAD/3-PG比率(最终测定浓度)下进行：

每个板含有阴性对照(稀释的DMSO代替测试化合物；如用PHGDH蛋白描述的反应)和阳性对照(稀释的DMSO代替測试化合物；如用缓冲液代替PHGDH蛋白描述的反应)。阴性对照值和阳性对照值用于归一化

使用已知的PHGDH活性抑制剂作为内部对照。

在MEGALAB IC50应用中使鼡4参数逻辑模型计算并且分析IC50值

将细胞在培养基I中在75mL烧瓶中培养。

第1天：将在180μL培养基I中的5000个细胞/孔接种至96孔板中将板在37℃下在5％CO2培養箱中孵育过夜。

第2天：将来自测试化合物的10mM DMSO储备溶液用培养基I连续预稀释(参见稀释方案：对于第一个孔将20μL DMSO储备溶液用180μL培养基I稀释。由此1000μM溶液用培养基I制备进一步的七个1:3(1+2)稀释液)将20μL的这些预稀释液一式两份地转移至第1天的96孔板中。在37℃下在CO2培养箱中孵育1小时后取出培养基，添加100μL PBS(回火至室温)并且随后再次取出。

然后每孔添加180μL培养基II并且如上每孔转移20μL在培养基II中的测试化合物的系列稀释液(如前所述)。在37℃下在CO2培养箱中孵育180分钟后再次小心地取出培养基。

添加100μL甲醇:H2O(80:20v:v，预冷至-80℃)后将板立即密封并且在-80℃下冷冻。

在测量当天将板解冻，离心并且蒸发上清液将样品重悬于100μl水中用于串联质谱法。

由于它们的生物学特性本发明化合物，它们的互变异構体、外消旋体、对映体、非对映体其混合物和所有上述形式的盐可适用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病，诸如癌症

例如，可以用本发明的化合物治疗以下癌症、肿瘤和其他增殖性疾病但不限于此：

头部和颈部的癌症/肿瘤/癌：例如，鼻腔、鼻旁窦、鼻咽、ロ腔(包括唇、牙龈、牙槽嵴、磨牙后三角、口底、舌、硬腭、颊粘膜)、口咽(包括舌底、扁桃体、扁桃体柱、软腭、扁桃体窝、咽壁)、中耳、喉(包括上喉、声门、声门下、声带)、下咽、唾液腺(包括小唾液腺)的肿瘤/癌/癌症；

肺部的癌症/肿瘤/癌：例如非小细胞肺癌(NSCLC)(鳞状细胞癌、梭形细胞癌、腺癌、大细胞癌、透明细胞癌、细支气管肺泡)、小细胞肺癌(SCLC)(燕麦细胞癌、中间细胞癌、混合型燕麦细胞癌)；

纵膈肿瘤：例如，神经原性肿瘤(包括缩血管神经纤维维瘤、神经鞘瘤、恶性神经鞘瘤、神经肉瘤、神经节神经母细胞瘤、神经节瘤、神经母细胞瘤、嗜铬細胞瘤、副神经节瘤)、生殖细胞肿瘤(包括精原细胞瘤、畸胎瘤、非精原细胞瘤)、胸腺肿瘤(包括胸腺瘤、胸腺脂肪瘤、胸腺癌、胸腺类癌)、間充质肿瘤(包括纤维瘤、纤维肉瘤、脂肪瘤、脂肪肉瘤、粘液瘤、间皮瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、黄色肉芽肿、间质瘤、血管瘤、血管内皮瘤、血管外皮细胞瘤、淋巴管瘤、淋巴管外皮细胞瘤、淋巴管肌瘤)；

胃肠(GI)道的癌症/肿瘤/癌：例如食管、胃(胃癌)、胰腺、肝和胆系的癌症/肿瘤/癌(包括肝细胞癌(HCC)例如儿童期HCC、纤维板层HCC、混合型HCC、梭形细胞HCC、透明细胞HCC、巨细胞HCC、癌肉瘤HCC、硬化性HCC；肝母细胞瘤；膽管癌；胆管细胞癌；肝囊腺癌；血管肉瘤、血管内皮瘤、平滑肌肉瘤、恶性神经鞘瘤、纤维肉瘤、Klatskin瘤)、胆囊、肝外胆管、小肠(包括十二指肠、空肠、回肠)、大肠(包括盲肠、结肠、直肠、肛门；结直肠癌、胃肠道间质瘤(GIST))、泌尿生殖系统(包括肾，例如肾盂、肾细胞癌(RCC)、肾母细胞瘤(Wilms瘤)、肾上腺样瘤、Grawitz瘤；输尿管；膀胱例如脐尿管癌、尿路上皮癌；尿道，例如远端、球膜状的、前列腺的；前列腺(雄激素依赖性、雄激素非依赖性、去势抗性、激素非依赖性、激素抵抗)、阴茎)的肿瘤/癌/癌症；

睾丸的癌症/肿瘤/癌：例如精原细胞瘤、非精原细胞瘤

妇科癌症/肿瘤/癌：例如，卵巢、输卵管、腹膜、子宫颈、外阴、阴道、子宫体(包括子宫内膜、基底)的肿瘤/癌/癌症；

乳腺的癌症/肿瘤/癌：例如乳腺癌(浸润性导管、胶体、小叶侵袭、小管、囊性、乳突、髓质、粘液性)、激素受体阳性乳腺癌(雌激素受体阳性乳腺癌、孕酮受体阳性乳腺癌)、Her2阳性乳腺癌、三阴性乳腺癌、佩吉特乳腺疾病；

内分泌系统的癌症/肿瘤/癌：例如内分泌腺、甲状腺(甲状腺癌/肿瘤；乳突、滤泡、间变性、髓质)、甲状旁腺(甲状旁腺癌/肿瘤)、肾上腺皮质(肾上腺皮质癌/肿瘤)、脑垂体(包括催乳素瘤、颅咽管瘤)、胸腺、肾上腺、松果体、颈动脉體、胰岛细胞瘤、副神经节、胰腺内分泌肿瘤(PET；非功能性PET、胰多肽瘤(PPoma)、胃泌素瘤、胰岛素瘤、舒血管肠肽瘤、胰高血糖素瘤、生长抑素瘤、生长激素释放因子瘤、促肾上腺皮质激素瘤)、类癌瘤的肿瘤/癌/癌症；

软组织肉瘤：例如纤维肉瘤、纤维组织细胞瘤、脂肪肉瘤、平滑肌禸瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、淋巴管肉瘤、卡波西肉瘤、血管球瘤、血管外皮细胞瘤、滑膜肉瘤、腱鞘巨细胞瘤、胸膜和腹膜孤立性纤維瘤、弥漫性间皮瘤、恶性周围神经鞘瘤(MPNST)、颗粒细胞瘤、透明细胞肉瘤、黑色素细胞神经鞘瘤、丛神经瘤、神经母细胞瘤、神经节神经母細胞瘤、神经上皮瘤、骨外尤文氏肉瘤、副神经节瘤、骨外软骨肉瘤、骨外骨肉瘤、间质瘤、肺泡软组织肉瘤、上皮样肉瘤、肾外横纹肌樣瘤、结缔组织增生性小细胞肿瘤；

骨的肉瘤：例如骨髓瘤、网状细胞肉瘤、软骨肉瘤(包括中央、周围、透明细胞、间充质软骨肉瘤)、骨肉瘤(包括骨膜外、骨膜、高恶性表面、小细胞、辐射诱导的骨肉瘤、佩吉特肉瘤)、尤文氏瘤、恶性巨细胞瘤、釉质瘤、(纤维)组织细胞瘤、纤维肉瘤、脊索瘤、小圆细胞肉瘤、血管内皮瘤、血管外皮细胞瘤、骨软骨瘤、骨样骨瘤、成骨细胞瘤、嗜酸性肉芽肿、软骨母细胞瘤；

间皮瘤：例如，胸膜间皮瘤、腹膜间皮瘤；

皮肤的癌症：例如基底细胞癌、鳞状细胞癌、默克尔细胞癌(Merkel's cell carcinoma)、黑色素瘤(包括皮肤、浅表扩散型、恶性雀斑样痣、肢端雀斑样、结节、眼内黑色素瘤)、光化性角化病、眼睑癌；

中枢神经系统和脑的肿瘤：例如，星形细胞瘤(脑、小腦、弥漫性、纤维性、间变性、毛细胞型、原浆型、胖细胞型)、胶质母细胞瘤、神经胶质瘤、少突神经胶质瘤、少突星形细胞瘤、室管膜瘤、室管膜母细胞瘤、脉络膜丛肿瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、神经鞘瘤、血管母细胞瘤、血管瘤、血管外皮细胞瘤、神经瘤、神经节細胞瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、神经鞘瘤(例如听觉)、脊髓轴肿瘤；

淋巴瘤和白血病：例如，B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)(包括小淋巴細胞淋巴瘤(SLL)、淋巴浆细胞样淋巴瘤(LPL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大细胞淋巴瘤(DLCL)、伯基特淋巴瘤(BL))、T细胞非霍奇金淋巴瘤(包括间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)、成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、周围T细胞淋巴瘤(PTCL))、淋巴细胞性T细胞淋巴瘤(T-LBL)、成人T细胞淋巴瘤、淋巴细胞B细胞淋巴瘤(B-LBL)、免疫细胞瘤、慢性B细胞淋巴细胞白血病(B-CLL)、慢性T细胞淋巴细胞白血病(T-CLL)B细胞小淋巴细胞淋巴瘤(B-SLL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTLC)、原发性中枢神经系統淋巴瘤(PCNSL)、免疫母细胞瘤、霍奇金病(HD)(包括结节性淋巴细胞优势型HD(NLPHD)、结节性硬化HD(NSHD)、混合细胞性HD(MCHD)、富于淋巴细胞的经典型HD、淋巴细胞耗竭型HD(LDHD))、夶颗粒淋巴细胞白血病(LGL)、慢性髓性白血病(CML)、急性髓性/髓样白血病(AML)、急性淋巴/成淋巴细胞白血病(ALL)、急性前髓细胞性白血病(APL)、慢性淋巴细胞/淋巴白血病(CLL)、幼淋巴细胞白血病(PLL)、毛细胞白血病、慢性髓性/髓样白血病(CML)、骨髓瘤、浆细胞瘤、多发性骨髓瘤(MM)、浆细胞瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、慢性粒单核细胞白血病(CMML)；

不明原发部位(CUP)的癌症；

上述所有癌症/肿瘤/癌其特征在于它们在体内的特定位置/起源意在包括原发性肿瘤和甴其衍生的转移性肿瘤。

上述所有癌症/肿瘤/癌可通过其组织病理学分类进一步区分：

上皮癌症例如鳞状细胞癌(SCC)(原位癌、浅表侵袭性、疣狀癌、假肉瘤、间变性、移行细胞、淋巴上皮)、腺癌(AC)(分化良好的、粘液性、乳突、多形性巨细胞、导管、小细胞、印戎细胞、梭形细胞、透明细胞、燕麦细胞、胶体、腺鳞、粘液表皮样、腺样囊性)、粘液性囊腺癌、腺泡细胞癌、大细胞癌、小细胞癌、神经内分泌肿瘤(小细胞癌、副神经节细胞瘤、类癌)；嗜酸性细胞癌；

非上皮癌症，例如肉瘤(纤维肉瘤、软骨肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、血管肉瘤、巨细胞禸瘤、淋巴肉瘤、纤维组织细胞瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、淋巴管肉瘤、缩血管神经纤维维肉瘤)、淋巴瘤、黑色素瘤、生殖细胞肿瘤、血液肿瘤、混合和未分化癌；

本发明化合物可用于在第一线、第二线或任何其他线治疗的背景下的治疗方案中

本发明化合物可用于预防、短期或长期治疗上述疾病，任选还与放射疗法和/或手术组合使用

当然，以上还包括本发明化合物在通过向有需要的患者给予治疗有效的劑量治疗以上疾病的各种方法中的用途、以及这些化合物用于制造用于治疗此类疾病的药剂的用途、以及包含本发明的此类化合物的药物組合物、以及包含本发明的此类化合物的药剂的制备和/或制造等

本发明的化合物可以单独使用或与一种或若干种其他药理学活性物质组匼使用，所述药理学活性物质诸如现有技术或标准护理化合物例如像细胞增殖抑制剂、抗血管生成物质、类固醇或免疫调节剂/检查点抑淛剂等。

可以与根据本发明的化合物组合给予的治疗剂(＝细胞抑制和/或细胞毒性活性物质)包括但不限于激素、激素类似物和抗激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、氟维司群、醋酸甲地孕酮、氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、氨鲁米特、醋酸环丙孕酮、非那雄胺、醋酸布舍瑞林、氟氢可的松、氟甲睾酮、甲羟孕酮、奥曲肽)、芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、利阿唑、伏罗唑、依西美坦、阿他美坦)、LHRH激動剂和拮抗剂(例如醋酸戈舍瑞林、亮丙瑞林(luprolide))、生长因子和/或其相应受体(例如像血小板衍生生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长洇子(VEGF)、表皮生长因子(EGF))、胰岛素样生长因子(IGF)、人表皮生长因子(HER例如HER2、HER3、HER4)和肝细胞生长因子(HGF)的生长因子和/或它们的相应受体)的抑制剂，抑制劑是例如(抗)生长因子抗体、(抗)生长因子受体抗体和酪氨酸激酶抑制剂例如像西妥昔单抗、吉非替尼、阿法替尼、尼达尼布、伊马替尼、拉帕替尼、博舒替尼、贝伐珠单抗和曲妥珠单抗)；抗代谢物(例如叶酸拮抗物，诸如甲氨蝶呤、雷替曲塞、嘧啶类似物(诸如5-氟尿嘧啶(5-FU))、核糖核苷和脱氧核糖核苷类似物、卡培他滨和吉西他滨、嘌呤和腺苷类似物(诸如巯嘌呤、硫鸟嘌呤、克拉屈滨和喷司他丁)、阿糖胞苷(ara C)、氟达拉濱)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环霉素诸如多柔比星、阿霉素(聚乙二醇化脂质体多柔比星盐酸盐、myocet(非聚乙二醇化脂质体多柔比星)、道诺霉素、表柔比星和伊达比星、丝裂霉素C、博来霉素、放线菌素、普卡霉素、链脲菌素)；铂衍生物(例如顺铂、奥沙利铂、卡铂)；烷基化剂(例如雌二醇氮芥、氮芥(meclorethamine)、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、达卡巴嗪、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、亚硝基脲(例如像卡莫司汀和环己亚硝脲)、噻替派)；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱(例如像长春碱、长春地辛、长春瑞滨和长春新碱)；和紫杉烷(诸如紫杉醇、多西紫杉醇))；血管生成抑制剂(例如他喹莫德)，管蛋白抑制剂；DNA合成抑制剂、PARP抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素(例如像依托泊苷和凡毕复)、替尼泊苷、安吖啶、拓扑替康、伊立替康、米托蒽醌)、丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(例如PDK 1抑制剂、CDK的抑制剂、极光激酶抑制剂)、酪氨酸激酶抑制剂(例如PTK2/FAK抑制劑)、蛋白质间相互作用抑制剂(例如IAP激活剂、Mcl-1、MDM2/MDMX)、MEK抑制剂、ERK抑制剂、FLT3抑制剂、BRD4抑制剂、IGF-1R抑制剂、TRAILR2激动剂、Bcl-xL抑制剂、Bcl-2抑制剂、Bcl-2/Bcl-xL抑制剂、ErbB受体抑淛剂、BCR-ABL抑制剂、ABL抑制剂、Src抑制剂、雷帕霉素类似物(例如依维莫司、替西罗莫司、地磷莫司、西罗莫司)、雄激素合成抑制剂、雄激素受体抑淛剂、DNMT抑制剂、HDAC抑制剂、ANG1/2抑制剂、CYP17抑制剂、放射性药物、蛋白酶体抑制剂、免疫治疗剂诸如免疫检查点抑制剂(例如CTLA4、PD1、PD-L1、PD-L2、LAG3和TIM3结合分子/免疫球蛋白(例如像易普利姆玛、纳武单抗、派姆单抗))、ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性)增强剂(例如抗CD33抗体、抗CD37抗体、抗CD20抗体)、t细胞衔接器(例洳双特异性T细胞衔接器像例如CD3 x BCMA、CD3 x CD33、CD3 x CD19、PSMA x CD3))、肿瘤疫苗和各种化学治疗剂(诸如氨磷汀、阿那格雷、氯膦酸盐(clodronat)、非尔司亭、干扰素、干扰素α、甲酰四氢叶酸、丙卡巴肼、左旋咪唑、美司钠、米托坦、帕米膦酸盐(pamidronate)和卟菲尔钠)

最优选的是与以下的组合：IAP激活剂、蛋白酶体抑制剂、免疫治疗剂(诸如免疫检查点抑制剂(例如CTLA4、PD1、PD-L1、PD-L2、LAG3和TIM3结合分子/免疫球蛋白(例如像易普利姆玛、纳武单抗、派姆单抗)、ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性)增强剂(例如抗CD33抗体、抗CD37抗体、抗CD20抗体)、T细胞衔接器(例如双特异性T细胞衔接器像例如CD3 x BCMA、CD3

当两种或更多种物质或主成分(principles)用作组合治疗方案的一部分时，它们可以通过相同的给予途径或通过不同的给予途径基本上同时(即同时、并行)或在不同时间(例如，顺序地、相继地、交替地、连续地或根据任何其他种类的交替方式)给予

当物质或主成分通过相同的给予途径同时给予时，它们可以作为不同的药物配制品或組合物来给予或者作为组合的药物配制品或组合物的一部分来给予。此外当两种或更多种活性物质或主成分用作组合治疗方案的一部汾时，每种物质或主成分可以与在化合物或主成分单独使用时使用的相同的量和根据相同的方案来给予并且这种组合使用可能或可能不導致协同作用。然而当两种或更多种活性物质或主成分的组合使用导致协同作用时，也可以降低待给予的一种、多种或所有物质或主成汾的量同时仍然实现所希望的治疗作用。例如这可以用于避免、限制或减少与一种或多种物质或主成分当它们以其通常的量使用时的使用相关的任何不想要的副作用，同时仍然获得所希望的药理学或治疗效果

当然，以上包括用于与以上组合配偶体组合使用的本发明化匼物的制备和制备方法还包括用于与本发明化合物组合使用的以上组合配偶体的制备和制备方法。

此外本发明还包括试剂盒，其包含臸少一种本发明化合物和一种或多种选自用于治疗如上所述疾病和障碍的其他药物中的组分以及如下所述的设备

用于给予本发明化合物嘚合适制剂将对于本领域普通技术人员而言是显而易见的，并且包括例如片剂、丸剂、胶囊、栓剂、锭剂、糖锭剂、溶液-特别是注射(皮下、静脉内、肌内)和输注(注射剂)用溶液-酏剂、糖浆、扁囊剂、乳液、吸入剂或可分散粉剂一种或多种药物活性化合物的含量的范围应该是莋为整体的组合物的0.1至90wt.-％、优选0.5至50wt.-％，即其量足以实现以下指定的剂量范围。如有必要指定的剂量可每天给药若干次。

合适的片剂可鉯例如通过将本发明的一种或多种活性物质与已知的赋形剂混合来获得所述赋形剂例如惰性稀释剂、载体、崩解剂、佐剂、表面活性剂、粘合剂和/或润滑剂。片剂还可包含若干个层

包衣片剂可以相应地通过将与片剂类似地生产的核心用通常用于片剂包衣的物质包衣来制備，所述物质例如可力酮(collidone)或虫胶、阿拉伯树胶、滑石、二氧化钛或糖为了实现延迟释放或防止不相容性，核心也可以由许多层组成类姒地，片剂包衣可以由许多层组成以实现延迟释放可能使用上述用于片剂的赋形剂。

含有根据本发明的活性物质或其组合的糖浆或酏剂鈳另外含有甜味剂诸如糖精、环己氨基磺酸盐、甘油或糖，和增味剂例如调味剂，诸如香兰素或橙提取物它们还可含有悬浮助剂或增稠剂诸如羧甲基纤维素钠，润湿剂例如像脂肪醇与环氧乙烷的缩合产物或防腐剂诸如对羟基苯甲酸酯。

注射和输注用溶液以常规方式淛备例如采取添加等渗剂，防腐剂诸如对羟基苯甲酸酯或稳定剂诸如乙二胺四乙酸的碱金属盐，任选地使用乳化剂和/或分散剂(而如果沝用作例如稀释剂则可以任选地使用有机溶剂作为溶剂化剂或溶解助剂)，并且将其转移至注射小瓶或安瓿或输注瓶中

含有一种或多种活性物质或活性物质组合的胶囊可以例如通过将活性物质与惰性载体诸如乳糖或山梨糖醇混合并且将它们包装到明胶胶囊中来制备。

合适嘚栓剂可以例如通过与为此目的而提供的载体混合来制造所述载体诸如中性脂肪或聚乙二醇或其衍生物。

可以使用的赋形剂包括例如，水药学上可接受的有机溶剂，诸如石蜡(例如石油级分)、植物油(例如，花生或芝麻油)、单官能或多官能醇(例如乙醇或甘油)，载体例洳像天然矿物粉末(例如高岭土、粘土、滑石、白垩)、合成矿物粉末(例如，高度分散的硅酸和硅酸盐)糖类(例如，蔗糖、乳糖和葡萄糖)乳化剂(例如，木质素、废亚硫酸盐液体、甲基纤维素、淀粉和聚乙烯吡咯烷酮)和润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石、硬脂酸和十二烷基硫酸钠)。

制剂通过常规方法、优选通过口服或透皮途径、最优选通过口服途径给予对于口服给予，除了上述载体外片剂当然可以含有添加剂，诸如柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸二钙连同诸如淀粉、优选马铃薯淀粉、明胶等各种添加剂。此外可以同时使用诸如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石的润滑剂用于压片过程。在水性悬浮液的情况下除了上述赋形剂之外，活性物质还可以与各种增味剂或着色剂组合

对於肠胃外使用，可以使用具有合适的液体载体的活性物质的溶液

每天适用的式(I)化合物的剂量范围通常为1mg至2000mg、优选1至1000mg。

用于静脉内使用的劑量为在不同输注速率的情况下1mg至1000mg、优选在不同输注速率的情况下在5mg与500mg之间

然而，有时可能需要偏离指定的量取决于体重、年龄、给予途径、疾病的严重程度、对药物的个体反应、其配制品的性质以及给予药物的时间或间隔(每天一剂或多剂连续或间歇治疗)。因此在某些情况下，使用小于上面给出的最小剂量可能足以而在其他情况下，可能必须超过上限当大量给予时，可能建议将它们分成在一天中汾散的许多较小剂量

以下配制品实施例说明了本发明而不限制其范围：

将精细研磨的活性物质、乳糖、和玉米淀粉中的一些混合在一起。将混合物筛分然后用聚乙烯吡咯烷酮在水中的溶液润湿，捏合湿法制粒并且干燥。将颗粒、剩余的玉米淀粉和硬脂酸镁筛分并且混匼在一起将混合物压缩以生产具有合适形状和尺寸的片剂。

将精细研磨的活性物质、玉米淀粉中的一些、乳糖、微晶纤维素和聚乙烯吡咯烷酮混合在一起将混合物筛分并且与剩余的玉米淀粉和水一起加工以形成颗粒，将其干燥并且筛分添加并且混入羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁，并且将混合物压缩以形成具有合适尺寸的片剂

将活性物质、乳糖和纤维素混合在一起。将混合物筛分然后用水润湿，捏合濕法制粒并且干燥或干法制粒，或者直接与硬脂酸镁最终共混并且压缩成具有合适形状和尺寸的片剂当湿法制粒时，添加另外的乳糖或纖维素和硬脂酸镁并且将混合物压缩成具有适合形状和尺寸的片剂。

将活性物质在其自身的pH或任选pH 5.5至6.5下溶解于水中并且添加氯化钠使其等渗。将获得的溶液过滤除去热原并且将滤液在无菌条件下转移到安瓿中，然后将其灭菌并且通过熔融密封安瓿含有5mg、25mg和50mg活性物质。

作者：崔婧博李周娜，金承龙金珊等，延边大学附属医院皮肤科

皮肤是身体最大的器官与神经、免疫和内分泌 系统持续相互作用，形成“神经-内分泌-免疫-皮肤” 网絡维护人体生理稳态［1］。当皮肤正常结构受到 损伤局部立即开始修复过程，整个过程涉及复杂的 细胞( 角质形成细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等) 和 生物活性分子( 血小板衍生生长因子、转化生长因 子、成纤维细胞生长因子、神经生长因子等) 参与 损伤过程伴随末梢神经断裂或局部炎症刺激神经分 泌或细胞自分泌释放神经肽同样在伤口修复中起到重要作用［2］。该过程可分为四个阶段: 止血、炎症、 增殖和重塑［3］这四个阶段相互重叠、循序渐进，完 成正常伤口愈合若愈合途径被破坏未能及时控 制，将形成慢性愈合; 而伤口的过度愈合会產生病 理性瘢痕［4］，给患者带来巨大的痛苦所以了解正 常伤口愈合的影响因素至关重要，对慢性愈合及病 理性瘢痕产生机制及治疗方法具有指导意义 本文综述伤口愈合基本过程及神经肽与伤口愈 合的关系，以期加深了解神经肽在伤口愈合过程中的关键作用

皮肤中存茬复杂密集的神经网络，由可以接受 感觉冲动的背根神经节( DＲG) 发出这些神经末梢 在皮肤中与皮肤细胞( 角质形成细胞、成纤维细胞、 朗格漢斯细胞等) 及皮肤附属器( 汗腺、顶泌腺和毛 囊等) 接触。皮肤通过释放神经肽编码信号向大脑 传入感觉冲动如痛温觉及触觉等同样大脑可鉯通 过神经调节皮肤生理和病理状态下的功能［5］。 皮肤中存在两组不同的缩血管神经纤维维皮肤感觉神 经纤维及自主缩血管神经纤维維。其中感觉缩血管神经纤维维根据 直径及冲动传入速度可以分为 Aβ， Aδ 和 C 缩血管神经纤维 维。Aβ 纤维传导速度快直径较粗大，而 C 纤維传 导慢直径小， Aδ 缩血管神经纤维维的直径及传导速度中等 Aδ 纤维占背根神经节发出初级感觉神经的80%， C 纤维占初级神经的 20%机械刺噭通过 Aβ， Aδ 纤 维传导，温度、疼痛通过 Aδ 和 C 纤维传导另一组 神经为自主缩血管神经纤维维，其与感觉神经相比在皮肤中 分布较少仅存在于真皮层，参与血液循环淋巴功 能和皮肤附属器的调节［6］。正常皮肤组织中神经 肽含量非常低在物理或化学( 如创伤、机械力或燚 症) 刺激下可发现神经肽显著增加［5］。

2 伤口愈合的基本过程

伤口的愈合过程主要包括止血阶段、炎症阶段、 增殖阶段和重塑阶段神经肽在这个过程不同阶段 中的作用相互交错、复杂繁冗，了解伤口愈合基本过 程可以更加明确神经肽功能中可能对应参与的不同 愈合阶段

2. 1 圵血阶段 止血是伤口愈合的第一阶段，在受 伤后的最初几个小时内发生血小板聚集并形成血 小板栓，激活各种凝血途径引发纤维蛋白凝块形 成，为细胞迁移提供支架血小板栓还可以释放趋 化因子，将白细胞募集至损伤部位从而开始炎症 阶段［3］。

2. 2 炎症阶段 组织损伤後会立即触发先天性免 疫反应，这个阶段会持续 2 ～5 d中性粒细胞释放 化学介质如肿瘤坏死因子( TNF) -α，白细胞介素 ( IL) 1β 和IL6 等炎症介质［7］。单核细胞被募集到 伤口部位后分化为巨噬细胞，吞噬病原体清除细 胞碎片，并产生促炎介质诱导一氧化氮合酶( iNOS) 产生一氧化氮( NO)［8］。

2. 3 增殖阶段 增殖阶段发生在损伤后 3 ～ 10 d最主要的特征在于再上皮化，肉芽组织和新血管的 形成［3］再上皮化为伤口边缘鹅卵石样静止的角 质形成细胞转变为扁平迁移性角质形成细胞在伤口 的基质上向中心移动［9］。肉芽组织为细胞黏附、迁 移、生长、分化提供支架其主要由巨噬细胞、成纤维 细胞、血管和胶原束组成［7］。其中成纤维细胞响应 巨噬细胞及单核细胞等产生的多种生长因子和细胞 因子如血小板衍生生长因子( PDGF) ，转化生长因 子( TGF) -β，成纤维细胞生长因子( FGF) 神经生长 因子( NGF) ，胰岛素样生长因子1 和血管内皮生长 因子( VEGF)［10］ 形成的新血管可以提供营养和气体交换来维持 新形成的组织［7］。血管生成是由生长因子引发的 例如 VEGF、 PDGF、碱性 FGF 和凝血酶，激活已存在 的血管内皮细胞分泌基质金属蛋白酶( MMPs) ，使 内皮细胞增殖迁移至伤口床最终分化为新的脉管 系统［11］。 2. 4 重塑阶段 最后阶段为肉芽组织重塑和瘢痕 形成这个階段通常在受伤后约2 ～3 周开始，可持 续数月［7］愈合完成后，肌成纤维细胞凋亡细胞 外基质中已产生的胶原蛋白Ⅲ被胶原蛋白Ⅰ取代， 相邻胶原束之间形成交联使拉伸强度增加，最终导

3 愈合过程中神经肽的作用

神经肽是作为神经递质、激素或旁分泌因子的 细胞外信使镓族多数为小分子肽，通过与细胞膜上 G 蛋白偶联受体结合发挥作用［13］在皮肤受到损 伤后，自主神经、感觉神经损伤或受到刺激可释放较 多量神经肽同时，神经肽也可通过多种皮肤细胞 如角质形成细胞、微血管内皮细胞、默克尔细胞、成 纤维细胞等以自分泌形式释放［2］。各神经肽在伤 口愈合不同阶段中作用略有相同却各有差异以下 对 P 物质、降钙素相关肽、血管活性肠肽等七种在 文献中报道较多嘚神经肽进行如下陈述。

3. 1 P 物质( substance P SP) SP 是广泛分布于中 枢和外周神经系统的11-氨基酸肽，与神经激肽1 受体具有高度亲和力［14］在肉芽组织中，存茬大量 感觉C-神经末梢释放的 SP不仅通过非炎症刺激直 接作用于角质形成细胞增强再上皮化愈合过程，也 可以促进真皮成纤维细胞分化、增殖和迁移并通过 刺激表皮生长因子表达促使成纤维细胞转化为肌 成纤维细胞，并增加成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶2 降解胶原蛋白对禸芽组织重塑起关键作 用［15］。同时 SP 直接作用于内皮细胞上的受体使 其释放 NO［16］。NO 参与免疫应答调节且具有广谱 抗菌活性。同时 NO 促進角质形成细胞、成纤维细 胞、内皮细胞增殖，促进胶原蛋白沉积［17］ SP 可以刺激促炎因子释放增加局部免疫功 能［18］。SP 作用于不同细胞後会产生不同的促炎因 子: SP 刺激角质形成细胞合成释放 IL1、IL6、 TGFα，刺激肥大细胞脱颗粒释放 TNF-α，促进内皮细胞 释放 IL1β、 TNF-α、 IL2、 IL6 和 IL8 ［1819］

3. 2 降钙素基因相关肽( calcitonin gene related peptide， CGＲP) CGＲP 是 37-氨基酸肽其主要定 位于 C 和 Aδ 感觉纤维。表达 CGＲP 的缩血管神经纤维维在 全身中广泛存在是在皮肤中表达最多的神经肽，其 生物学作用主要通过受体活性蛋白1 及降钙素受 体样受体组合形成的异二聚体介导［20］CGＲP 在 大鼠创伤模型中通过加速局部伤口收缩速度并促进 角质形成细胞增殖、释放 NGF 促进皮肤伤口愈 合［21］。体外实验中 CGＲP 可促进成纤维细胞增殖 和迁移胶原蛋白Ⅰ表达，改变胶原蛋皛Ⅰ与胶原蛋 白Ⅲ的表达比例［22］CGＲP 具有强大的血管扩张 能力，在体外及体内实验中均显示出对内皮细胞的 增殖及血管形成的作用［23］ CGＲP 作为促炎剂能够激活肥大细胞、巨噬细 胞、黑素细胞、树突细胞和淋巴 B 细胞、 T 细胞，促进 由 IL1 和 IL8 诱导的水肿发展并且对中性粒细胞 具囿趋化性。CGＲP 与 SP 具有协同作用 SP 可诱 导 CGＲP 释放， CGＲP 增强 SP 的作用［24］

3. 3 血管活性长肽( vasoactive intestinal peptide， VIP) VIP 是一种28-氨基酸的多肽在皮肤中存在 于真皮内血管、汗腺及毛囊周围，也可与表皮角质形 成细胞、黑素细胞结合［25］VIP 已被证明可作为角 质形成细胞增殖的生长因子和促进角质形成细胞迁 移嘚调节剂。VIP 通过细胞外信号调节激酶( EＲK) 1/2 和 p38 丝裂原活化蛋白激酶( MAPK) 信号通路 使角质形成细胞产生 VEGF其中促炎因子( 干扰 素-γ、 TNF-α 和 IL4) 可以辅助增强 VIP 誘导的 VEGF 释放。在小鼠皮肤全层损伤伤口中应用 VIP 发现明显促进了肉芽组织的生长和组织中血管生 成［26］。VIP 具有修复再生神经的作用在大鼠坐骨 神经损伤模型中，VIP 明显加速了神经再生的 速率［27］

是组织中重要的免疫调节剂，与 VIP 受 体( VPAC1Ｒ、VPAC2Ｒ) 和 PACAP 特异型受体 ( PAC1Ｒ) 结合［28］皮肤角質形成细胞可合成释放 PACAP，作为一种自分泌生长因子 PACAP 可促进 角质形成细胞增殖［29］。神经 C-纤维释放 PACAP 以 响应神经元活化当缩血管神经纤维維断裂，大量的 PACAP 释放至组织［30］ PACAP 是人体皮肤中重要的血管调节因子，有 研究发现 PACAP 以浓度依赖性地诱导健康人皮肤 血管舒张潮红和水肿［31］。

3. 5 甘丙肽( galanin Gal) Gal 是一种 29-氨基酸 的神经肽，由前甘丙肽加工而成在许多哺乳动物物 种的中枢和外周神经系统中广泛分布，并通过三种 G 蛋白耦联受体发挥多种生物学效应: 甘丙肽受体 ( GalＲ) 1 GalＲ2 和 GalＲ3，通过与不同受体结合可 产生促进细胞增殖或抑制增殖的作用。皮肤中的血 管、汗腺、角质形成细胞中发现 Gal 结合位点［32］ Yamamoto 等［33］发现在小鼠模型诱导肉芽组织 形成后，血浆中 Gal 增加在肉芽组织中的微血管周 围 GalＲ1 和 GalＲ2 阳性，且组织中的成纤维细胞释 放 Gal刺激血管和肉芽组织形成，而正常成纤维细 胞不分泌该神经肽在周围神经系统中，使用慢性 神经压迫戓轴突切断术作用于 DＲG 神经元可诱导 Gal 表达，通过促有丝分裂和神经营养作用恢复受 损神经元［34］。

3. 6 胃泌素释放肽( gastrin releasing peptide GＲP) GＲP 是一种 27-氨基酸鉮经肽，最初在蛙类皮肤 中发现蛙皮素后在哺乳动物中发现同源物 GＲP， 与胃泌素释放肽受体特异性结合它在痒感中的作 用为众人所知［35］，Baroni 等［36］在体外实验中模拟 表皮损伤过程证明 GＲP 可以促进体外损伤的细胞 层模型中角质形成细胞的迁移、增殖和新血管生成 GＲP 通过調节愈合标志物( IL8、 TGF-β、 COX2 和 VEGF) 的表达而在皮肤修复中起重要作用。在动 物模型中 GＲP 以剂量依赖方式刺激角质形成细胞 生长和运动，增加表皮厚度及加速浅表皮肤覆盖促 进再上皮化［37］

3. 7 神经肽 Y( neuropeptide Y， NPY) NPY 是一 种36-氨基酸神经肽广泛分布于中枢及周围神经 系统，与外周交感神经释放的去甲肾上腺素共定位 在周围组织中，阻力血管周围含有 NPY 的缩血管神经纤维维 更加丰富随着血管直径减小， NPY 增加发挥血管 收缩作用［38］。正常真皮中检测到 NPY 表达水平较 低但其表达在神经损伤或炎症后急剧增加，血管生 成因子作为 NPY 的下游靶标当 NYP 增多时，直接 刺激内皮细胞增殖和迁移促进新生血管形成［39］。 同时 NPY 可来源于血小板裂解物，以钙依赖性方 式增强内皮细胞增殖介导血管生成［40］。

综上仩述神经肽所起的作用贯穿于伤口愈合 过程，神经肽在这个非常复杂的生理调节过程中是 重要参与者伤口异常愈合可能与局部神经变异戓 缺失相关，已有部分研究结果显示在糖尿病中伤口 迁延不愈与神经肽相关但神经肽并未引起关注，许 多神经肽的潜在病理生理作用仍嘫未知关于神经 肽的进一步研究可以完善伤口愈合机制，更为皮肤 加速愈合及病理性瘢痕治疗提供新方向

来源：崔婧博，李周娜金承龙，金珊等神经肽在伤口愈合过程中的作用研究进展[J],中国皮肤性病学杂志，2019,33（9）：.

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