先单独加入NaOH溶液是为了营造一个堿性环境在碱性环境下双缩脲试剂组成B中的Cu2+与蛋白质肽键络合产生颜色反应。如果先将双缩脲试剂组成A与双缩脲试剂组成B混合即NaOH与CuSO4溶液混在一起,那么就会产生Cu(OH)2沉淀药剂就会失去作用,看不到效果也就无法判断是否存在蛋白质。
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双缩脲反应產物 双缩脲结构双缩脲试剂组成是由双缩脲试剂组成A和双缩脲试剂组成B两种试剂组成.
双缩脲试剂组成A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL嘚水溶液;
双缩脲试剂组成B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。先将双缩脲试剂组成A加入组织样液摇荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂组成B摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与雙缩脲试剂组成产生紫色反应蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比
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因为它要和你们的化学物质发生反应使其失效!
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先加NaOH的话会对蛋白质造成伤害,
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