青岛农业人学硕士学位论文 目录 目 录 摘要…………………………………………………………………………………………………………．．1 Abstract…………………………………………………………………………………．j…………………2 立题依据及研究意义………………………………………………………………………………………．．4 第一章小麦品种(系)耐深插特性分析 前言…………………………………………………………………………………………………………．．6 材料与方法…………………………………………………………………………………………………．．7 结果与分析…………………………………………………………………………………………………8 1深播性状分析……………………………………………………………………………………………．．8 2耐深播性状相关分析……………………………………………………………………………………10 3耐深播种质的鉴定指标…………………………………………………………………………………11 4地中茎与胚芽鞘生长动态………………………………………………………………………………．．1l 结论与讨论…………………………．．．……………………………………………………………………．13 第二章小麦品种(系)深播特性分子生物学鉴定 前言…………………………………………………………………………………………………………15 1小麦深播基因研究进展…………………………………………………………………………．．15 2研究mRNA差异表达的方法及其应鼡………………………………………………………………．．15 3 cDNA．AFLP技术的应用及其研究进展………………………………………………………………．16 4其他差异表达技术方法原理……………………………………………………………………………18 S结语…………………………………………………………………………………………．…………．．22 材料与方法…………………………………………………………………………………………………24 1供试材料…………………………………………………………………………………………………．24 2仪器与药品………………………………………………………………………………………………24 3试验方法…………………………………………………………………………………………………25 3．1小麦总RNA的提取…………………………………………………………………………………．．25 3．2小麦总RNA的纯囮…………………………………………………………………………………．．25 3．3双链cDNA的合成…………………………………………………………．．．………………………．25 3．4cDNAAFLP分析………………………………………………………………………………………28 T 青岛农业大学硕七學位论文 目录 3．5差异表达片段回收和二次PCR扩增…………………………………………………………………3l 3．6二次扩增产物的凝胶回收…………………………………………………………．．．………………．．32 3．7差异片段的纯化、克隆、测序及分析…………………………………………………………………．32 结果与分析…………………………………………………………………………………………………34 1小麦总RNA的提取、纯化、完接性的检测……………………………………………………………34 2双链eDNA的合成与纯化………………………………………………………………………………35 3预扩增结果…．．…………………………………………………………………………………………．36 4选择性扩增結果…………………………………………………………………………………………37 5 6小麦耐深播基因的eDNA．AFLP分析…………………………………………………………………．4l 7cDNA特异片段的回收及再扩增………………………………………………………………………．．42 8特异片段的序列測定及分析……………………………………………………