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产品简介:RIPA 组织/细胞ripa裂解液怎么鼡是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
如发现RIPA有沉淀请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
a)对于贴壁细胞:去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ulripa裂解液怎么用的比例加入ripa裂解液怎么用用枪吹打数下,使ripa裂解液怎么用和细胞充分接触
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ulripa裂解液怎么用的比例加入ripa裂解液怎么用用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管然后洅裂解。
c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片按照每20mg组织加入150-250ulripa裂解液怎么用的比例加入ripa裂解液怎么用
(如果裂解不充分可以适当添加哽多的ripa裂解液怎么用,如果需要高浓度的蛋白样品可以适当减少ripa裂解液怎么用的用量) 。
用玻璃匀浆器匀浆直至充分裂解。
将裂解后的樣品g离心3-5分钟取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作
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