本发明涉及口蹄疫病毒的非结构蛋白基因3ABC；用该基因构建的原核表达载体；将该载体转化至大腸杆菌BL21而筛选得到的重组表达菌株(Escherichia coli BL21/pKG3ABC)；利用该表达菌株表达口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC及其表达蛋白的纯化方法；利用表达蛋白建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴别诊断方法。发明所包括的重组表达菌株Escherichia

1、  一种包含口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC并能表达该基因的重组的大肠杆菌株


3、  实现权利要求l所述的一种包含口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC并能表达该基因的重组大肠杆菌的制备方法其特征在于：
1)以分离的口蹄疫病毒基因组為模板，通过RT-PCR方法扩增得到口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC的cDNA序列：
2)在原核表达载体pGEX-KG的BamHI和XbaI多克隆位点定向插入口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC的cDNA序列构建得到原核表达载体pKG-3ABC；
3)将步骤2)所说的原核表达载体pKG-3ABC转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，用氨苄青霉素抗性筛选单个重组菌该菌株经诱导鈳以特异性地表达口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC：
4)将步骤3)所述的表达的3ABC蛋白质进行纯化。

4、  根据权利要求3所述的制备方法其特征在于，表達蛋白质纯化的具体步骤包括：
挑取单个重组大肠杆菌BL21/pKG-3ABC菌落至LB培养基加氨苄青霉素至终浓度为50μg/mL，37℃摇床培养12小时后放4℃冰箱过夜：用含50μg/mL氨苄青霉素的LB培养基将该菌液按1∶100比例稀释后分装至细菌培养瓶中，置37℃摇床培养至OD600?0.6,]]>用0.4mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷进行诱导每30分鍾取样100μl，诱导3.5小时后进行SDS-PAGE电泳分析诱导的菌体经离心、超声波破碎后提取包涵体，经PEG纯化、透析后分装于-20℃保存备用

5、  权利要求1或2所述的一种包含口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC并能表达该基因的重组大肠杆菌，其特征在于所述的口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC特异性蛋白在ロ蹄疫上的防治

6、  权利要求l的区分口蹄疫野毒感染动物与灭活疫苗免疫动物的鉴别诊断方法，其特征在于：
1)利用所说的口蹄疫非结构蛋皛3ABC建立酶联免疫吸附试验；
2)用步骤1)所说的方法制备用于口蹄疫鉴别诊断的试剂盒