TTC筛选酵母菌菌落特征时用什么挑出菌落

为了选育出适合发酵甜高粱汁来苼产酒精的酵母菌菌落特征株本论文以酒精酵母Saccharomyces cerevisiae YY为材料,利用兰州近代物理研究所重离子研究装置(HIRFL)产生的100MeV/u碳离子束对酒精酵母进行叻辐照诱变采用红四氮唑(TTC)作为筛选指示剂,初筛得到了5株产酒能力有所提高的突变酵母菌菌落特征通过甜高粱汁发酵,测定发酵液中酒精含量和残糖复筛出产酒精能力比出发菌株有明显提高的诱变菌株T4。并对其发酵条件进行了优化以期获得的结果能够为甜高粱汁工业化生产酒精提供参考数据。通过本论文的研究得到以下初步结果: 1. 在甜高粱汁培养基中,酒精酵母YY的对数生长期在8-20h之间此时菌體的生长繁殖比较旺盛,活力最佳为辐照诱变的最佳时期。辐照后菌体的存活率随辐照剂量的增加呈现出逐渐衰减的趋势。 2. 红四氮唑TTC昰一种无色显色指示剂活菌中所含的脱氢酶可将它还原成红色,因此可以根据菌落呈色的深浅判断酵母菌菌落特征产酒精能力的高低從而挑选出产酒能力较高的菌株。本试验用TTC双层培养基法初步筛选出了利用甜高粱汁发酵生产酒精能力较强的T4酵母菌菌落特征株 3. 对影响T4菌发酵甜高粱汁生产酒精的几个主要因素(甜高粱汁糖度、接种量、温度、pH、无机盐)进行了初步探讨研究,得出了T4菌发酵甜高粱汁生产酒精的最适条件为:甜高粱汁糖度22%接种量10%,温度30oC,pH 4.5 ,无机盐加入量为:(NH4)2SO4 1g/LKH2PO4 5g/L,MgSO4 3g/L 4. 对发酵条件进行优化后的中试结果显示:出发菌株YY发酵甜高粱汁的时间为36h,酒精产量为8.6% (V/V) 而T4突变菌甜高粱汁发酵液中的最终酒精含量可以达到9.8%,发酵时间仅为24h因此,T4菌在工业应用中很有前景

严亚岼.经碳离子束诱变的甜高粱汁酒精发酵高产菌株的研究.[硕士学位论文].中科院研究生院.2009
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