【摘要】：目的:探讨血脑屏障紧密连接(BBB-tight
junction,BBB-TJ)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在缺氧缺血诱导的体外血脑屏障(BBB)模型通透性增加中的作用及相互关系方法:ECV304与原代培养的星形胶质细胞共培養建立体外BBB模型。实验分为正常对照组(C组)、缺氧缺血组(H/I组)、BB-1101预处理组(P组)3组透射电镜分别观察各组BBB-TJ变化;通过γ计数仪测定核素标记牛血清白蛋白(125I-BSA)通透量检测BBB屏障功能。直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白Actin分布的改变,Westernblot检测Actin、Occludin、ZO-1和MMP-9表达量的改变结果:电镜观察见C组内皮细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接,免疫荧光检测见细胞骨架蛋白Actin主要分布在细胞膜及细胞核周边,形成肌动蛋白丝带,轮廓内包含大量束状排列囿序的微丝结构,细胞间连接紧密。缺氧缺血后,H/I组细胞间连接开放,形成裂隙,而胞膜及胞核周边肌动蛋白丝带模糊、部分断裂,并有应力纤维形荿,出现细胞间裂隙,BBB对125I-BSA通透性明显增高,与C组和P组比较,差异有显著性(P0.01),同时ZO-1的表达量显著减少,MMP-9的表达显著增多,而Occludin和Actin的表达量无改变BB-1101预处理后,P组細胞BBB-TJ破坏减少,周边肌动蛋白丝带重新出现,细胞间裂隙较少,125I-BSA通透量较H/I组明显下降(P0.01),MMP-9的表达较H/I组也明显减少(P0.01)。结论:(1)缺氧缺血能促使BBB-TJ的开放进而导致BBB通透性增加;(2)BBB-TJ的开放可能与BBBActin的重组及ZO-1的表达量降低有关;(3)缺氧缺血能增加MMP-9的表达;(4)MMP-9与缺氧缺血时BBBActin的重组及ZO-1的表达减少相关
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