TOPDOC基因检测助力儿童用药安全
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TOPDOC基因检测助力儿童用药安全
据《2016年儿童用药安全调查报告白皮书》显示，因为儿童生病的时候用药不正确，我国每年约有3万名儿童耳聋。长期以来儿童用药的时候都会被当成“缩小版的成人”，很多患儿家长都会粗略地换算，按照“小儿酌减”的原则把成人药给孩子使用，很多用药剂量只能通过手掰来给儿童喂药，却不知道这个举动会给儿童带来很严重的后果。央视公益片《因药致聋女孩的无声诉说》，重点提出了儿童因为生病时用药不当，导致耳聋等不良后果的发生。大部分都因为成人药儿童用。甚至时去医院医生也无法知道患儿到底对哪种药物过敏。那么该如何科学地防范和减少用药不当带来的后果呢？通过基因检测全面了解孩子的用药风险、充分了解儿童解热镇痛类药物、儿童抗感染类药物等常用药物对孩子的药理效果和不良反应，避免错误用药给生病的孩子带来二次伤害。&TOPDOC儿童药物基因检测一次检测，终身受益，帮助家长防患于未然。TOPDOC基因检测咨询联系人：庄先生联系方式：&（微信手机同号）
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質粒DNA的提取及其琼脂糖凝胶电泳实验报告及思考题.doc 6页
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質粒DNA的提取及其琼脂糖凝胶电泳实验报告及思考题
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1．实验目的：
（1）通过本次实验学习和掌握碱裂解法提取质粒；
（2）通过本次实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术；
2．实验材料及用品
（1）实验仪器（apparatus）：
恒温培养箱（Constant temperature incubator）、恒温摇床（Constant temperature shaking table）、高速离心机（High speed centrifuge）、漩涡振荡器（Vortex mixer）、超净工作台（Bechtop）、高压灭菌锅（Autoclave）、微量加样器（Pipettes）、烧杯（ beaker）、量筒 （graduated cylinder）、 玻璃棒（stir bar）、 微波炉（microwave）、 天平（Pan balance）、电泳梳子（ comb）、电泳槽 （electrophoresis tank）、 电泳器 （Electro-phoresis
System）、 紫外灯（Ultraviolet
transilluminator ）
3）、材料与试剂（Reagents）：
①溶液I（Solution Ⅰ）：
50mmol/L 葡萄糖；25mmol/L
三羟基甲基氨基甲烷（Tris）Tris-HCl（pH8.0）；10mmol/L
乙二胺四乙酸（EDTA） pH8.0
溶液I可成批配制，每瓶约100ml，10磅高压蒸气灭菌15分钟，贮存于4℃。
②溶液Ⅱ（Solution Ⅱ）：新鲜配制，等体积混合
NaOH（临用前用10mol/L贮存液现用现稀释）；1%
SDS （可用10％贮存液稀释配制）注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。
③溶液III （Solution Ⅲ，100mL)：加上后混匀会形成絮状沉淀
5mol/L KAc，
28.5mL H2O
（该溶液钾离子浓度为3mol/L，醋酸根离子浓度为5mol/L）
④TE液缓冲液：10 mmol/L
Tris-HCl（pH8.0）；1 mmol/L
EDTA（pH8.0）
⑤70% 乙醇；
⑥平衡酚：氯仿
将量取25 ml Tris-HCl（pH8.0）平衡苯酚，加入24 ml 氯仿和 1 ml 异戊醇，充分混合后，移入棕色玻璃瓶中，4℃保存。
⑦LB培养基：
胰化蛋白胨
酵母提取物
⑧琼脂糖（Agarose）；
⑨1 liter（升）5×TBE备用溶液（stock solution）：
54g tris base，27.5g 硼酸（boric acid），20ml 0.5 mol/L EDTA , pH 8.0；
⑩6×凝胶加样缓冲液：
0.25% 溴酚蓝（bromophenol blue），40% 蔗糖（sucrose in water）；
另外还有的试剂是：胰RNA酶、DNA Marker、硼酸、Gelview试剂
（2）实验材料：含有pUC19质粒的大肠杆菌等。
3．实验原理：
1）质粒DNA的提取：
（1）关于质粒：
质粒是一类存在于几乎所有细菌中染色体之外（细胞质中）呈游离状态的双链、闭环的DNA分子。质粒通常携带有染色体上所不存在的能够表达产生抗生素、耐受重金属等重要性状的基因。细菌质粒的大小范围从1kb至200kb以上不等，且拥有自己的复制起始位点，可不依赖于染色体而进行独立自主复制。一些小的质粒利用宿主细胞的酶进行复制，而较大的质粒则自身携有复制与编码的有关酶。
（2）一般分离质粒DNA的方法都包括3个步骤：
①培养细菌，使质粒DNA大量扩增；
②收集和裂解细菌；
③分离和纯化质粒DNA。
分离制备质粒DNA的方法很多，其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、SDS法、羟基磷灰石层析法等。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途进行选择。
（3）碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA的原理：
碱裂解法提取质粒DNA是根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。
在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕，仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8乙酸钾高盐缓冲液恢复pH至中性时，共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确；而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，因复性较缓慢且不准确而相互缠绕形成不溶性网状结构。而复性的质粒DNA恢复原来构型，保持可溶性状态。通过离心，染色体DN
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11页11页29页117页43页61页69页11页12页27页Topdoc靶向治疗基因检测要抽血吗?_百度知道
Topdoc靶向治疗基因检测要抽血吗?
提示该问题下回答为网友贡献，仅供参考。
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听谁说的靶向治疗基因？
望岳(杜甫)
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&&&&来源网站：
&&更新日期： 15:44:20&&信息编号：206Z45850
什么是基因检测？
基因检测也叫基因体检，在叫DTC（direct-to-consummer genomic companies）
基因检测是通过提取人血液或口腔内壁脱落细胞中的DNA，对个人遗传信息进行分析一种技术。
基因检测可以了解自身的基因缺陷，避免不利环境因素的影响，以便更科学的去管理和规划自己的健康。避免疾病发生，实现疾病早期预防，防患未然。
基因检测的适用人群？
一般健康人群
具有遗传疾病（如癌症及心血管疾病）
常暴露于含癌症因子环境的人
目前医学疾病检测无法确认，但被医师列为高度怀疑对象
疾病患者想了解自己用某种药的有效性
所以，想知道更多关于自己身体的秘密，不如问问你的基因。
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