血型与输血（ 2 ） - Documents
血型与输血（2）
菏泽医学专科学校
三、Rh血型系统
Rh阳性：含D抗原的红细胞
Rh阴性：不含D抗原的红细胞
汉族人中Rh阴性率﹤1%
（一）Rh血型系统抗体
1. Rh抗体的产生 Rh抗体绝大多数是通过Rh血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体，这些抗体均为IgG
2. Rh抗体的种类 主要有5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e，最常见的是抗D，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性
3. Rh抗体的特性 为免疫性抗体IgG
（二）Rh血型鉴定方法及评价
1. 酶介质法
分为直接酶介质法、间接酶介质法
2. 抗球蛋白试验（Coombs test）
分为直接抗球蛋白试验（DAT）和间接抗球蛋白试验（IAT）
3. 凝聚胺试验（polybrene test）
4. 人源盐水介质抗D试验 (临床应用广泛)
5. 低离子强度（盐）溶液试验
在酶处理下
IgG抗体可凝集RBC
1. 酶介质法
1. 酶介质法
水浴30分钟
2.抗球蛋白（Coombs）试验
DAT（直抗）:直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。
IAT（间抗）：通过体外致敏红细胞，再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。
IgM抗体凝集RBC示意图
在盐水介质中
在盐水介质中、
IgG抗体不凝集RBC
2.抗球蛋白试验
3.凝聚胺技术
凝聚胺（Polybrene），一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
在凝聚胺处理下
IgG抗体可凝集RBC
4.人源盐水介质试验
原理：加入蛋白变性剂，使IgG抗D抗体转变为类似大分子的“IgM”，在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。
临床应用广范
5.LISS(低离子强度溶液)的原理
（三）Rh血型鉴定的临床意义
1. 输血前的检查
2. 新生儿溶血病诊断
3. 协助治疗
医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等6小时逝去
稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院坚持严格按照法律规定输血。经过6个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇终于9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。（齐鲁晚报－ 日）
血液中心冷冻库提供的4个单位（800ml）RH阴性O型血浆，每个单位按照常规最快也要3个小时才能解冻，且不能满足需要，只能临时从稀有血型志愿者中采集7个单位（1400ml）的血液，这样的血液又需要3个小时的检验，待其筹足之时，抢救的最佳时间已经过去 。
尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过6个多小时等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终于9日下午不幸去世
一个省会所在的大医院，为什么自己不备有RH阴性O型等稀有血浆？为什么不建立稀有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？
四、红细胞血型系统交叉配血试验
交叉配血试验的原理
交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。
盐水介质配血方法
交叉配血试验（盐水配血法）
原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存在。
1、自被检者静脉采血2~3ml,分离血清，并配制5%红细胞悬液。
2、主侧：病人血清+献血员红细胞
次侧：献血员血清+病人红细胞
混匀，1000转/分，然后观察结果。
报告方式：
交叉配合试验（**法）
受血者***（*）型血清+***（*）型红细胞不凝集，无溶血。
受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血
结果判断：
同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效价
大量交叉配血
献血员之间应进行交叉配备
如：献1血清+献2红细胞
献1红细胞+献2血清
抗球蛋白配血方法
水浴30分钟
抗球蛋白方法配血方法
加抗球蛋白
酶介质配血方法
酶介质配血方法
水浴30分钟
凝聚胺技术
凝聚胺（Polybrene），一种高价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
聚凝胺(Polybrene)配血方法
聚凝胺引起红细胞非特异性凝集
基本操作方法
1、试管中加入待检血清或血浆1滴
2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴
3、摇匀，室温放置1分钟（时间长，效果好）
4、加聚凝胺试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒
5、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验
6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果
由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开
微柱凝胶介质配血法
红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应
凝胶试验使用的试剂和器材
交叉配血试验的方法学评价
盐水配血试验 简单、快速
检不出IgG型抗体
酶介质试验
简便、经济
准确性、稳定性差
抗球蛋白试验 最准确、可靠
复杂、费时、试剂贵
凝聚胺试验
快速、准确
需特殊试剂及器材
微柱凝胶试验
交叉配血的质量保证
①检测前：标本、试剂及实验器材的要求
②检测中：工作态度严谨，高度责任感
③检测后：标本存放7天以上
交叉配血的临床意义
① 保证输血安全
② 发现亚型和不规则抗体
第五节 新生儿溶血病
(一)ABO新生儿溶血病
是由于母婴血型不合，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。
父母血型匹配，子女才能优生。
如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。
此种溶血症主要发生在母亲为O型，婴儿为A型或B型者。所以也叫ABO溶血症。
(二) Rh血型引起的新生儿溶血
分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫
HDN 的发病示意图
二、实验室检查（产前检查）
1. 血型鉴定
2.检查没亲血清中有无IgG性质的抗体并检测其效价
3.羊水分析
二、实验室检查 （患儿血标本检查）
直接抗球蛋白试验
红细胞抗体放散试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。
游离抗体试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。
三、新生儿溶血病治疗与预防
1.药物治疗与血浆置换
2. 提早分娩
3. 宫内换血
4.光照治疗与换血疗法
第六节 自动化血型分析技术
1.微柱凝胶法
2.微板法(血站较普及)
3.全自动血型分析仪检测法
本章节的重点内容是：ABO血型亚型、血型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！
一、名词解释
血型鉴正向定型
血型鉴反向定型
交叉配血试验
二、选择题
1、交叉配血时,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集反应,则血清中的抗体是
2、ABO新生儿溶血症可见于母亲为O型,胎儿的血型可为
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血型与输血（ 2 ）.
菏泽医学专科学校.
三、 Rh 血型系统.
Rh 阳性： 含 D 抗原 的红细胞
Rh 阴性： 不含 D 抗原 的红细胞
汉族人中 Rh 阴性率 ﹤1%.
（一） Rh 血型系统抗体.
1. Rh 抗体的产生 Rh 抗体绝大多数是通过 Rh 血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体， 这些抗体均为 IgG
2. Rh 抗体的种类 主要有 5 种，即抗 D 、抗 E 、抗 C 、抗 c 、抗 e ，最常见的是抗 D ，凡被检红细胞和抗 D 血清凝集者为 Rh 阳性，不凝集为 Rh 阴性
3. Rh 抗体的特性 为免疫性抗体 IgG.
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血型与输血（ 2 ）
血型与输血（2）
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三、Rh血型系统
Rh阳性：含D抗原的红细胞
Rh阴性：不含D抗原的红细胞
汉族人中Rh阴性率﹤1%
（一）Rh血型系统抗体
1. Rh抗体的产生 Rh抗体绝大多数是通过Rh血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体，这些抗体均为IgG
2. Rh抗体的种类 主要有5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e，最常见的是抗D，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性
3. Rh抗体的特性 为免疫性抗体IgG
（二）Rh血型鉴定方法及评价
1. 酶介质法
分为直接酶介质法、间接酶介质法
2. 抗球蛋白试验（Coombs test）
分为直接抗球蛋白试验（DAT）和间接抗球蛋白试验（IAT）
3. 凝聚胺试验（polybrene test）
4. 人源盐水介质抗D试验 (临床应用广泛)
5. 低离子强度（盐）溶液试验
在酶处理下
IgG抗体可凝集RBC
1. 酶介质法
1. 酶介质法
水浴30分钟
2.抗球蛋白（Coombs）试验
DAT（直抗）:直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。
IAT（间抗）：通过体外致敏红细胞，再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。
IgM抗体凝集RBC示意图
在盐水介质中
在盐水介质中、
IgG抗体不凝集RBC
2.抗球蛋白试验
3.凝聚胺技术
凝聚胺（Polybrene），一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
在凝聚胺处理下
IgG抗体可凝集RBC
4.人源盐水介质试验
原理：加入蛋白变性剂，使IgG抗D抗体转变为类似大分子的“IgM”，在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。
临床应用广范
5.LISS(低离子强度溶液)的原理
（三）Rh血型鉴定的临床意义
1. 输血前的检查
2. 新生儿溶血病诊断
3. 协助治疗
医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等6小时逝去
稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院坚持严格按照法律规定输血。经过6个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇终于9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。（齐鲁晚报－ 日）
血液中心冷冻库提供的4个单位（800ml）RH阴性O型血浆，每个单位按照常规最快也要3个小时才能解冻，且不能满足需要，只能临时从稀有血型志愿者中采集7个单位（1400ml）的血液，这样的血液又需要3个小时的检验，待其筹足之时，抢救的最佳时间已经过去 。
尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过6个多小时等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终于9日下午不幸去世
一个省会所在的大医院，为什么自己不备有RH阴性O型等稀有血浆？为什么不建立稀有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？
四、红细胞血型系统交叉配血试验
交叉配血试验的原理
交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。
盐水介质配血方法
交叉配血试验（盐水配血法）
原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存在。
1、自被检者静脉采血2~3ml,分离血清，并配制5%红细胞悬液。
2、主侧：病人血清+献血员红细胞
次侧：献血员血清+病人红细胞
混匀，1000转/分，然后观察结果。
报告方式：
交叉配合试验（**法）
受血者***（*）型血清+***（*）型红细胞不凝集，无溶血。
受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血
结果判断：
同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效价
大量交叉配血
献血员之间应进行交叉配备
如：献1血清+献2红细胞
献1红细胞+献2血清
抗球蛋白配血方法
水浴30分钟
抗球蛋白方法配血方法
加抗球蛋白
酶介质配血方法
酶介质配血方法
水浴30分钟
凝聚胺技术
凝聚胺（Polybrene），一种高价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
聚凝胺(Polybrene)配血方法
聚凝胺引起红细胞非特异性凝集
基本操作方法
1、试管中加入待检血清或血浆1滴
2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴
3、摇匀，室温放置1分钟（时间长，效果好）
4、加聚凝胺试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒
5、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验
6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果
由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开
微柱凝胶介质配血法
红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应
凝胶试验使用的试剂和器材
交叉配血试验的方法学评价
盐水配血试验 简单、快速
检不出IgG型抗体
酶介质试验
简便、经济
准确性、稳定性差
抗球蛋白试验 最准确、可靠
复杂、费时、试剂贵
凝聚胺试验
快速、准确
需特殊试剂及器材
微柱凝胶试验
交叉配血的质量保证
①检测前：标本、试剂及实验器材的要求
②检测中：工作态度严谨，高度责任感
③检测后：标本存放7天以上
交叉配血的临床意义
① 保证输血安全
② 发现亚型和不规则抗体
第五节 新生儿溶血病
(一)ABO新生儿溶血病
是由于母婴血型不合，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。
父母血型匹配，子女才能优生。
如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。
此种溶血症主要发生在母亲为O型，婴儿为A型或B型者。所以也叫ABO溶血症。
(二) Rh血型引起的新生儿溶血
分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫
HDN 的发病示意图
二、实验室检查（产前检查）
1. 血型鉴定
2.检查没亲血清中有无IgG性质的抗体并检测其效价
3.羊水分析
二、实验室检查 （患儿血标本检查）
直接抗球蛋白试验
红细胞抗体放散试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。
游离抗体试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。
三、新生儿溶血病治疗与预防
1.药物治疗与血浆置换
2. 提早分娩
3. 宫内换血
4.光照治疗与换血疗法
第六节 自动化血型分析技术
1.微柱凝胶法
2.微板法(血站较普及)
3.全自动血型分析仪检测法
本章节的重点内容是：ABO血型亚型、血型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！
一、名词解释
血型鉴正向定型
血型鉴反向定型
交叉配血试验
二、选择题
1、交叉配血时,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集反应,则血清中的抗体是
2、ABO新生儿溶血症可见于母亲为O型,胎儿的血型可为
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