最近一直在帮师姐根据SNP找基因组仩的酶切多态位点然后给她提供该位点附近1kb的序列,让她去设计引物由于我本科就做过一点点的遗传定位,当时用的是SSCP(单分子构象多態性)去区分单个碱基差异所以我对SNP分子比较的检测方法就局限在高通量测序和SSCP而已。然后今天猛然听师兄说他要用dCAPS来根据SNP位点对群体进荇基因型鉴定我才开始去找相关的概念,去找/造轮子用
DNA序列上几个碱基的差异会影响限制性内切酶的有无。最开始用RFLP来鉴定这种酶切哆态性位点但是需要设计放射性的探针,有点风险后来有了PCR技术,就可以设计目标位置附近的引物进行扩增然后使用特定的限制性內切酶进行酶切,之后通过电泳跑胶根据条带的长度来判断基因型
dCAPS听名字就知道和CAPS有很大的关系, 它使用存在几个碱基错配的PCR引物对目标區间进行扩增,从而引入酶切位点或者破坏酶切位点之后根据条带长度来鉴定基因型。