宝宝在游泳池里洗澡,这速度达到多少可以飞是要飞起来吗

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【求助】冻存液怎么配置?
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有些书上说,可以用50%的小牛血清(RPMI1640)+DMSO,但问了其他一些同学,他们就直接用100%小牛血清+DMSO, 我刚接触细胞培养,请问各位前辈,这个小牛血清浓度不同,有什么区别么??查看完整版本请点击这里:
is2011 ( 13:00:09)
我们都是60%小牛血清+30%DMEM+10%DMSO,效果良好.
xue258 ( 13:00:30)
我们实验室一直是1分DMSO+9份培养液,效果一直不错,容易配置,操作简单
yueban-1147 ( 13:00:58)
right. actually 5%-10% DMSO in FCS-containing medium is enough.
cj_mondy ( 13:01:16)
那如果DMSO浓度稍微高了一点,大概13%,对细胞冻存有没有什么影响??
vcve ( 13:01:42)
应该没有影响,我曾经用过20%的DMSO,活化也没影响,不过后来一直用10%的
jkobn ( 13:02:11)
你们的小牛血清太浪费了,我们实验室都是30%小牛血清+60%DMEM+10%DMSO,从没出现问题.
喇叭花 ( 13:02:37)
20%小牛血清10%DMSO即可,注意冷却配好的冻存液。
66+77 ( 13:03:01)
细胞冻存,复苏时提高存活率的关键是冻存时温度降低的速度,而不是冻存液。如果有程序降温仪的话,就只是用培养基加DMSO的冻存液,复苏时的存活率也在80%以上。
vivian4123 ( 13:03:27)
10%DMSO+10%小牛血清(RPMI1640),效果很理想。我一直这么做的,复苏的细胞都长得很好!但注意要避免冻存液反复冻融造成DMSO裂解而释放出有害物质。
8princess8 ( 13:04:01)
血清:培养基:DMSO=6:3:1或血清:DMSO=9:1都可以,效果都很好,本人习惯用后者。
lgm ( 13:04:34)
我们是血清:DMSO=9:1 ,蛮好的
standbyme ( 13:05:40)
我们用10%胎牛血清培养液(DMEM),效果可以
xyw5 ( 13:06:02)
个人认为血清比例太大只是浪费,我一直使用10%血清+10%DMSO
几年来一直还不错。
很赞成控制好冻存温度是存活的关键。
气泡 ( 13:06:28)
我也用血清:DMSO=9:1,冻其他的细胞都挺好的,可是冻原代培养的存活率只有1%,各位大侠们有什么办法吗?快急死了:(
KGZ564 ( 13:07:07)
培养液(1640,IMDM等):牛血清:DMSO=4:5:1
关键是:冻的时候要慢,逐渐降温
复苏的时候要快,1分钟内解决战斗,,有人建议只要能从冻存管里面倒出来,就可以立即离心了,不要管有没有冰,我还没有试验过。不过园子里面这样的东西,非常多的,你用search 功能看下,在页面的左上角
BOSS2011 ( 13:07:40)
我们实验室用的相对权威,效果屡试不爽,建议使用:无血清培养液(DMEM)50%+胎牛血清FBS 40%+DMSO 10%,过滤除菌。冻存原则:慢冻快融。浓度依情而定,一般每盘分成1~2管,冻存时4度两小时,之后-20度半小时,-80度过夜,次日置于液氮保存。复苏则直接置于37度较好。
duoduo ( 13:08:04)
我们实验室都是用1分10%DMSO+9分血清,蛮好的。很方便,楼上的有人用,你可以试试。主要看自己的实验室的条件了,那个方便省材。YIFEI1981的我看也可以。
JK.jon ( 13:08:27)
甘油行不行?
utt0989 ( 13:08:55)
我们用10%的二甲亚砜,20%血清,70%培养基.以上浓度都为终浓度.如取1毫升二甲,2毫升血清,7毫升培养基,共10毫升制悬细胞后分装到冻存管中
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求助,火车头采集web发布测试配置错误
火车车厢 节
发内容--WEB发布错误,返回代码请查看:File:///D:\Program Files\LocoySpiderV2009\Data\35-淘宝女装\WebError.log
web发布测试配置也不行,错误的代码都是一样,采集规则和发布模块都是我自己做的,dedecms5.6淘宝客采集,下面把我的规则和发布模块拽图给大家看看,还有我的错误原因,希望高手帮帮我,我已经做了好几天几夜了都不成功。
火车头采集商品,发内容--WEB发布总是错误,返回的代码说我没有填写任何东西,web发布测试也是这样测试结果的代码如下图 :
在内置浏览器显示的结果就是发布商品那个空白界面,如图:
意思就是说我没有填写任何内容,但我内容全部都填了,在采集内容测试的时候都可以,采集网址规则如下图:
采集内容规则如图:
发布内容设置如图:
web在线发布设置如图:
文件保存及部分高级设置如图:
这些模块规则测试都没问题,发布测试就不行了,弄了几天几夜都没结果,求高手帮帮小弟,再上传发布模块的图给大家帮我看看。
这些都是我自己做的,dedecms5.6淘宝客的规则,做了好几天,可是发布测试都错误,不能提取规则里面的内容,发布测试显示什么内容都没有填写,可是规则里面所有内容我都写了,发布测试那里也写,但还是发布的是空的发布界面,请大家一定要帮帮我,小弟在此先谢过,希望在这里能够找到答案。
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火车车厢 节
你好。是DEDE自定义模块吗。
火车车厢 节
不是的,是我自己修改的淘宝客模块。
火车车厢 节
你在文章发表参数那里所填写的标签名要跟你采集内容规则设置那里的标签名一致的
火车车厢 节
问题解决,是我的发表数据参数cid=[分类ID]后面少了这个“&”分号符。
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