（7分）如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，(1)那么所形成的重组质粒pZHZ2
。A．既能被E也能被F切开
B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开
D．能被F但不能被E切开
(2)已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为
kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。（2分）(3)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则应该选择的受体细胞是
。若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是
。 (4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是
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（7分）如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，(1)那么所形成的重组质粒pZHZ2
。A．既能被E也能被F切开
B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开
D．能被F但不能被E切开
(2)已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为
kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。（2分）(3)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则应该选择的受体细胞是
。若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是
。 (4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是
（7分）如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，(1)那么所形成的重组质粒pZHZ2
。A．既能被E也能被F切开
B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开
D．能被F但不能被E切开
(2)已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为
kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。（2分）(3)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则应该选择的受体细胞是
。若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是
。 (4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是
科目:最佳答案见解析解析
⑴限制酶具有专一性，只能识别特定的DNA序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键形成DNA片段。由题意可知，重组质粒上含有限制酶E和F的切割位点，所以既能被E也能被F切开。A项正确。⑵根据题中信息，原来质粒长度为3.7kb，切去EF（0.2kb）之后还有3.5kb，插入目的基因后形成重组质粒，重组质粒的长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，进而可推导出目的基因长度为4.7－3.5＝1.2kb。重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶切位点外，还有一个G酶切位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切后产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的H酶切位点外，还有一个H酶切位点；根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中”，可确定在EF之间分别含有一个G和H的酶切位点，进而可断定G的识别位点，在距E点右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处。⑶将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵为受体细胞；重组质粒若插入一条染色体DNA上后，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊。⑷根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA。
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关注我们官方微信关于跟谁学服务支持帮助中心下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点. 下图是转基因抗病香蕉的培育过程.含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答下列问题: (1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒.不能使用SmaI酶切割.原因是 . (2) 构建含目的基因的重组质粒A时.选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对 和 进行切割.可以防止质粒和含目的基 题目和参考答案——精英家教网——
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。&
【答案】（1）SmaI酶会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因（2）外源DNA和质粒（3）①④⑤&&（4）全能性&脱分化&再分化&生长素&细胞分裂素&&&异养需氧型（5）用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫【解析】试题分析：（1）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点，都可以被SmaI酶破环，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA。(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamhHI 和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，同理，也可以防止质粒自身环化。(3)— (4)图中①是构建基因表达载体，存在碱基互补配对；②③是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，不存在碱基互补配对；④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化，这两个过程都在进行有丝分裂，所有都存在碱基互补配对；培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是异养需氧型。故①?⑤中存在碱基互补配对的是①④⑤。(5)可以从个体水平鉴定图示过程最终是否取得成功，其鉴定方法为：用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫。考点：本题考查基因工程和植物组织培养的相关知识。点评：本题以抗病香蕉味素材，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，意在考查考生的理解能力、识记能力和应用能力。&
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科目：高中生物
来源：2011届上海市奉贤区高三上学期调研测试生命科学试卷
题型：综合题
分析有关基因工程的资料，回答问题。（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：58、一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割后，含有&&&&&个游离的磷酸基团。59、用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。60、为了获取重组质粒，应将&&&&&&&&&&&&与&&&&&&&&&&混合，并加入&&&&&酶。61、重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。62、若外源DNA中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则其连续复制4次，至少需要提供胸腺嘧啶&&&&&个。63、利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单，甚至可能直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。
科目：高中生物
来源：2011届江西省安福中学高三年级入学考试生物试卷
题型：综合题
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有&&&&&&&个游离的磷酸基因。（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越&&&&&&。（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（4）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入&&&&&&&&&&酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了&&&&&&&&&&&&&&。
科目：高中生物
来源：学年湖南益阳箴言中学高三第二次模拟考试生物卷（解析版）
题型：综合题
回答基因工程中的有关问题：（15分）Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图甲、图乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图甲所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有&& &&&&个和_______ 个游离的磷酸基团？（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越&&&&&&&。（3）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止&& &&&&&&。Ⅱ．原核生物（如大肠杆菌）是基因工程中较理想的受体细胞，它们具有一些其他生物没有的特点：①繁殖快②多为单细胞③______________等优点．大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_________处理细胞，使之成为_________&&___细胞，然后完成转化．Ⅲ．植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是__________,且一般将目的基因插入Ｔi质粒的____________中形成重组Ｔi质粒，这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上，科学家发现：这样得到的转基因植株，其目的基因的传递符合孟德尔遗传规律，则该转基因植株一般为___________子。若要避免基因污染，一般需将目的基因导入植物细胞的__________DNA中。&
科目：高中生物
来源：2014届广东省高二第二学期期末考试生物试卷（解析版）
题型：选择题
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，下图中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述不正确的是A．图中质粒分子经SmaⅠ切割后含有4个游离的磷酸基团B．若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高C．抗生素抗性基因的作用是为了鉴别和筛选含有目的基因的细胞D．用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA比只用EcoRⅠ一种酶更好&
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