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巨细胞病毒感染与儿童特发性血小板减少性紫癜
中华血液学杂志 1998年第3期第19卷 研究报告
作者：李兰娜　佟莉贞　何丽雅　赖冬波　伍劲松
单位：510120 广州市儿童医院血液内科
我们用聚合酶链反应(PCR)技术检测103例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿巨细胞病毒(CMV)-DNA、CMV-IgM水平和T-淋巴细胞(T-细胞)转化功能，以探讨CMV感染与ITP及细胞免疫功能的关系。
　　对象和方法
1995年1月～1996年9月在我院血液内科住院的103例ITP患儿,男65例,女38例，年龄2个月～14岁。急性型71例，慢性型32例，均经临床、血象和骨髓象确诊，符合1986年首届全国血栓与止血学术会议有关出凝血疾病的诊断标准。病例选择为发病10天内(或慢性型复发者)的患儿。
患儿入院后即采集静脉血5ml置抗凝管内,离心后吸取血浆黄层中白细胞用作CMV-DNA测定，吸取上层血浆用作CMV-IgM测定,同时采外周血测定T-细胞转化功能。PCR方法检测CMV-DNA，所用试剂盒购自厦门长城生物工程有限公司，具体反应步骤见试剂盒说明书。扩增产物在2%琼脂糖凝胶中电泳，经溴乙锭染色，在紫外线下观察结果。每次均设有阳性及阴性对照。间接酶联免疫吸附法检测血浆中CMV-IgM，操作方法参照文献［1］。CMV-IgM≥1∶100为阳性，阳性者标本进行重复性检验。T-细胞转化试验的测定标准：＜0.45为T-细胞功能低下。
103例ITP患儿的血标本CMV-DNA、CMV-IgM测定及T-细胞转化功能测定结果见附表。在慢性型反复发作的患儿中CMV-DNA阳性率为90.6%(32例中29例)，CMV-IgM阳性率为78.1%(32例中25例)，其中16例CMV-DNA和CMV-IgM同时为阳性。在CMV-DNA阳性的患儿中T-细胞功能低下者占93.5%(31例中29例)，CMV-IgM阳性的患儿中T-细胞功能低下者占92.0%(25例中23例)。同时临床资料证实这些患儿伴有不同程度的反复感染及出血等。在71例急性ITP患儿中检出CMV-DNA阳性2例(2.8%)，未检出CMV-IgM阳性者。
我们的观察证实ITP患者CMV-DNA、CMV-IgM阳性率较高，T-细胞转化功能降低，尤其在慢性反复发作的患儿中CMV-DNA、CMV-IgM阳性率很高，治疗效果不佳，出血症状明显，难以控制。提示CMV感染可能是抑制患者细胞免疫功能、导致ITP患者容易反复发作的重要原因之一。
　　本研究中急性ITP患儿CMV-DNA和CMV-IgM的阳性率均很低，提示可能与CMV感染的关系不大。
附表 103例ITP患儿CMV活动性感染检测结果与临床表现
T-细胞功能
临床上对于ITP患者的原发病毒感染的诊断存在一定困难。病毒分离虽然特异性高，但费时、费力、费用高，难以在临床普及。应用PCR技术测定CMV-DNA、ELISA方法测定血中的MV-IgM，2天内便可得到结果，并且具有特异性强、灵敏度高等优点，不仅能诊断活动性CMV感染，而且对潜在性的CMV感染也有确诊意义。这种方法的临床应用可提高对ITP患儿CMV感染的诊断率，在同时了解患儿的细胞免疫水平后，可指导临床正确应用抗病毒药物及免疫抑制剂。对一些难治性、反复发作的ITP患儿进行CMV感染动态监测，对临床观察和治疗也有一定的帮助。
　　参 考 文 献
Kangro HO,Booth JC,Bakir TM,et al.Detection of IgM antibodies against
　　cytomegalovirus:comparison of two radioimmunoassays,enzyme-linked immunosorbent assay and immunofluorescent antibody test.J Med Virol,-80.
(收稿: 修回:)
(校对:仵乾玉)
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