实验中细胞培养中污染的特点
污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视，防止污染，否则会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。 细胞培养中常见的生物污染类型有7种，分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下：&1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 &&2、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。3、黑胶虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。4、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。5、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。6. 病毒：组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题7、非同种细胞污染 ：即是细胞交叉污染，由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染，致使许多实验宣告无效。非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生，大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致。 在上述的八种污染物中，黑胶虫是现代细胞培养中讨论比较多的，但大多数文献未对其进行描述或一带而过，就像上面关于描述黑胶虫的情况是不完整，还有很多不明的情况。对其身份有多种猜测，到现在都没有权威地对黑胶虫进行分类学上的归类。黑胶虫到底是不是一种生物，如果是那黑胶虫会是何种生物，如果不是，那黑胶虫会是什么？一系列的问题都悬在奋斗在细胞生物学领域的学者们的心中。上海劲马根据以上细胞污染都有解决办法，详情请来电咨询我司技术人员，我们配备有先进的实验设备，对这类实验有着丰富的经验，欢迎您的电联。我们将为广大客户提供更多更全面的售前售中，售后服务。
@中国安防展览网AFzhan
扫一扫，官方微博互动多
微信号：AFzhan
扫一扫，安防讯息尽收眼底
全年征稿 / 资讯合作
联系邮箱：
更多相关信息
版权与免责声明
①凡本网注明"来源：中国安防展览网"的所有作品，版权均属于中国安防展览网，转载请必须注明
中国安防展览网。违反者本网将追究相关法律责任。
②企业发布的公司新闻、技术文章、资料下载等内容，如涉及侵权、违规遭投诉的，一律由发布企业
自行承担责任，本网有权删除内容并追溯责任。
③本网转载并注明自其它来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内
容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，
必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
免费注册后，你可以
了解安防行业更多资讯
查看安防行业供求信息
凸显安防行业自身价值
想快速被买家找到吗
只需要发布一条商机，
被买家找到的机会高达
90%！还等什么？
窗口售票售票效率低，常常造成窗口或者柜台处人群拥挤现象的发生，不仅影响
上海君旭智能高清车牌识别道闸一体机
呤云科技：新安防时代铸就智能出入管理新模式
聚英雄 创共赢 2017丰润达临安交流会圆满落幕
双向传输 东博视讯4G高清执法单兵使用“新姿势”
德生科技浅谈“互联网+人社”2020行动计划
东博视讯4G移动执法单兵在电力维护抢修中应用
“一路”车牌识别入驻漳州古城
在过去的十多年中，安防企业进军海外市场更多的是依赖海外分销商、代理商在国内
牟晓生：智慧停车要注重用户体验 满足安全便利需求
海康：SDT安防大数据时代 我们为什么需要深度智能？
蓝卡科技庄明华：未来智慧停车无人值守＋移动支付
大手控制马利：信息化管理 以人为本实现智慧停车
狄耐克赵宏：智慧停车后起之秀 着力解决城市停车难
中控智慧浅谈创新与融合 智能门禁市场未来可期
HID总监：智慧社区建设中智能安防商机巨大
匆匆那年 走在创业的路上不能停
　　阳春三月，钱塘江畔，人潮涌动！在上级领导的大力支持下
　　日，由中国安防展览网主办的&思正杯&rd
　　3月17日，大华股份参与投资的&零跑&汽车品
　　3月16，由杭州市安全技术防范行业协会主办、杭州全程会
　　日2017智慧停车发展高峰论坛暨第三届中国安防
第十六届中国成都国际安防展”于日在世纪城新国
2017第十九届东北国际公共安全防范产品博览会
2017（第十六届）南京智慧安防、反恐应急、智能家居及智能停车展
2017（第十六届）南京安防展暨智慧安防、民用安防、网络安全、智能家居及智能停车展
2017中国国际智能交通展览会武大专家发现抗艾滋病毒感染的新细胞
本网讯（通讯员蒋明）基础医学院年轻教授侯炜和动物实验中心教授霍文哲团队合作研究发现，一种名为&表达分子的淋巴细胞&具有抗艾滋病毒感染的作用，相关成果发表在月份美国著名学术刊物《淋巴细胞生物学》杂志上。据侯炜介绍，这种名为&表达分子的淋巴细胞&，是一类&桥梁细胞&，它既具有自然杀伤的功能，又能起到自我保护的功能，是人类天然免疫系统的一个重要的组成部分，在外周血单核细胞中占，而肠道和肝脏中的免疫细胞为此种细胞。但就是这种细胞，以前研究往往只被发现在抗肿瘤和抗肝炎病毒感染中起作用，而没有发现它在抗艾滋病毒感染中有较强作用。研究团队历经年多时间，首次发现，这种细胞培养液中的分泌物可以抑制艾滋病毒的感染和复制，并且这种活性具有广谱性，既可抑制实验室保存的艾滋病毒病毒株，也可抑制临床上分离得到的艾滋病毒病毒株。在研究培养液中的分泌物抑制艾滋病毒效应的机制过程中，团队还发现，虽然培养液中的分泌物对艾滋病毒进入细胞的协同受体影响甚微，但其分泌物可增强干扰素调节因子的作用，从而引起巨噬细胞发挥作用，&抗击&艾滋病毒。此外，&表达分子的淋巴细胞&具有增强细胞内一种新发现的抗艾滋病毒的细胞因子的作用。（编辑：陈丽霞）&转自武大新闻网
分享这篇日志的人也喜欢
热门日志推荐
人人最热标签
分享这篇日志的人常去
北京千橡网景科技发展有限公司：
文网文[号··京公网安备号·甲测资字
文化部监督电子邮箱：wlwh@··
文明办网文明上网举报电话： 举报邮箱：&&&&&&&&&&&&
请输入手机号，完成注册
请输入验证码
密码必须由6-20个字符组成
下载人人客户端
品评校花校草，体验校园广场您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
病毒感染实验诊断病毒感染实验诊断.doc 5页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
下载提示
1.本站不保证该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值，立即自动返金币，充值渠道很便利
需要金币：200 &&
你可能关注的文档：
··········
··········
病毒感染实验诊断1.（1）一般原则是特异敏感、快速和简便。首先根据流行病学和临床特点，初步判断可能感染的病毒。（2）然后根据可疑病毒的生物学特点、机体免疫应答和临床过程，以及病人当前所处的时机，确定实验诊断方法。2.（1）对潜伏期短，发病时尚无抗体产生，可选择测定病毒颗粒、病毒抗原或核酸。（2）对潜伏期超过十天的感染，可检测特异性的IgM抗体来进行早期快速诊断，及区别初次和再次感染。（3）对可在体内形成持续感染或潜伏感染的病毒，可检测急性期和恢复期双份血清的IgG抗体有无4倍以上升高，或直接检测病毒核酸。（4）对原因不明或有新病毒感染时，应采集标本进行病毒分离，同时应采取双份血清以确认分离的病毒为病原体。（5）对同一症状可有多种病毒引起的情况，应同时检测几种相关病毒的病毒颗粒、抗原或抗体。（6）对由多个型别组成的病毒可测定它们的共同抗原。第一节标本采集与运送一、标本的采集1.采样时间：尽可能在发病的初期，急性期或患者人院的当天进行。2.标本种类的选择：根据临床感染的症状及流行病学资料，判断可能感染病毒种类，选择相应部位采取标本。常见分离病毒标本的选择：3．常见标本的采集方法(1)血液：以无菌取抗凝血10ml。抗凝选用100n／ml肝素钠。用于分离CMV、HSV，、黄病毒、EBV、HIV-1及新生儿肠道病毒。(2)脑脊液：以无菌取脑脊液1～2ml，冰浴立即送检。在4℃可存放72h。用于分离柯萨奇病毒、ECHO病毒、肠道病毒、腮腺炎病毒。(3)宫颈或阴道拭子：采取病灶部位分泌物，或将拭子伸人宫颈约lcm停留5秒取出，冰浴立即送检。用于分离HSV、CMV。(4)粪便标本：取2～4ｇ粪便加10ml运送液立即送检，用于分离腺病毒、肠道病毒和轮状病毒。(5)含漱液：用无菌生理盐水让患者含漱。用于分离流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、RSV等。(6)喉拭子：用压舌板避免唾液污染，用拭子采取咽喉部表面。用于分离腺病毒、CMV、肠道病毒、HSV、流感病毒等。(7)尿道拭子及尿液标本：尿道拭子伸人尿道4cm转动3次，以获得较多的上皮细胞，用于分离CMV和HSV。(8)尸检标本：死亡后尽早采集各种器官，分别使用器械和容器。二、标本的运送和保存1.病毒抵抗力弱，室温中容易灭活，用于分离培养的标本要尽快送检，4℃下数ｈ或-70℃。冻存液中加入甘油或二甲基亚砜(DMSO)等作保护。2.病毒传送培养基以Hanks液为基础加灭活的小牛血清。为抑制细菌生长加青霉素100U／ml和链霉素100μg／ml，为了抑制真菌的生长加入2．5μg／ml二性霉素B或40μg／ml制霉菌素。第二节病毒分离与鉴定一、病毒的分离方法1.组织细胞培养根据细胞的来源、特性和传代次数分为：(1)原代细胞培养：将细胞悬液。加入营养液培养。形成的单层细胞，称之为原代细胞。(2)二倍体细胞株：仍保持二倍体特性。寿命一般为40～50代，如人胚肺细胞。广泛用于病毒分离和疫苗制备。(3)传代细胞系：来于肿瘤细胞，染色体特征类似肿瘤细胞。常用的有人宫颈癌细胞(Hela)、人喉上皮癌细胞(Hep-2)。2．鸡胚接种鸡胚是用于分离粘病毒科、疱疹病毒、痘类病毒的较为理想的材料。3．动物接种动物对病毒的敏感性是不同的，选择合适动物十分重要。小鼠、乳鼠、家兔、豚鼠、猴等常用于分离病毒。常用于病毒分离的细胞二、病毒的鉴定：必须通过全面了解其特性才能得到鉴定。1.根据临床特点，流行病学资料，标本来源，大致了解病毒的一些特性，有助于确认病毒的种类。2.动物感染范围及特点病毒感染动物的范围、发病的潜伏期。3.细胞培养特点。综合上述1/2/3资料作出鉴定。4.病毒鉴定的方法（1）细胞培养的结果观察：病毒增殖后导致细胞发生：①细胞病变效应(CPE)。细胞肿大，变圆堆积成葡萄状，细胞溶解出现空斑，细胞融合形成多核巨细胞，胞浆内或核内出现嗜酸性或嗜碱性包涵体等；②不出现细胞病变现象。③细胞培养液pH的变化。中和试验：病毒与特异性抗体进行免疫反应，使病毒失去感染性，在细胞培养和活的机体内不出现病变的试验。常用细胞培养进行中和试验。如果特异性抗体能中和病毒，使之失去感染性，不出现细胞病变效应，则该病毒为特异性抗体的同型病毒。用于病毒的分型诊断最具敏感和准确性。也可用于检查患者病后或人工免疫后，机体血清中抗体增加情况。（3）空斑或蚀斑形成试验：空斑是指在单层细胞中被病毒感染引起死亡的细胞区域，周围被活细胞包围。一般而言，一个空斑是由一个感染性病毒颗粒感染所引起的。不同的病毒引起的空斑形态和大小不同。可进行病毒颗粒的计数、纯化，结合中和试验可进行病毒的鉴定。（4）干扰现象：某些病毒间存在着干扰现象，如某些型别的鼻病毒能干扰以后进入的副流感病毒的增殖，从而阻抑后者的红细胞吸附作用。（5）红细胞吸附及吸附抑制试验：正粘病毒，副粘病毒感染的
正在加载中，请稍后...}