t细胞活化的第二信号细胞毒T细胞是否就是效应细胞毒T细胞

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细胞毒性(cytotoxic T cell,Tc或CTL),也称杀伤性T细胞,分为效应细胞毒性T细胞和毒性T细胞。前者能特异性杀伤带抗原的,如、及受感染的细胞等。的杀伤力较强,可反复杀伤靶细胞,而且在杀伤靶细胞的过程中本身不受损伤。当它们和靶细胞接触后,能释放,嵌入靶细胞膜内形成多聚体穿膜管状结构,便可通过此管状结构进入靶细胞,导致。Tc细胞还能分泌,从小孔进入靶细胞,诱发靶细胞凋亡。
细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cyto-toxic T-lymphocyte associated antigen-4,CTLA-4)是活化T细胞表面所表达的一种膜结合蛋白,最早由Brunet等在筛选小鼠杀伤性T细胞的cDNA扣除文库(subtract-ed library)时发现。随后的研究表明, CT-LA-4是系统B细胞激活抗原(B7)分子的受体之一。最近,人们才认识到辅助刺激因子(co-stimulating factor, CoF)在某些情况下受配对受体的正负调节,从而使T细胞向活化(activation)及失活化(anergy)两个不同的方向发展,产生不同的生物学效应。这一发现使人们对免疫调节在分子水平上又有了更深入的认识,并可由此设计、发展新的免疫调变技术和药物来防治某些疾病。
越来越多的研究显示CTLA-4基因在T1DM的发生中发挥重要的作用,但其确切的机制尚不明了,在上述各种研究中可以发现,在不同人群中,CTLA-4基因多态性与T1DM的相关性研究结果常常不尽一致,这可能与各研究者对疾病表型的定义标准不一、疾病的遗传异质性、各人群的遗传结构有差异、样本量过小以及环境风险因素的干扰等有关。并且,在国外的研究中,在不同种族或不同人群中易感基因相关位点的相互作用也不尽相同,中国北方及西北的汉族T1DM大多与+49G相关,南方汉族及少数民族是否也与之相关,其遗传差异还有待进一步研究与探讨。
常用四甲基偶氮唑盐法检测抗原特异性CTL的增殖,也可通过检测CTL前体细胞频数的方法来反映其功能。前体T细胞遭遇抗原后增殖,其频数可反映T细胞库中某一抗原特异T细胞的比率,可作为体外检测对某抗原细胞免疫反应强弱的一项重要指标。多用放射性示踪剂标记前体细胞,检测其增殖后的放射性标记的量,也可使用荧光染料结合流式细胞仪分析:将含特异前体细胞的标本用荧光染料处理,由于细胞分裂增殖后染料的平均分配,可通过荧光度的高低来推测细胞周期的数目,再用流式细胞仪检测每一代细胞数,最初的前体T细胞频数就能被计算出来。流式细胞仪能检出1 105细胞的增殖,敏感性较高,可分辨应答细胞的表型,而且通过使用不同荧光染料可同时检测几种T细胞。不过该法实验周期较长,且不能检测失能T细胞,使测定值偏低。
1.细胞因子检测 
活化的CTL分泌功能性细胞因子,如IL-2、干扰素γ(IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)等,通过检测细胞因子的分泌情况可反映T细胞的活性。
固相酶联斑点法(Enzyme-linked immunospot,ELISPOT)
基于酶联免疫标记技术的基本原理建立的ELISPOT技术不仅灵敏度大为提高,而且能得到分泌细胞因子的细胞频数。CTL受抗原刺激后一旦分泌功能性细胞因子,就被预包被的抗体直接捕获,通过局部形成的斑点数目得出分泌细胞因子的T细胞频数,从而反映抗原特异性CTL的活性。Kim-berly等比较了分别检测颗粒酶B和IFNγ的ELISPOT法和51Cr释放法,实验结果显示三者相关性较好,并指出检测颗粒酶B的ELIS-POT法比IFNγ更快速更直接;ELISPOT法所需细胞少,鉴定抗原表位效率很高。Bilhl等使用循环ELISPOT技术,即将实验中未形成斑点的细胞回收,用少于10mL的外周血标本,检测人类免疫缺陷病毒、EB病毒、巨细胞病毒、乙肝及丙肝病毒等5种病毒的近400个CTL表位引起的抗病毒免疫,结果显示与普通ELISPOT检测没有显著差异,可用于评价多重病毒感染引起的细胞免疫。但除了CTL,一些辅助T淋巴细胞(CD+3和CD+4)、自然杀伤细胞等也可分泌相同的细胞因子,故还需结合细胞表型的分析;另一方面,实验中功能不活跃的或分泌其他细胞因子的CTL会被忽略,细胞频数将被低估。另外,此法较酶联免疫标记法昂贵,如果细胞产生大量细胞因子,则选用酶联免疫标记法较为经济。
3.流式细胞仪胞内细胞因子分析法
ELISPOT间接地提供分泌某细胞因子的CTL数目,如要更为准确的信息,可以用流式细胞仪胞内细胞因子分析法。Jung等采用莫能星(Mo-nesin)等药物预孵的方法,阻断胞内高尔基体介导细胞因子的转运,使其在细胞内蓄积,信号增强,然后应用两种免疫荧光抗体分别标记CTL表面的亚群标志分子和胞内细胞因子,用流式细胞仪进行检测和分析,即可得到不同T细胞亚群某一细胞因子的分泌情况。如采用多色荧光标记系统,可同时分析单个细胞内多种细胞因子的分泌情况,既提高效率更可减少误差。该法优势有:①快速,实验流程只需6~8h;②简便准确,无需组织培养,可以全血分析,也不需分离外周血单核细胞,接近生物体内的分析条件,可直接定量;③灵敏度高;④高效,该法是目前惟一能同时测定细胞表型及细胞因子类型的检测技术。因此,该法被较广泛地用于抗原表位的鉴定、疫苗效果的分析或比较等方面[11,12]。
同位素释放法以放射性标记物标记靶细胞,被效应细胞攻击后释放同位素,通过检测上清中放
射性核素每分钟闪烁计数值来评估效应细胞的杀伤力。经典的51Cr释放实验在近30年来一直被认为是CTL活性检测的“金标准”,但因安全性不佳,近年来已较少使用。乳酸脱氢酶法是常用的检测细胞毒活性的简便方法:靶细胞受到CTL攻击后胞膜受损,释放乳酸脱氢酶,催化乳酸形成丙酮酸盐,与四甲基偶氮唑盐类反应形成紫色的结晶物质,用酶标仪检测间接判断细胞受损的程度。乳酸脱氢酶释放试验与51Cr释放法相关性良好,且具有自然释放率低、操作简便和不存在同位素污染的优点,被广泛使用。不过该法影响因素较多,诸如培养基、酸碱度、温度、加底物显色时间和终止剂等,稳定性不够。杀伤力分析的方法具有直接和特异的优点,但是要求有大量的特异性CTL作为效应细胞,且T细胞需要经过体外刺激增殖,致使这类方法周期长、费时费力、敏感性低,而且只可定性、间接定量CTL的活性,不够精确。
& 2015 Yixue 医学百科 - 京ICP备号-5 - 京公网安备20号Tc17细胞:一组新型的细胞毒性T细胞--《天津医科大学学报》2015年02期
Tc17细胞:一组新型的细胞毒性T细胞
【摘要】:正细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells,Tc细胞)是一组由初始CD8+T细胞活化后分化而成的具有细胞毒性的效应细胞,又称为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。受自身MHCⅠ类分子的限制,并在抗原提呈细胞的协同刺激信号作用下进一步活化,形成可以特异性杀伤靶细胞的效应细胞毒性T细胞。依据分泌的细胞因子的不同,经典的
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:R392【正文快照】:
细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells,Tc细胞)是一组由初始CD8+T细胞活化后分化而成的具有细胞毒性的效应细胞,又称为细胞毒性T淋巴细胞(cy-totoxic T lymphocyte,CTL)。受自身MHCⅠ类分子的限制,并在抗原提呈细胞的协同刺激信号作用下进一步活化,形成可以特异性杀伤靶细胞的效应
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京公网安备75号下列关于免疫的描述错误的是( ) A.引起成熟的T淋巴细胞分裂分化的“抗原 专指抗原-MHC复合体B.效应B细胞与效应细胞毒性T细胞相比.具有更加丰富的内质网和高尔基体C.抗体能够与相应抗原结合.形成抗原-抗体复合物D.活化的辅助性T淋巴细胞引起的靶细胞裂解属于细胞坏死 题目和参考答案——精英家教网——
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下列关于免疫的描述错误的是(  )
A、引起成熟的T淋巴细胞分裂分化的“抗原”专指抗原-MHC复合体B、效应B细胞与效应细胞毒性T细胞相比,具有更加丰富的内质网和高尔基体C、抗体能够与相应抗原结合,形成抗原-抗体复合物D、活化的辅助性T淋巴细胞引起的靶细胞裂解属于细胞坏死
考点:人体免疫系统在维持稳态中的作用
分析:体液免疫过程为:(1)感应阶段:除少数抗原可以直接刺激B细胞外,大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理,并暴露出其抗原决定簇;吞噬细胞将抗原呈递给T细胞,再由T细胞呈递给B细胞;(2)反应阶段:B细胞接受抗原刺激后,开始进行一系列的增殖、分化,形成记忆细胞和浆细胞;(3)效应阶段:浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合,发挥免疫效应.细胞免疫过程为:(1)感应阶段:吞噬细胞摄取和处理抗原,形成抗原-MHC复合体,然后将抗原呈递给T细胞;(2)反应阶段:T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应细胞毒性T细胞,同时辅助性T淋巴细胞能合成并分泌淋巴因子,增强免疫功能.(3)效应阶段:效应细胞毒性T细胞发挥效应.
解:A、引起成熟的T淋巴细胞分裂分化的“抗原”指被寄生和微生物侵染的靶细胞,经过吞噬细胞形成的抗原-MHC复合体,故A正确;B、效应B细胞与效应细胞毒性T细胞相比,能产生抗体,抗体的化学本质是分泌蛋白质,具有更加丰富的内质网和高尔基体,故B正确;C、抗体能够与相应抗原结合,形成抗原-抗体复合物,再被吞噬细胞吞噬消化,故C正确;D、效应细胞毒性T细胞引起的靶细胞裂解死亡属于细胞凋亡,故D错误.故选:D.
点评:本题考查体液免疫和细胞免疫的相关知识,意在考查学生的识记和理解能力,需要注意D选项中在成熟的生物体中,细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除,通过细胞凋亡完成的.
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在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数.请分析回答.(1)如图是利用法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面.(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4?7H2O、KCl、H2O.若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述成分,并加入物质,以补充源.(3)四位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量.在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是.A.一个平板,统计的菌落数是23B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24C.三个平板,统计的菌落数分别是21、5和52,取平均值26D.四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25(4)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL).(5)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量,因为.(6)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现,在培养基上还有其他杂菌的菌落,能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了?,为什么?.
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A、B、C、D、
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