如何提取微藻植物基因组dna提取

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有没有人提取过小球藻基因组DNA啊?怎么我用文献上的改良CTAB方法提不出来啊
有没有人提取过小球藻基因组DNA啊?怎么我用文献上的改良CTAB方法提不出来啊
取2ml,12000离心10min,重悬于500ulCTAB(2%CTAB,2%巯基乙醇,0.1mol Tris-Hcl,PH8.0,1.4mol氯化钠,10mMEDTA)提取液,65度水浴1h,离心后,等体积氯仿异戊醇抽提,离心,上清转移至新鲜的1.5ml离心管,用2倍体积无水乙醇沉淀DNA,12000,离心15min,70%乙醇洗涤沉淀,溶解于无菌水中。
提取出来用微量核酸紫外测定仪测定浓度才十几ng/ul,做了pcr,没有啊
你是多少毫升藻液 ? 提取出来浓度怎么样啊?具体的过程可不可以给我看看啊!& &植物一般是100mg左右材料研磨的。大概称了一下2毫升的藻液离心后细胞湿重也就十几毫克的样子。是不是我的藻细胞太少了啊?但是文献上面都是2ml 的藻液(包括一篇英文文献)。求指教!!!!
对呀,我们一般用20ml的藻液离心回收。另外研磨时有很多技巧,因为藻液很黏,不掌握的话会很麻烦。比如器具提前遇冷等,这些都是实验室里积累的经验,光看文献也不行。文献的内容只是他们实验成功的记录,也就是说成功率高低谁也不好说,实际操作中,只要不是实质性的错误,其实改动和不精确都可以理解和接受,比如说是100mg,我们一般不称,根据感觉多少就可以。
我们这个方法我第一次做的时候也是不太理想,但是第二次通过第一次中出现的问题,比如太黏,研磨不好,比如添加PVP的量,比如抽提时应该注意的,等等……才成功,一般含量都在100ng/ul左右。
不加PVP效果怎么样啊?&&暂时没有这个试剂,要加的话,这学期是做不了。还有你的20ml 藻液最后大概得到多少DNA啊,不知道你是用多少ulTE溶解的,如果是30ul的话,那么你的应该是20ml 藻液最后得到3ug左右DNA吧,还有你的20ml 藻液离心液氮研磨后是假的多少CTAB提取液?
谢谢啊,你有做微藻转化么?留个 QQ交流下啊
藻的转化倒是没有做,毕竟微藻的基因工程比较难。我只是打算从藻里得到基因,拿到工程菌里把功能验证一下就可以了,毕业要紧呀…………呵呵。qq:,email: 。我也是菜鸟,咱们多交流。
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两株微藻基因组三代测序信息采集及分析(技术服务)
对提供的两株真核微藻(预计基因(略))进行total DNA提取,并进行质量检测,使用Pacbio测序平台对文库进行三代测序信息采集,并保证每个微藻样品信息采集量不低于50G,总量不低于100G(clean data),并对所有测序数据进行基因组拼接和两个基因组比较分析。 项目要求:对每个样本进行total DNA提取;分析方面,对获得的全部数(略),但不限于以下分析;如果在数据分析过程中,有新的分析方法出现须配合分析;分析内容后期如有修改,不得限制修改次数和内容;安排至少一名分析人员及时解答分析过程中的疑问,如确有必要,分析人员(略)。 分析内容:原始测序数据说明及统计;原始测序数据质控及统计;基因组拼接;保证两株微藻拼接结果N5(略)
按行业标准提供服务;在项目完成6个月内,对数据分(略)。
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如何提取微藻基因组DNA?
微藻DNA的提取是用CTAB法好,还是用试剂盒,用什么试剂盒比较好?请高手指点
请问你们是提微藻的吗&&我用细菌的试剂盒试了几次,没有提出来
请问你们用的什么试剂盒?
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一种快速提取微藻完整叶绿体及其DNA的方法}

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